загрузка...
 
Локальный и системный уровень фактора некроза опухоли а (Г№а) и его динамика у беременных с рецидивирующим генитальным герпесом
Повернутись до змісту

Локальный и системный уровень фактора некроза опухоли а (Г№а) и его динамика у беременных с рецидивирующим генитальным герпесом

Л.Н. Ермолина, Е.В. Просекова, О.М. Родионова

ГОУ высшего профессионального образования «Владивостокский государственный медицинский университет федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»;

Дальневосточный филиал государственного учреждения НИИ клинической иммунологии СО РАМН, г. Владивосток

Исследовали уровни цитокина TNFа в сыворотке крови и вагинальном секрете у 120 женщин с рецидивирующим генитальным герпесом в разные периоды болезни и в различные триместры беременности, а также у 30 женщин при физиологическом течении беременности. Результаты показали, что динамика локального содержания TNFa при наличии инфекции репродуктивного тракта более информативна по сравнению с таковой системного уровня. Отмеченная корреляция изменений локального содержания TNFa с активностью, тяжестью, периодом инфекционного процесса и длительностью течения заболевания открывает новые возможности для оценки и прогнозирования исхода герпетической инфекции и беременности, разработки эффективной терапии и обосновывает своевременное начало терапевтических мероприятий для предупреждения осложнений беременности. (Цитокины и воспаление. 2006. Т. 5, № 4. С. 17-21.)

Ключевые слова: TNFa, рецидивирующий генитальный герпес, беременность.

 

Широко распространенной вирусной инфекцией человека, длительно существующей в латентной форме, является герпес. Первичное заражение сопровождается клиническими проявлениями лишь в 15% случаев, в остальных оно протекает скрыто. Самые разнообразные причины, нарушающие нормальное течение беременности, реализуются через ряд общих звеньев, в частности, через дисбаланс или дефект взаимоотношений в системе мать — плацента — плод, вызывая прерывание беременности, развитие пороков, эндокри- нопатий, иммунодефицитных состояний у плода.

Риск развития патологии у плода и новорожденного зависит от степени выраженности и характера индуцированных возбудителями изменений в иммунной системе беременной, а также от формы герпетической инфекции у матери и составляет от 0,01% до 75% [2, 5, 7, 10]. Условием нормального развития беременности является переключение иммунного ответа с №1- на №2/№3-клетки на местном и системном уровнях, что определяется изменениями цитокинового профиля [8, 9, 11]. №2/№3-клетки ингибируют реакции клеточного иммунитета и стимулируют выработку антител, нейтрализующих циркулирующие аллоантигены, обеспечивая физиологическое течение беременности [8, 11]. Нарушение Th1/Th2-переключе- ния сопряжено с патологическим течением беременности, привычным невынашиванием [8, 13]. Регуляторную роль, определяющую баланс №1/^2, выполняет система цитокинов. Изменение иммунной системы у больных генитальным герпесом (ГГ) обусловлено влиянием герпесвирусов на иммунные клетки, нарушением синтеза регуляторных клеточных белков, блокированием действия интерферона [5]. Профиль регуляторных белков иммунного ответа определяет физиологическое течение беременности и/или силу, направленность, исход инфекционного процесса [3, 8, 11, 12, 13].

Иммуносупрессивное действие вируса простого герпеса 2-го типа (ВПГ-2) реализуется через угнетение функциональной активности фагоцитирующих клеток и нарушение синтеза провос- палительных цитокинов [4, 6]. TNFа — один из основных цитокинов, способных оказывать прямое повреждающее действие на клетки-мишени и ли- зировать клетки, инфицированные вирусом, является необходимым и в то же время достаточным индуктором местных и системных воспалительных реакций [9, 14]. Локальное повышение синте
за
TNFa вызывает появление основных клинических симптомов воспаления, усиливает и пролонгирует воспалительные изменения за счет активации других клеток, способных секретировать цитокины, белок высокомобильной группы (HMGB1), эйкозаноиды, оксид азота, свободные радикалы кислорода, которые потенцируют воспалительный процесс и усугубляют повреждение тканей [14]. Выделяясь в незначительной концентрации, TNFa мобилизует защитные силы организма хозяина: предотвращает проникновение патогенных микробов в системный кровоток, стимулирует процессы коагуляции, позволяющие локализовать возбудители, и активирует восстановление поврежденных тканей. Различные профили сети цитокинов модулируют иммунный ответ к инфекциям и определяют развитие, течение, исход беременности. Для успешной имплантации и беременности необходимо установление №2-ци- токинового окружения, тогда как ТМ-цитокины связаны с потерей беременности и бесплодием. С другой стороны, через ^1-ответ реализуется противоинфекционная защита [8, 15].

