Биохимичесие аспекты применения цитокинов в эксперименте: результаты дисперсионного анализа Ю.Н. Хомяков, В.М. Борзенков, В.В. Гусев , С.Е. Северин
МНИИ медицинской экологии, Москва; 2 ГНЦ прикладной микробиологии, Оболенск, Московская область
Применение цитокинов в эксперименте часто сопровождается обратимым изменением гомеостаза, что может быть легко зарегистрировано в результате стандартного биохимического скрининга сыворотки крови подопытных животных. Предметом исследования в нашей работе был анализ данных клиникобиохимического обследования беспородных крыс и кроликов породы шиншилла обоих полов в ходе опытов по острому и хроническому введению рекомбинантного лимфотоксина (TNF?) с удельной активностью 1,3?108 ед/мг, а также слитного белка фактор некроза опухоли ??1 тимозин (TNF? ?1T) с удельной активностью 2?107ед/мг.
Тестирование животных в остром эксперименте проводили через 2, 5, 24 ч и 2 нед. после однократного введения препаратов в дозах:
1) лимфотоксин: крысам — внутрибрюшинно (в/б) и подкожно (п/к) 103, 104, 105 и 106 ед/кг, внутримышечно (в/м) и внутривенно (в/в) — 106 ед/кг; кроликам — в/в и п/к 103, 104, 105 и 106 ед/кг, в/в — 106 ед/кг;
2) TNF??1T: всеми способами введения 10, 20, 50 и 500 мкг/кг.
Тестирование животных в хроническом эксперименте проводи ли непосредственно перед началом курса ежедневных инъекций (фон) и далее — на 7, 21е сут. курса и через 2 нед. после последней инъекции препарата, используя дозы:
1) лимфоток син: п/к и в/б 103, 104 и 105 ед/кг крысам;
2) TNF??1T: п/к и в/б 10, 25, 50, 100 и 200 мкг/кг.
Клиникобиохимическое обследование в ходе экспериментов позволило выявить слабые и умеренные изменения ряда показателей (общий белок, креатинин, мочевина, глюкоза и др) без явно выраженной тенденции. В связи с этим, представлял интерес дисперсионный анализ полученной фармакодинамики с учетом дозы и способа введения препаратов в качестве определяющего фактора. Кроме оценки достоверности влияния фактора, подсчитывали и силу его влияния.
В результате проведенных исследований было обнаружено, что достоверная связь с дозой и способом введения препаратов обнаруживается преимущественно у крыс. Установлено существенное влияние дозы TNF? на динамику аспартатаминотрансферазы, холестерина, мочевины, общего белка и глюкозы у животных обоих полов. При этом способ введения препарата имел значение только при низких дозах — 103 и 104 ед/кг (сила влияния факторов — 0,5–0,9). Аналогичную тенденцию удалось выявить и при анализе результатов испытания TNF??1T. Вместе с тем для этого препарата сила влияния факторов не превышала 0,5. Достоверные фармакодинамические сдвиги были обнаружены только для глюкозы, общего белка и креатинина. Таким образом, использование дисперсионного анализа при применении препаратов цитокинов в эксперименте способствует обнаружению обратимых дозозависимых изменений биохимических показателей. Способ применения имеет значение только при использовании низких доз препаратов.