загрузка...
 
Взаимодействие С-реактивного белка с IL-4 не влияет на биологическую активность IL-4
Повернутись до змісту

Взаимодействие С-реактивного белка с IL-4 не влияет на биологическую активность IL-4

С.В. Орлов, Д.В. Исаков, A. Sobota, П.Г. Назаров, А.А. Бутюгов,

А.П. Перевозчиков

ГУ НИИ экспериментиальной медицины РАМН, С.-Петербург;

M.W. Nencki Institute of Experimental Biology, Warsaw, Poland

Хорошо известно, что белки острой фазы воспаления человека семейства пентраксинов, и, в частности, С-реактивный белок (CRP), участвуют в развитии ранней фазы воспаления. Являясь лектином сыворотки, CRP взаимодействует с различными лигандами и активирует комплемент по классическому и альтернативному путям. Также в формировании воспаления участвуют цитокины, продуцируемые Т-хелперами, например, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10 и IL-13 (ТЪ2-типа). Вместе с тем не изучено взаимодействие белков врожденного (например, CRP) и приобретенного (например, IL-4) иммунитета при различных защитных реакциях. Нами было показано, что CRP и IL-4 человека способны взаимодействовать друг с другом in vitro (ELISA). Для изучения эффектов такого взаимодействия мы использовали клетки карциномы ободочной кишки человека линии C0L0320HSR. Методом RT-PCR установлено, что, подобно другим неиммунным клеткам, C0L0320HSR экспрессировали только рецептор IL-4R типа II (IL-4Ra/IL-13Ra1), но не типа I (IL^Ra/yc-цепь). Поскольку известно, что активация клеток через рецептор IL-4R типа II приводит к фосфорилированию по ключевым остаткам тирозина факторов транскрипции STAT6 и STAT3, а через IL-4R типа I — к фосфорилированию факторов STAT6 и STAT5, мы исследовали влияние IL-4, CRP и комплекса IL-4/CRP на активацию STAT3 и STAT5 в клетках линии COLO320HSR. Обнаружено, что инкубация клеток с IL-4 и комплексом IL-4/CRP приводила к быстрому фосфори- лированию и ядерной транслокации (15 мин от момента добавления) STAT3, но не STAT5, что свидетельствовало о сохранении биологической активности IL-4 в составе комплекса с CRP (гель-ретардация и иммуноблоттинг). Кроме того, CRP также активировал STAT3, но не STAT5. Как показал FACS-анализ, клетки линии COLO320HSR не экспрессировали рецепторы FcRyI и FcRyII, которые, по данным литературы, способны связывать CRP. Это указывало на возможность альтернативного пути проведения сигналов от CRP. В целом приведенные данные впервые описывают взаимодействие CRP и IL-4, при котором IL-4 сохраняет свою активность в комплексе с CRP. Более того, впервые описано проведение сигналов от CRP в негемато- поэтических клетках, что указывает на наличие пока не описанного рецептора для CRP либо на возможность проведения сигналов от CRP через взаимодействие с компонентами липидных рафт плазмалеммы.

Работа поддержана грантом РФФИ № 01-04-49615.



загрузка...