загрузка...
 
Экспрессия мРНК цитокинов и метаболические нарушения в центральной нервной системе крыс с экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом
Повернутись до змісту

Экспрессия мРНК цитокинов и метаболические нарушения в центральной нервной системе крыс с экспериментальным аллергическим энцефаломиелитом

И.Н. Абдурасулова1, О.Е. Зубарева1, А.В. Поздняков2, Ю.Л. Житнухин1,

В.М. Клименко1

аГУ НИИ экспериментальной медицины РАМН, С.-Петербург; 2ЦНИРРИ, С.- Петербург

Экспериментальный аллергический энцефаломиелит (ЭАЭ) имеет общие патогенетические механизмы с демиелинизирую- тттими заболеваниями человека, что позволяет использовать эту модель для изучения патологических процессов в ЦНС. Доказана ключевая роль провоспалительных цитокинов, прежде всего TNFa, в инициации воспалительных и аутоиммунных реакций, а также регуляторная и защитная функция противовоспалительных цитокинов, особенно IL-10.

В данной работе исследована зависимость паттерна экспрессии цитокинов и метаболических изменений в мозге крыс от выраженности неврологических нарушений у крыс при ЭАЭ.

ЭАЭ у самок крыс Wistar вызывали однократной инокуляцией гомогената гомологичного мозга (ГГМ) в полном адъюванте Фрейнда. Тяжесть заболевания оценивали в баллах от 0 (нет клинических появлений) до 6 (летальный исход). Экспрессию мРНК цитокинов выявляли методом обратной транскрипции с последующей полимеразной цепной реакцией (ОТ-ПЦР) на 6, 13, 24 и 28-е сут. Метаболические нарушения регистрировали методом протонной магнитно-резонансной спектроскопии на аппарате «Magnetom Vision» с магнитным полем 1,5 Т (фирмы «Сименс»).

Введение ГГМ вызывало у крыс заболевание разной тяжести. Развитие неврологических нарушений у животных сопровождалось экспрессией мРНК провоспалительных цитокинов TNFa и/или IL-1 в в спинном мозге. У животных с большей тяжестью и длительностью заболевания в ЦНС мРНК TNFa выявлялись на пике заболевания (14-е сут.) и в более поздние сроки (24—28-е сут.). Т. е., чем дольше сохранялась экспрессия мРНК провоспалительных цитокинов, тем более длительное и тяжелое заболевание наблюдали у животных. В период выздоровления у животных появлялась экспрессия мРНК IL-10 и IL-1Ra. Следует отметить, что при наличии мРНК IL-10 не обнаруживалась экспрессия мРНК TNFa, а при наличии IL-1Ra

IL-1 р. Очевидно, усиление экспрессии противовоспалительных цитокинов подавляет патологический процесс в ЦНС.

Аналогичную роль играют противовоспалительные цитоки- ны, экспрессируемые клетками крови. Исследование динамики уровня IL-10 в крови при ЭАЭ методом иммуноферментного анализа показало, что раннее (в доклинический период) увеличение содержания этого цитокина предопределяет более легкое течение заболевания в клинический период.

Выявленные метаболические изменения в мозге животных коррелировали с тяжестью заболевания. Уровень метаболитов у легко болевших поправившихся животных практически не отличался от соответствующего показателя у контрольных. У крыс с тяжелыми неврологическими нарушениями регистрировали существенное уменьшение уровня N-ацетиласпартата (NAA) и креатина (Cr) (в 21 и в 7,6 раза соответственно) и увеличение пика холина (Cho) (в 4,1 раза), кроме того, в спектре появлялся двойной пик липидов. Можно предположить, что незначительные отклонения в содержании метаболитов имеют обратимый характер и связаны с временной дисфункцией клеток мозга, вызванной воспалительными реакциями. Существенное снижение NAA и Cr, особенно при наличии липидов, по-видимому, свидетельствует о необратимости патологического процесса, сопровождающегося не только функциональными нарушениями нервных клеток, но и их гибелью, что подтвердили результаты нейроморфологического анализа.

Работа поддержана РФФИ, грант № 02-04-49595.



загрузка...