загрузка...
 
Роль цитокинов и метаболических факторов в механизмах инволюции тимуса при опухолевом росте
Повернутись до змісту

Роль цитокинов и метаболических факторов в механизмах инволюции тимуса при опухолевом росте

Е.П. Киселева, Р.П. Огурцов, А.Н. Суворов, Д.И. Габрилович

 аГУ НИИ экспериментальной медицины РАМН, С.-Петербург; 2Раковый центр им. Ли Моффитта, Университет Южной Флориды, Тампа, США

В последние годы появились работы, указывающие на то, что тимус имеет важное значение для созревания Т-димфоцитов не только в раннем возрасте, но сохраняет способность продуцировать лимфоциты до глубокой старости. Эти данные вновь привлекли внимание к изучению тимуса у взрослых и к проблемам нарушения дифференцировки тимоцитов. Оказалось, что возрастная инволюция этого органа, так же, как и атрофия тимуса, наблюдаемая при многих экспериментальных моделях, имеют общие патогенетические механизмы и, в частности, связаны с нарушением дифференцировки лимфоцитов на этапе Р-селекции (Adkins et al., 2000). В наших предыдущих исследованиях было показано, что одним из возможных механизмов инволюции тимуса при опухолевом росте может являться усиление апоптоза тимоцитов и их внутритимусной гибели. Целью настоящей работы было выявление эндогенного фактора, определяющего усиление апоптоза тимоцитов в организме животных с перевиваемой опухолью. Опыты проводили на мышах линии С3НА, которым п/к инокулировали 105 клеток синген- ной перевиваемой гепатомы 22а. Апоптоз тимоцитов исследовали морфологически путем подсчета клеток, окрашенных с помощью акридинового оранжевого/этидиум бромида, а также по фрагментации ДНК, выявляемой в дифениламиновом тесте (ДФА) или на электрофорезе. В сыворотке крови определяли уровень цитокина TNFa и гормонально-метаболических факторов (кортикостерон, лактат, холестерин), известных своей способностью индуцировать апоптоз тимоцитов in vitro. Кроме того, изучали влияние ангиогенного фактора VEGF на индукцию апоптоза в тимоцитах интактных мышей in vitro и in vivo.

Было показано, что уровень содержания кортикостерона и лактата не коррелирует с показателями апоптоза тимоцитов, усиливающегося в динамике роста гепатомы 22а. TNFa в сыворотке крови опухоленосителей не определялся. Гиперхолесте- ринемия развивалась у мышей параллельно с усилением апоп- тоза, и была выявлена высокая степень корреляции между показателями содержания общего холестерина и ДФА-теста. Возможно, что гиперхолестеринемия оказывает влияние на апоп- тоз тимоцитов на поздних сроках развития опухоли, но не является фактором, вызывающим инволюцию тимуса. Мы предположили, что таким фактором может быть VEGF.

Установлено, что инкубация тимоцитов интактных мышей BALB/c в присутствии 50 и 100 нМ VEGF вызывает достоверное усиление апоптоза тимоцитов, выявляемое в тестах с окрашиванием клеток меченым аннексином V или пропидиум иоди- дом, учет которых проводили на проточном цитофлуориметре. Введение VEGF интактным мышам в концентрации 50 и 100 нг/ч в течение 7 сут. с помощью осмотических капсул также вызывало усиление апотоза тимоцитов, а более длительное введение — в течение 21—28 сут. — приводило к развитию инволюции тимуса. Мы предполагаем, что VEGF играет важную роль в нарушении процессов апоптоза и дифференцировки тимоцитов при опухолевом росте и участвует в механизмах развития инволюции вилочковой железы.

Работа поддержана грантами NATO SA(LST.CLG 975197) и РФФИ № 00-04-49430.



загрузка...