Робота 2 Визначення осмотичної резистентності еритроцитів
Резистентність еритроцитів – це здатність оболонки еритроцитів протидіяти руйнівній дії низького осмотичного тиску розчину, в якому знаходяться еритроцити. Унаслідок таких впливів може виникнути гемоліз (руйнування оболонки еритроцитів).
Досліджують резистентність мембрани еритроцитів відносно гіпотонічних розчинів натрію хлориду. При концентрації 0,54% – 0,45 % у нормі настає гемоліз лише найменш стійких еритроцитів ( мінімальна резистентність). У разі подальшого зменшення концентрації натрію хлориду починається гемоліз і стійкіших еритроцитів. У 0,40% – 0,34 % розчині натрію хлориду руйнуються навіть найстійкіші еритроцити ( максимальна резистентність). Розчин стає прозорим, схожим на лак (так званий лаковий розчин). Інтервал між верхньою та нижньою межами резистентності називається амплітудою резистентності.
Мета роботи - визначити межі коливань осмотичного тиску плазми крові, при яких ще зберігається цілісність оболонки еритроцитів, і дати оцінку стійкості оболонки еритроцитів.
Для роботи необхідно: 7 пробірок Відаля (або звичайних лабораторних пробірок), штатив, 0,5 % розчин натрію хлориду, дистильована вода, кров, консервована 5% розчином цитрату натрію, три піпетки з однаковими діаметрами крапельних отворів.
Хід роботи
З 0,5% розчину натрію хлориду виготовляють ряд розведень за такою схемою:
Номер пробірки
Кількість крапель 0,5 % NaCl
Кількість крапель дистильованої води
Одержана концентрація розчину
1
25
-
0,5%
2
24
1
0,48%
3
22
3
0,44%
4
20
5
0,40%
5
18
7
0,36%
6
16
9
0,32%
7
14
11
0,28%
У кожну пробірку додати по 1 краплі консервованої крові.
Вміст пробірок обережно перемішати до рівномірного забарвлення і залишити на 1 год у штативі.
Через 1 год., не збовтуючи вмісту пробірок, подивитися, де спостерігається руйнування оболонки еритроцитів (гемоліз). Стан крові оцінюють за ступенем забарвлення розчину натрію хлориду, що міститься над осілими еритроцитами у пробірках.
Рекомендації щодо оформлення результатів роботи
Записати значення мінімальної та максимальної резистентності еритроцитів.
Розрахувати її амплітуду.
У висновках відповісти на такі запитання:
Чи відповідають нормі межі зміни осмотичного тиску, за яких зберігається цілісність оболонки еритроцитів?
Чи нормальна цілісність оболонки еритроцитів?
Про що може свідчити підвищення (чи зниження) меж резистентності?