загрузка...
 
Возможности локальной цитокинотерапии рекомбинантным фактором некроза опухоли альфа при увеальной меланоме
Повернутись до змісту

Возможности локальной цитокинотерапии рекомбинантным фактором некроза опухоли альфа при увеальной меланоме

В.Г. Лихванцева, А.Ф. Бровкина, Г.Г. Зиангирова, О.С. Слепова НИИ глазных болезней им. Гельмгольца, Москва

Фактор некроза опухоли а (TNF) — один из ключевых цитокинов, обладающих способностью разрушать клетки раковых опухолей, в том числе и резистентных к другим цитокинам с аналогичными свойствами. Проведенные нами исследования показали, что местный (в слезной и стекловидной жидкости) и системный (в сыворотке) дефицит TNF играет важную роль в патогенезе увеальной меланомы (УМ) и ассоциируется с прогрессированием заболевания. Это и послужило основанием для использования рекомбинантного TNFa (rTNF) в качестве терапевтического агента. Известно, что чувствительность к rTNF различных опухолей неодинакова. Она определяется биологическими характеристиками опухоли, точный спектр которых не установлен. Терапевтические возможности rTNFa при УМ — опухоли забарьерного органа, а, следовательно, идеальной модели для изучения локальных эффектов цитокина, не изучены.

Цель работы — исследование возможности и эффективности интратуморального применения rTNFa при УМ. Пятерым пациентам с УМ, размеры которой (высота более 7 мм и/или диаметр более 19 мм, стадии T3-4N0M0) не позволяли проводить органосохранное лечение, вводили в строму опухоли 100 000 ЕД препарата rTNFa (Альнорин, фирма «Вектор», Бердск). Спустя 72 ч после введения препарата больной глаз энуклеировали, исследовали гистоморфологически и иммуногистохимически, в том числе и TUNEL-методом (Boeringer Manheim, Германия), позволяющим визуализировать активацию ядерных каспаз при апоп- тозе. Проведенные исследования позволили выявить как общие эффекты rTNFa при интратуморальном введении в УМ, так и индивидуальные, зависящие от особенностей конкретной опухоли. Так, макроскопически в строме всех леченных УМ выявляли гигантские кисты размерами до S объема опухоли. Гистоморфологически отмечали выраженную инфильтрацию моноцитами/ макрофагами и лимфоцитами зоны, пограничной месту введения препарата; лимфоцитарный вал вокруг основания УМ, краевое стояние лимфоцитов в лакунах. Особенностью этих опухолей также являлся тромбоз новообразованных сосудов. Очаги некробиоза чередовались с зонами ишемии; вокруг лакун — места депонирования TNF — отмечали обширную зону цитолиза. В клетках УМ, окружающих лакуны, фиксировали необратимую активацию ядерных каспаз — доказательство происходящего апоп- тоза. Вместе с тем наблюдали индивидуальные различия в объеме лизированных клеток к тромбозу новообразованных сосудов, а также — по площади зон некробиоза, ишемии и апоптоза. В одних УМ апоптические клетки располагались гнёздами, в других они равномерно чередовались со «здоровыми» функционирующими клетками; в-третьих — апоптоз охватывал всю зону просмотра. По-видимому, неоднозначность эффектов rTNFa объясняется индивидуальными характеристиками конкретной опухоли конкретного больного (неоангиогенез, чувствительность или резистентность к апоптозу, индуцированному через TNF, внутриклеточное соотношение белков-регуляторов апоптоза, уровень рецепции к TNF и т.д.). Трёхлетнее наблюдение за больными, получавшими Альнорин, показало отсутствие метастазирования.

Выводы: 1. УМ является опухолью, чувствительной к воздействию rTNFa. 2. Эффективность rTNFa коррелирует со степенью васкуляризации УМ. 3. Для оптимизации эффекта (полной деструкции УМ) и сохранения глаза как органа после интрату- морального воздействия Альнорином необходимы дальнейшие исследования по подбору доз препарата.

