загрузка...
 
РАЗДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА БЕЛКОВ
Повернутись до змісту

РАЗДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА БЕЛКОВ

Почти любой биологический объект - от слюны и плазмы крови до цитозоля и надмолекулярных структур - представляет собой сложную, многоликую смесь разнообразных белков. Все они обладают практически одинаковым набором химических свойств. Поэтому традиционные методы химии (например, химическая реакция со специфическим реагентом) непригодны для выделения и очистки индивидуального белка. Они позволяют лишь обнаружить наличие некоторых химических группировок (аминогруппа, дисульфидная связь и т.д.), каковые, как оказалось, есть практически у всех белков. Невозможность получения достаточно очищенных препаратов разных белков длительное время сдерживала изучение их строения и индивидуальных свойств. Проблема эта постепенно решалась по мере развития методов (и соответствующей аппаратуры), которые позволили использовать даже небольшие различия в физико-химических и физических особенностях разных белков. Однако и до сих пор не существует какого-либо универсального метода, который позволял бы в один прием получать любой белок в высоко- очишенном состоянии. Необходимо проводить разделение и очистку в несколько последовательных этапов. На каждом из них используется наиболее подходящий из известных методических приемов. Принципиальные основы некоторых из них изложены выше (избирательная денатурация, дробное фракционирование высаливанием или путем использования некоторых органических растворителей). Остальные методы можно свести в 3 группы: ультрацентрифугирование; электрофорез; хроматография.



загрузка...