загрузка...
 
Изучение регуляторных функций аллоспецифических цитотоксических Т-лимфоцитов
Повернутись до змісту

Изучение регуляторных функций аллоспецифических цитотоксических Т-лимфоцитов

Т.В. Анфалова, Л.М. Хромых, Д.Б. Казанский Российский онкологический научный центр РАМН, Москва

В настоящее время известно, что среди Т-клеточной популяции лимфоцитов существуют регуляторные (супрессорные) клетки, действие которых проявляется в ингибировании активности других Т-клеток. Действие супрессорных клеток можно проследить при развитии аутоиммунных заболеваний, аллергиях, трансплантационных вмешательствах, а также при развитии различных иммунодефицитных состояний.

Данная работа посвящена изучению регуляторных функций аллоспецифических цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ). Работу проводили на линиях аллоспецифических ЦТЛ, полученных от иммунных животных и в дальнейшем генерированных in vitro путем нескольких стимуляций. Специфическую активность ЦТЛ проверяли по их способности лизировать аллоген- ные клетки-мишени (макрофаги) по сравнению с сингенным контролем. Уровень специфического лизиса составлял 80—90 %. Было показано, что внесение полученных ЦТЛ в реакцию смешанной культуры лимфоцитов (СКЛ) приводит к резкому подавлению (в 3—10 раз) пролиферативного ответа — независимо от специфичности отвечающих клеток, стимуляторов и ЦТЛ, участвующих в данной реакции. Аналогичный эффект наблюдали в случае неспецифической стимуляции Т-клеток при помощи конканавалина А в реакции бласттрансформации (РБТ). Ингибирующий эффект сохранялся, если регуляторные клетки добавляли в клеточную систему на вторые и даже третьи (в случае СКЛ) сутки. Внесение аллоспецифических ЦТЛ в умеренно пролифирирующие клеточные системы, такие, как ауто- СКЛ или спонтанно пролиферирующие лимфоциты селезенки или лимфатических узлов, не приводило к какому-либо изменению интенсивности пролиферации. Внесение изучаемых ЦТЛ в культуры ряда опухолевых клеточных линий также приводило к угнетению пролиферации этих клеток — независимо от гаплотипа опухоли. Подавление пролиферации происходило только при непосредственном контакте ЦТЛ с клетками-мишенями. Разделение мембраной отвечающих и регуляторных клеток в РБТ приводило к отмене супрессорного эффекта. Подавление пролиферации в реакциях СКЛ и РБТ под влиянием ал- лоспецифических ЦТЛ не является результатом апоптоза, реализуемого через Fas—FasL или перфорин. Ингибирующий эффект ЦТЛ обнаруживался при внесении их в культуру лимфоцитов мышей MLR/lpr, которые несут мутантную Fas-молекулу на клеточной поверхности. Использование соединений, блокирующих синтез перфорина, также не препятствовало проявлению ингибирующего действия ЦТЛ.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о полифункциональности аллоспецифических ЦТЛ, которые, наряду с выраженным цитолитическим действием, выполняют регуляторные функции.



загрузка...