Удержание цитокинов в стекловидной жидкости глаза с увеальной меланомой

В.Г. Лихванцева, О.С. Слепова НИИ глазных болезней им. Гельмгольца, Москва

Увеальная меланома (УМ) — одна из наиболее часто встречающихся внутриглазных опухолей у взрослого населения. В свете современных концептуальных представлений о роли цитокинов в патогенезе различных типов рака представляло интерес изучить их содержание в стекловидной жидкости (СТЖ), находящейся в тесном контакте с УМ, и сопоставить его с показателями цитокинов в сыворотке крови (СК) и в слёзной жидкости (СЖ). Исследовали (ИФА) концентрации TNFa, IFNa, IFNy, IL-2, sIL-2R, IL-6, sIL-6R, IL-4, IL-8, IL-1P в пробах СТЖ энуклеированных глаз (n = 49) с УМ больших размеров (стадии Тэ^М0) в сопоставлении с СК и СЖ тех же больных. TNFa обнаружили в 5 из 7 тестируемых проб СТЖ (71,5 %) — от 218 до 590 (среднее значение — 375 ± 124) пкг/мл, в то время как в СК и СЖ у тех же больных этот цитокин отсутствовал. Присутствие TNF в СТЖ мы объяснили тем, что его могут синтезировать клетки тканей глаза, окружающих опухоль, как фактор местной противоопухолевой защиты. Продолжительные наблюдения за обследуемыми больными показали, что у 5 пациентов с позитивными пробами СТЖ клиническое течение УМ было относительно благоприятным (без метастазов), а две негативные пробы СТЖ принадлежали пациентам, находящимся в стадии скрытого метастазирования. Это согласуется с ранее представленными нами доказательствами тесной связи между сочетанным системным и местным дефицитом TNFa и развитием метастазов УМ. Тестируемые пробы СТЖ содержали и другие цитокины, участвующие в противоопухолевых реакциях, например, IL-8 (n = 9, 100 % случаев, от 76 до 1500 пкг/мл, среднее значение — 614 ± 234), обуславливающий инфильтрацию опухоли иммуноцитами, а, следовательно, запуск клеточных реакций замедленного типа — основного механизма деструкции опухолей. Минимальную концентрацию IL-8 также определяли на фоне метастазирования. В отдельных случаях в СТЖ обнаруживали IL-6 (37,5 %), обладающий антипролиферативными свойствами, уровни 25-560 пкг/мл (среднее — 103 ± 51). sIL-2R — косвенный показатель супрессии/активации местного иммунитета

оказался на неожиданно высоком уровне (от 4800 до 8000 пкг/мл; среднее — 6600 ± 1400), что значительно превышало содержание цитокина в сыворотке (« в 2 раза) и в СЖ, где он не выявлялся (чувствительность теста — 390 пкг/мл). Вместе с тем ни в одной из тестируемых проб СТЖ (n = 12), как и в СЖ (n = 45) или в СК (n = 132) не были обнаружены IL-1P — иммуномедиатор антиген-презентирующих функций макрофагов, IL-2 — ключевой регулятор иммунного, в том числе противооопухолевого, ответа, а также — IL-4 (чувствительность тестов — 5, 8 и 20 пкг/ мл соответственно). Сопоставление концентрации различных ци- токинов в трёх тест-пробах (СК, СЖ, СТЖ) позволило заключить, что их продукция в СТЖ является самостоятельным и независимым процессом и может быть отражением или следствием опухолевого процесса в глазу, а возможно, компенсаторной иммунной реакцией на опухоль. Однако интенсивность этой реакции, по-видимому, оказывается недостаточной, особенно на фоне характерного для УМ ослабления общей системной и местной, например, в СЖ и/или СТЖ продукции цитокинов, необходимых для обеспечения противоопухолевой защиты.

Полученные данные могут служить обоснованием для локального, в частности, интратуморального введения rTNF или препаратов, способствующих его секреции (rIL-2).



загрузка...