загрузка...
 
Молекулярно-генетический анализ полиморфных вариантов гена TNFa у больных хроническими неспецифическими заболеваниями легких
Повернутись до змісту

Молекулярно-генетический анализ полиморфных вариантов гена TNFa у больных хроническими неспецифическими заболеваниями легких

Д.Г. Янбаева1, Г.Ф. Корытина1, Ф.Х. Едиханова2, Т.В. Викторова1 Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН; 2Городская клиническая больница № 13, Уфа

Хронические неспецифические заболевания легких (ХНЗЛ) составляют гетерогенную по природе группу болезней органов дыхания, среди которых в самостоятельную группу выделяют обструктивные заболевания легких, в том числе хронический обструктивный бронхит (ХОБ). По заключению экспертов ВОЗ, бронхолегочные заболевания относятся к числу наиболее часто встречающихся хронических болезней человека. В связи с этим является актуальным поиск генов, участвующих в развитии этой мультифакториальной патологии.

В мокроте больных ХНЗЛ обнаруживаются повышенные количества провоспалительных цитокинов — фактора некроза опухолей a (TNFa), интерлейкина 1р, 6, 8. Чрезмерное воспаление сопровождается деструкцией легочной ткани, что в конечном итоге приводит к пневмосклерозу и прогрессирующему снижению функции внешнего дыхания. В промоторной области гена TNFa описан полиморфизм, обусловленный заменой гуанина на аденин в 308 положении (-308G^A), проявляющийся увеличением эффекта «дозы гена» в ряду генотипов GG^ GA^-AA. Имеющиеся в литературе данные свидетельствуют, что мутантный аллель А приводит к двукратному увеличению транскрипции гена TNFa, что в свою очередь обусловливает повышение концентрации цитокина — фактора некроза опухолей a в мокроте.

Цель исследования — изучить полиморфизм промоторной области гена TNFa в группе больных ХНЗЛ и в контрольной группе. Молекулярно-генетический анализ полиморфных вариантов гена TNFa проведен у 64 больных ХНЗЛ, находившихся на стационарном лечении в БСМП и ГКБ № 13 Уфы (среди них

Подпись: Ц И Т О мК И Н Ы— с бронхопневмонией, 31 — с хроническим бронхитом, в том числе 26 — с ХОБ, 7 — с астмой и по 2 — с бронхоэктатической болезнью и бронхообструктивным синдромом), и у 68 лиц из контрольной группы. ДНК выделяли из лейкоцитов периферической крови стандартным методом фенольно-хлороформной экстракции. Изучение полиморфизма гена TNFa проводили методом анализа полиморфизма длин рестрикционных фрагментов. Для этого делали гидролиз амплифицированного фрагмента ДНК, включающего необходимый участок ДНК рестрикта- зой Nco I фирмы «Сибэнзим» в стандартных условиях. Рестри- цированные фрагменты ДНК разделяли электрофоретически в 8 %-ном полиакриламидном геле с последующими окрашиванием раствором бромистого этидия (0,1 мкг/мл) в течение 15 мин и визуализацией в проходящем ультрафиолетовом свете.

При анализе полиморфных вариантов гена TNFa в группе больных обнаружено, что частота мутантного аллеля А в группе больных ХНЗЛ составила 0,183, тогда как у здоровых лиц частота этого аллеля не превышала 0,128. Распределение частот генотипов характеризуется повышением частоты генотипа G/A у больных ХНЗЛ (0,302) по сравнению с соответствующими показателями в контрольной группе (0, 213), относительный риск составил OR = 1,61. Увеличение доли мутантных генотипов гена TNFa среди больных ХНЗЛ указывает на то, что индивиды с генотипами G/A и A/A, возможно, имеют повышенный риск развития хронических заболеваний органов дыхания.



загрузка...