Герпетическая инфекция изменяет способность пораженных клеток синтезировать цитокины, а клеток-мишеней — отвечать на действие последних. Событием, определяющим направленность течения пролиферативного ответа, служит продукция TNFa. Биологические эффекты данного цитокина включают регулирующее участие в тканевом гомеостазе репродуктивных органов, в формировании иммунных взаимоотношений материнского организма и плода. Ген TNFa экспрессирован в тканях яичника, маточных труб, матки, плаценты и эмбриона. TNFa также характеризуют как цитокин, обладающий фетодеструктивными свойствами, препятствующий сохранению беременности. Избыточная продукция TNFa в области фетоплацентарного комплекса может приводить к прерыванию беременности.

Цель настоящего исследования — проведение анализа динамики локального и системного содержания TNFa у беременных женщин с рецидивирующим генитальным герпесом (РГГ) в различные сроки гестации и разные периоды заболевания.

Материалы и методы

Исследование проводили на базе акушерского отделении Приморской Краевой клинической больницы № 1 г. Владивостока с 2002 по 2005 гг. у 120 женщин в возрасте от 17 до 40 лет, страдающих хронической герпетической инфекцией и 30 женщин с физиологически протекающей беременностью с мониторированием иммунного и цитокинового статуса во время беременности. Диагноз ГГ верифицирован на основании клинической картины и данных лабораторного обследования, согласно рекомендациям 5-го международного форума (1НМР-1997) по диагностике генитального герпеса. Изучение анамнеза и обследование выявило, что наличие беременности у 21,6 % женщин приводило к увеличению продолжительности рецидивов ГГ, заметно не изменяя частоту рецидивов. Самые продолжительные обострения (более 16 дней) наблюдались у женщин с РГГ, отказавшихся от патогенетической терапии герпеса до и во время беременности, у которых РГГ сочетался в 98% случаев с бактериальным вагинозом и па- пилломавирусной инфекцией гениталий. В исследуемой группе женщин с РГГ предшествующая беременности длительность диагностированной герпетической инфекции до 3 лет наблюдалась у 51 женщины (42,5 %), от 3 до 6 лет — у 41 больной (34,2 %) и свыше 6 лет — у 28 человек (23,3 %). По тяжести клинического течения РГГ [1] легкая форма (1-2 рецидива в год) диагностирована у 27 женщин (22,5 %) исследуемой группы, средняя (3-4 рецидива в год) — у 85 (70,83 %), тяжелая (6-8 и более рецидивов в год) —у 8 (6,67 %). На протяжении всего периода беременности проводилось динамическое наблюдение за общим состоянием женщин и развивающегося плода, клинико-лабораторный мониторинг и исследование TNFa.

Материалом для исследования содержания TNFa служили сыворотка крови и вагинальный секрет. Определение цито- кинов в биологических жидкостях проводили иммунофермент- ным методом с использованием реактивов «R&D Diagnostics Inc.» (USA).

Полученные результаты обрабатывали с использованием пакета программ статистического анализа.

Результаты и обсуждения

Мониторинг сывороточного уровня TNFa у здоровых женщин с физиологически протекающей беременностью зафиксировал в начальные сроки гестации повышение уровня данного цитокина по отношению к показателям вне беременности. Увеличение содержания TNFa в сыворотке крови отмечается в 1-м триместре (4,82 ± 0,58 пг/мл) и сохраняется на уровне близком к 5,0 пг/мл на протяжении гестационного периода (во 2-м триместре — 5,03 ± 0,61 пг/мл, в 3-м триместре —

± 0,59 пг/мл). Уровень TNFa вне беременности составил 2,52 ± 0,3 пг/мл (р < 0,01, рис. 1).

