загрузка...
 
Эритропоэтин как модулятор цитокин-синтезирующей активности клеток эритроидного ряда
Повернутись до змісту


Подпись: а)Подпись: пкг/мл
 
ЭЯК, выделенные из селезенок ЭЯК, выделенные из селезенок новорожденных мышей мышей после воздействия
фенилгидразина


IL-ip IL-2 IL-4 IL-6 IL-10 TNF-a IFN-y TGF-P

 

АГ-ЭБ позитивные ЭЯК КМ

? АГ-ЭБ позитивные ЭЯК КМ после 24 ч культивирования с ЕРО (2 U/мл)

Рис. 2. Влияние ЕРО на продукцию цитокинов АГ-ЭБ+ позитивными эритроидными ядросодержащими клетками костного мозга (1 х 106 кл/мл).

— р < 0,05.

снижению продукции ими IL-2 и IFNy. На продукцию цитокинов IL-1в, IL-4, IL-6, IL-10,

TNFa и TGFpi клетками АГ-ЭБ+ ЕРО не оказывал влияния.

Что касается популяции GlA+-клеток, то достоверных различий в продукции ими цитокинов после воздействия ЕРО найдено не было. Однако тенденция к снижению продукции цитокинов наблюдалась для таких медиаторов, как IL-4, IL-6,

TNFa, и к увеличению — для IL-ip, IL-2, IL-10,

IFNy и TGFpi.

Таким образом, значимое влияние ЕРО оказывал только на менее зрелые клетки, не воздействуя на более зрелую популяцию.

В результате обработки ЕРО АГ-ЭБ+-клеток в 100 раз снижалась продукция IFNy и более чем в 2 раза — продукция IL-2. Эти два цитокина являются ингибиторами пролиферации эритроид- ных клеток. Снижение продукции этих цитоки- нов эритроидными клетками может свидетельствовать об усилении пролиферативной активности АГ-ЭБ+ ЭЯК и отражать реализацию обратной связи посредством снижения аутокрин- ной секреции части ингибиторов пролиферации ЭЯК.

Полученные данные по изменению продукции цитокинов АГ-ЭБ+ популяцией ЭЯК в ответ на ЕРО весьма интересны, так как именно эти клетки несут основное количество рецепторов к EPO. Известно, что рецептор к ЕРО экспрессируется на более ранних эритроидных предшественниках, так называемых BFU-E и CFU-E (эритроидных бурстобра- зующих и колониеобразующих единицах; BFU-E — burst forming unit, erythroid; CFU-E — colony forming unit, erythroid), но на эритробластах экспрессия этого рецептора снижается и прекращается по мере их созревания [6]. В этот же момент происходит исчезновение с клеточной поверхности ЭЯК АГ-ЭБ [8]. Экспрессия GlA, наоборот, усиливается с дифференцировкой эритроидных клеток и достигает максимума на ретикулоцитах [10]. По- видимому, рецепторы к ЕРО выражены на АГ-ЭБ+ ЭЯК в большей мере, нежели на GlA+ ЭЯК. Наши эксперименты действительно показали способность АГ-ЭБ+ ЭЯК изменять цитокин-синтезиру- ющую активность в результате обработки ЕРО, тогда как GlA+ ЭЯК не изменяли уровня продукции цитокинов после обработки ЕРО.

Таким образом, ЕРО является не только фактором роста и дифференцировки для клеток эритроидного ряда, но и обладает модулирующими свойствами в отношении цитокин- синтезирующей активности ЭЯК. Действие ЕРО направлено на снижение продукции ци- токинов, оказывающих ингибирующее действие на пролиферативную активность эрит- роидных клеток.

 

Л ИТЕРАТУРА

Гольдберг Е.Д., Дыгай А.М., Шахов В.П. Методы культуры ткани в гематологии. — Томск: Изд-во Томск. ун-та, 1992. — 272 с.

Инжелевская Т.В. Продукция гемо-иммунорегуляторных цитокинов клетками эритроидного ряда мыши и человека: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. — Новосибирск, 2001. — 19 с.

Крысов С.В., Курамшин Д.Х., Силков С.А. и др. Использование электрохеми- люминесцентного метода для количественного определения цитокинов в различных средах // Клин. лаб. диагностика. — 2000. — № 12. — С. 39-43.

Лимфоциты. Методы: Пер. с англ. / Под ред. Дж. Клауса. — М.: Мир, 1990. — 305 с.

