загрузка...
 
Разработка иммуноферментной тестсистемы для определения биологически активного INF?2 А.В. Трофимов, С.В. Родин, А.В. Жахов, А.М. Ищенко
Повернутись до змісту

Разработка иммуноферментной тестсистемы для определения биологически активного INF?2 А.В. Трофимов, С.В. Родин, А.В. Жахов, А.М. Ищенко

ГНЦ НИИ особо чистых биопрепаратов, С.Петербург

Мышей Balb/c иммунизировали высокоочищенным рекомбинантным интерфероном альфа 2 Peseudomonas putidaинъекциями по 10 мкг в подушечки лап. Проводили слияние лимфоцитов с мышиной миеломой Sp2/0. В результате скрининга, проведенного посредством твердофазного и конкурентного иммуноанализа, было отобрано 6 клонов  гибридных клеток, продуцирующих моноклональные антитела к трем независимым антигенным детерминантам интерферона. На основе полученных антител были разработаны две высокочувствительные тестсистемы. Сравнительный анализ препаратов интерферона различного качества с помощью этих тестсистем выявил различия при определении концентраций. Независимые определения концентрации интерферона, выполненные методами хроматографии, белковой химии, так же, как исследования противовирусной активности интерферона, позволили заключить, что одна из тестсистем распознает только биологически активный белок, другая позволяет измерять весь интерферон. С помощью разработанных тестсистем может быть определена доля интерферона, обладающего противовирусной активностью. Тестсистема может быть использована для замены трудоемкого определения биологической активности. Чувствительность определения интерферона альфа 2 в крови составляет 10–20 пг/мл.



загрузка...