пг/мл    


 

В сыворотке крови у беременных женщин с ГГ зафиксировано повышение синтеза сывороточного содержания TNFа (128,96 ± 22,59 пг/мл против 2,52 ± 0,3 пг/мл у небеременных и 5,06 ± 0,36 пг/мл в период гестации соответственно, при р < 0,001). При этом прослеживается корреляция концентрации сывороточного TNFa и тяжести клинического течения герпетической инфекции. У беременных с рецидивами РГГ 1 раз в 6-12 месяцев сывороточное содержание TNFa в сыворотке крови — 36,38 ± 2,68 пг/мл, при непрерывно-рецидивирую- щей форме герпетической инфекции — 152,49 ± 8,69 пг/мл. В исследованиях Н.В. Кунгу- рова и др. [4] при клинической выраженной форме ГГ у мужчин и женщин вне беременности уровень TNFa в сыворотке крови достигал 233,1 ± 45,56 пг/мл, при уровне в контроле —

± 0,88 пг/мл. Значительное повышение TNFa (245,0 ± 11,0 пкг/мл) у беременных с внутриамнио- тической инфекцией отмечали Т.Е. Белокриниц- кая, Ю.А. Витковский [2]. В их исследовании у небеременных здоровых женщин уровень содержания цитокина был в пределах 16,0 ± 3,0 пкг/мл.

У женщин при отсутствии клинических проявлений в период ремиссии ГГ содержание TNFa в сыворотке крови было достоверно ниже (40,05 ± 1,93 пг/мл), чем в период обострения болезни (119,84 ± 15,75 пг/мл), но превышало показатели в течение всего периода беременности в контрольной группе (5,06 ± 0,36 пг/мл, р < 0,001). Не выявлено статистически достоверных различий в уровне TNFa в зависимости от длительности течения РГГ, предшествующего беременности. Мониторинг сывороточного содержания TNFa при физиологически протекающей беременности зафиксировал в начальные сроки увеличение уровня цитокина вдвое по отношению к показателям здоровых женщин до беременности. Повышение синтеза TNFa отмечалось на всем протяжении беременности, без значимых различий в уровне на разных сроках гестации. При обострении герпетической инфекции в течение беременности отмечена активация синтеза исследуемого ци- токина, превышающая таковую при физиологической беременности в десятки раз, нарастающая прямо пропорционально тяжести инфекционного процесса.

Результаты исследований последнего десятилетия подтверждают участие ряда цитокинов, включая TNFa, в развитии как нормально прогрессирующей беременности, так и ее спонтанного прерывания. Значимую роль в реализации преждевременного отторжения плода отводят цитоки- нам ТМ-профиля [8, 10, 14]. Полученные данные позволяют предположить, что продукция цитоки- нов, участвующих в инициации и/или регуляции развития беременности и родовой деятельности, может происходить исключительно в пределах фетоплацентарного комплекса, что определяет актуальность исследования местных механизмов регуляции беременности, родов, а также выявление характера изменений под влиянием хронической герпетической инфекции.

При оценке локального содержания TNFa в вагинальном секрете у женщин с физиологически протекающей беременностью в 1-м триместре беременности определены более низкие показатели (2,61 ± 0,14 пг/мл ), чем вне беременности (13,47 ± 1,38, р > 0,001). Во 2-м и 3-м триместрах отмечено нарастание содержания TNFa в вагинальном секрете, к концу гестационного периода уровень ци- токина приближался к показателям женщин вне беременности (2-й триместр — 4,95 ± 0,75 пг/мл,

й триместр — 11,4 ± 0,44 пг/мл) (рис. 2).

пг/мл

-ф   пг/мл

Рис. 2. Динамика содержания ТМРа в вагинальном секрете женщин в различные периоды физиологически протекающей беременности

При анализе динамики содержания TNFa в вагинальном секрете беременных женщин с РГГ установлено достоверное повышение его уровня по сравнению с показателями контрольных групп (128,49 ± 17,15 пг/мл против 13,47 ± 1,38 пг/мл у небеременных и 6,32 ± 0,39 пг/мл у женщин с физиологически протекающей беременностью, р < 0,001). Отмечена положительная коррелятивная зависимость локальной концентрации TNFa от частоты рецидивов герпетической инфекции. Уровень TNFа в вагинальном секрете у беременных с непрерывно-рецидивирующей формой герпетической инфекции составил 166,33 ± 2,39 пг/мл, у беременных с рецидивами 1 раз в 6 и более месяцев — 48,99 ± 1,24 пг/мл (р < 0,001). У женщин с РГГ, беременность которых протекала без обострения герпетической инфекции, содержание в вагинальном секрете TNFa было 14,33 ± 2,85 пг/мл. Выявлено, что у беременных женщин в период обострения ГГ, у которых локальный уровнь TNFа < 150 пг/мл, угроза прерывания беременности отмечалась в 5 % случаев, при уровне данного цитокина в вагинальном секрете 150-200 пг/мл —
в 20 % случаев. У женщин при обострении РГГ, локальный уровень TNFa которых был более 200 пг/мл, беременность прервалась (в 1-м триместре при замершей беременности уровень ци- токина достигал 479,19 пг/мл, во 2-м — 534,34 пг/мл, в 3-м — 849,27 пг/мл).