Павлов А.Д. Эритроидная дифференциация и механизмы действия эритро- поэтина // Успехи соврем. биол. — 1988. — Т. 105, № 1. — С. 117-133.

Broudy V.C., Lin N., Brice M. et al. Erythropoietin receptor characteristics on primary human erythroid cells // Blood. — 1991. — Vol. 77, № 12. — P. 25832590.

Liboi E., Carroll M., DAndrea A., Mahtey-Prevot B. Erythropoietin receptor signals both proliferation and erythroid-specific differentiation // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 1993. — Vol. 90, № 23. — P. 11351-11355.

Mechetner E.B., Tonevitsky A.G., Ievleva E.S. et al. Identification of a human erythroid cell surface antigen by monoclonal antibody HAE9 // Exp. Hema- tol. — 1987. — Vol. 15, № 4. — P. 355-359.

Metcalf D. The granulocyte-macrophage colony stimulating factors // Cell. — 1985. — Vol. 43, № 1. — P. 5-6.

Robinson J., Sieff C., Delia D. et al. Expression of cell-surface HLA-DR, HLA- ABC and glycophorin during erythroid differentiation // Nature. — 1981. — Vol. 289. — P. 68-71.

Sennikov S.V., Eremina L.V., Injelevskaya T.V. et al. Cytokine-synthesizing activity of erythroid cells // Rus. J. Immunol. — 2001. — Vol. 6, № 2. — P. 193202.

Sennikov S.V., Krysov S.V., Injelevskaya T.V. et al. Production of cytokines by erythroid cells of human embryonal liver // Eur. Cytocine Netw. — 2001. — Vol. 12, № 2. — P. 274-279.

Sennikov S.V., Krysov S.V., Silkov A.N. et al. Production of IL-10, TNF-a, IFN-y, TGF^1 by different populations of erythroid cells derived from human embryonal liver // Cytokine. — 2002. — Vol. 17 (in press).

Thiele D.L., Lypsky P.E. Regulation of cellular function by products of lysosomal enzyme activity: elimination of human natural killer cells by a dipeptide methyl ester generated from L-leucine methyl ester by monocytes or polymorphonuclear leukocytes // Proc. Natl. Acad. Sci. USA — 1985. — Vol. 82. — P. 2468-2474.

Wickrema A., Krantz S.B., Winkelmann J.C., Bondurant M.C. Differentiation and erythropoietin receptor gene expression in human erythroid progenitor cells // Blood. — 1992. — Vol. 80, № 8. — P. 1940-1949

Erythropoietin as a modulator of cytokine-synthesizing activity of erythroid cells

Sennikov S.V., Injelevskaya T.V., Krysov S.V., Kozlov V.A.

Institute of Clinical Immunology of SB RAMS

As we have demonstrated earlier, human and mouse erythroid nuclear cells have cytokine-synthesizing activity. Erythropoietin (ЕРО) is a specific factor regulating survival, proliferation and differentiation of erythroid cells. Our aim was to study ЕРО influence on cytokine-synthesizing activity of erythroid cells. As a source of erythroid nuclear cells (ENC) we used the cells of human bone marrow (BM), spleen cells of newborn (DBAxC57Bl/6)F1 mice and spleen cells of adult mice of the same strain after in vivo treatment by phenylhydrazine. ENC were isolated by positive and negative selection procedures using monoclonal antibodies. Erythroid cells (106 cell/ml) were cultivated for 24 h with and without ЕРО (5 U/ml for mouse and 2 U/ml for human cells). Quantitative determination of cytokines was performed by electrochemiluminescent method using ORIGEN Analyzer (IGEN Inc., USA). It was shown, that ENC isolated from spleens of either newborn or adult mice produce significantly lower levels of GM-CSF and IFNy at cultivation with ЕРО than do ENC cultivated without ЕРО. ЕРО showed significant influence on immature bone marrow cells only, i.e. on human АG-EB+ cells. EPO reduced significantly IL-2 and TFNg production by these cells. Thus, ЕРО is the modulator of ENC cytokine-synthesizing activity and inhibits production of these cytokines by ENC. The above mentioned cytokines inhibit erythroid cells proliferation.

Key words: erythropoietin, erythroid cells, cytokines.


 

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

© Коллектив авторов, 2002 УДК 575.113:616-022:612.017.1



загрузка...