Заключение

Секреторная активность клеток при нормально развивающейся беременности характеризовалась низким уровнем продукции TNFa как на системном, так и на локальном уровнях. Во время физиологически протекающей беременности отмечены: активация синтеза TNFa, повышение его сывороточного уровня — в начальные сроки беременности без заметной динамики до родов; увеличение концентрации TNFa в вагинальном секрете — только к окончанию гестационного периода. Риск патологического течения беременности зависит от степени нарушений функциональной активности ^1- и ^2-клеток и их баланса, изменяющегося в течение беременности: в 1-м триместре в виде угнетения №2 и дисбаланса с ^1, во 2-м триместре — в виде угнетения ^1 и активации ^2, в 3-м триместре — в виде снижения функциональной активности ^1 и ^2. TNFa играет существенную роль в функции защиты организма, развитии и подержании функциональной организации лимфоидных органов (мыши, дефектные по TNFa, не способны к защите от инфекции и погибают от нелетальных доз инфекционных агентов); в то же время TNFa может опосредовать системную токсичность, аутоиммунные, деструктивные и тяжелые хронические воспалительные заболевания. ГГ увеличивает риск патологического течения беременности, угрозу прерывания, невынашивания. Особенные трудности возникают при латентной форме течения герпетической инфекции у матери и отсутствии адекватной терапии. Длительное течение воспалительного процесса свидетельствует о несостоятельности специфического этапа иммунного ответа, о структурных и/или функциональных дефектах в иммунной системе. Уровень локального синтеза TNFa у беременных с РГГ значительно превышает таковой при физиологическом течение беременности. Наиболее высокие значения наблюдаются у женщин при обострении РГГ во время беременности и с частыми рецидивами, при предшествующем течении вирусной инфекции длительностью до 6 лет.

Наши исследования зафиксировали наличие положительной корреляции между угрозой прерывания беременности и высоким уровнем локального содержания TNFa в вагинальном секрете. Мониторинг системного и локального содержания TNFa у женщин во время беременности и при РГГ высоко информативен, отражает функциональную активность различных типов иммунокомпетентных клеток, позволяет прогнозировать тяжесть и характер воспалительного процесса, исход беременности. Локальное высвобождение TNFa приводит к повышению миграции клеток, активации фагоцитоза, повышенной продукции провоспалитель- ных цитокинов, реэкспрессии HLA-I/II, сдвигу в сторону №1. При нормально протекающей беременности наблюдается динамическое равновесие цитокинового профиля ^1/^2 с временным преобладанием №1 или ^2 в зависимости от сроков беременности. Эти данные используются для прогнозирования беременности: увеличение продукции цитокинов Th1-типа характерно для угрозы прерывания, нормализация их уровней ассоциируется с регрессией симптомов угрожающего аборта. Результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что на уровне цитокиновой сети существуют механизмы фетопротекции, нарушение которых может быть причиной невынашивания, особенно в критические периоды развития беременности. Изучение уровней TNFa в периферической крови и вагинальном секрете у женщин с ГГ в период беременности позволило выявить сходную направленность изменений, однако мониторинг локальной продукции TNFa в очаге воспаления является более динамичным и информативным по сравнению с данными по сыворотке крови и может использоваться в качестве дополнительного критерия прогноза развития беременности и эффективности проводимой терапии.

 

 

ЛИТЕРАТУРА

 

 

 

Макацария А.Д., Долгушина Н.В. Герпетическая инфекция. Антифосфолипид- ный синдром и синдром потери плода. — М., 2004. — 80 с.

Мошкалов А.В. Клинико-эпидемиологические аспекты генитального герпеса // Вестн. дерматол. — 1992. — № 8. — С. 25-32.

Никонов А.П., Асцатурова О.Р. Генитальный герпес и беременность // Гинекология. — 2000. — Т. 4, № 1. — С. 4-6.

Сепиашвили Р.И. Основы физиологии иммунной системы. — М.: Медицина — здоровье, 2003. — 240 с.

Сидельникова В.М. Привычная потеря беременности. — М.: Триада-Х, 2002. — 304 с.

 

 

 


Совдагарова Ю. Э. Иммунокорригирующая терапия беременных с рецидивирующей герпетической инфекцией. — Дисс. ... канд. мед. наук. — М.,

— 137 с.

Сотникова Н.Ю., Анциферова Ю.С., Крошкина Н.В., Кудряшова А.В. Иммуномодуляция и иммунорегуляция на системном и локальном уровне при беременности // Мед. иммунол. — 2001. — Т. 3, № 2. — С. 259.

Фрейдлин И.С., Тотолян О.А. Клетки иммунной системы: III — VI. — СПб. Наука, 2001. — 390 с.

Шуршалина А.В., Марченко Л.А., Сухих Г.Т. Маркеры воспаления при хронических вирусных инфекциях половых путей // Матер. V Росс. форума «Мать и дитя». — 2003. — С. 503-504.

Nakajima H., Kobayashi M., Pollard R.B., Suzuki F. A pathogenic role of Th2 responses on the severity of encephalomyelitis induced in mice by herpes simplex virus type 2 infection // J. Neuroimmunol. — 2000. — Vol. 110, № 1-2. — P. 106-113.

Yeaman G.R., Collins J.E., Fanger M.W., Wira C.K. CD8+ T cells in human uterine endometrial lymphoid aggregates: evidence for accumulation of cells by trafficking // Immunology. — 2001. — Vol. 102, № 4. — P. 434-440.

 

 

 

Local and systemic levels of tumor necrosis factor a (TNFa) and its dynamics in pregnancy complicated with recurrent genital herpes

L.N. Ermolina’, E.V. Prosekova1'2, O.M. Rodionova1 ’Vladivostok State Medical University;

2Far-Eastern Branch of Institute of Clinical Immunology, Siberian Branch of RAMS, Vladivostok

Serum and secretory levels of TNFa were measured in 120 pregnant women with recurrent genital herpes and 30 women with physiological pregnancy. The results showed that the measurement of local TNFa concentration during infection of reproduction tract is more informative than that of systemic cytokine level. The correlation of local TNFa concentration with infection process activity, severity, and duration opens new possibilities for evaluation and prognosis of outcome of herpes infection and pregnancy and for development of effective and appropriate therapy for prevention of pregnancy complications. (Cytokines and Inflammation. 2006. Vol. 5, № 4. P. 17-21.)

Key words: TNFa, recurrent genital herpes, pregnancy.

/N ( ГАЗО-ВИХРЕВЫЕ БЕЗГРАДИЕНТНЫЕ БИОРЕАКТОРЫ |

Газо-вихревые биореакторы предназначены для культивирования любых типов клеток (в т. ч. гибридных, эмбриональных) и микроорганизмов. В них используется принципиально новый способ перемешивания (патенты России, США, Европы, Японии). Газо-вихревой безградиентный биореактор признан одной из наиболее перспективных разработок в области высоких технологий в России. Аппарат обеспечивает: мягкое, но эффективное перемешивание без образования пены, кавитации, высокотурбулентных и застойных зон; полную масштабируемость лабораторных результатов при промышленном внедрении разработок; хорошее перемешивание вязких жидкостей; низкое энергопотребление. Аппарат работает без изменения характеристик при заполнении 15-90 % объема, что позволяет при промышленном производстве убрать промежуточные «запускные» биореакторы. Аппарат полностью заменяет роллерные и «матрасные» технологии при производстве вакцин и другой лекарственной продукции. В НПО «Вирион», филиале ФГУП «Микроген» в г. Томске, освоено промышленное производство вакцины против клещевого энцефалита с использованием эмбриональных клеток в газо-вихревом биореакторе объемом 300 л.

ЗАО «Саяны», г. Новосибирск Тел./факс: (383) 333-33-69

 

ГУ НИИ

КЛИНИЧЕСКОЙ ИММУНОЛОГИИ

 

СО РАМН

 

630099, г. Новосибирск, ул. Ядринцевская, 14

 

Телефон (383)228-27-41, 236-03-29,

 

факс (383) 225-05-22

Клиника иммунопатологии

E-mail:

Разработаны новые высокоэффективные клеточные технологии:-

Отделение аллергологии

• Т-клеточные вакцины в лечении ауто- • Вакцины на основе дендритных кле-

Отделение аутоиммунных заболеваний

иммунных и аллергических заболе- ток в лечении онкологических и ин- ваний. фекционно-воспалительных заболе- • Трансплантация клеток костного моз- ваний.

Иммунологическое отделение

га в лечении цирроза печени, патологии ЦНС, атеросклеротической бо-

Консультативная помощь врачам.

лезни.

База для обучения специалистов

Отделение гематологии

и трансплантации костного мозга

практического здравоохранения.

 


© Коллектив авторов, 2006 УДК 616-022-097

 

 

 



загрузка...