загрузка...
 
Роль цитокинов и метаболических факторов в механизмах инволюции тимуса при опухолевом росте Е.П. Киселева , Р.П. Огурцов , А.Н. Суворов , Д.И. Габрилович  
Повернутись до змісту

Роль цитокинов и метаболических факторов в механизмах инволюции тимуса при опухолевом росте Е.П. Киселева , Р.П. Огурцов , А.Н. Суворов , Д.И. Габрилович  

ГУ НИИ экспериментальной медицины РАМН, С.Петербург;  2 Раковый центр им. Ли Моффитта, Университет Южной Флориды, Тампа, США

В последние годы появились работы, указывающие на то, что тимус имеет важное значение для созревания Т-димфоцитов не только в раннем возрасте, но сохраняет способность продуцировать лимфоциты до глубокой старости. Эти данные вновь привлекли внимание к изучению тимуса у взрослых и к проблемам нарушения дифференцировки тимоцитов. Оказалось, что возрастная инволюция этого органа, так же, как и атрофия тимуса, наблюдаемая при многих экспериментальных моделях, имеют общие патогенетические механизмы и, в частности, связаны с нарушением дифференцировки лимфоцитов на этапе ?селекции (Adkins et al., 2000). В наших предыдущих исследованиях было показано, что одним из возможных механизмов инволюции тимуса при опухолевом росте может являться усиление апоптоза тимоцитов и их внутритимусной  гибели.

Целью настоящей работы было выявление эндогенного фактора, определяющего усиление апоптоза тимоцитов в организме животных с перевиваемой опухолью. Опыты проводили на мышах линии С3НА, которым п/к инокулировали 105 клеток  сингенной перевиваемой  гепатомы 22а. Апоптоз тимоцитов исследовали морфологически путем подсчета клеток, окрашенных с помощью акридинового оранжевого/этидиум бромида, а также по фрагментации ДНК, выявляемой в дифениламиновом тесте (ДФА) или на электрофорезе. В сыворотке крови определяли уровень цитокина TNF? и  гормональнометаболических факторов  (кортикостерон, лактат, холестерин), известных своей способностью индуцировать апоптоз тимоцитов  in vitro. Кроме того, изучали влияние ангиогенного фактора VEGF на индукцию апоптоза в тимоцитах интактных мышей in vitro и in vivo. Было показано, что уровень содержания кортикостерона и лактата не коррелирует с показателями апоптоза тимоцитов, усиливающегося в динамике роста гепатомы 22а. TNF? в сыворотке крови опухоленосителей не определялся. Гиперхолестеринемия развивалась у мышей параллельно с усилением апоптоза, и была выявлена высокая степень корреляции между показателями содержания общего холестерина и ДФАтеста. Возможно, что  гиперхолестеринемия оказывает влияние на апоптоз тимоцитов на поздних сроках развития опухоли, но не является фактором, вызывающим инволюцию тимуса. Мы предположили, что таким фактором может быть VEGF. Установлено, что инкубация тимоцитов интактных мышей BALB/c в присутствии 50 и 100 нМ VEGF вызывает достоверное усиление апоптоза тимоцитов, выявляемое в тестах с окрашиванием клеток меченым аннексином V или пропидиум иодидом, учет которых проводили на проточном цитофлуориметре. Введение VEGF интактным мышам в концентрации 50 и 100 нг/ч в течение 7 сут. с помощью осмотических капсул так же вызывало усиление апотоза тимоцитов, а более длительное введение — в течение 21–28 сут. — приводило к развитию инволюции тимуса. Мы предполагаем, что VEGF играет важную роль в нарушении процессов апоптоза и дифференцировки тимоцитов при опухолевом росте и участвует в механизмах раз вития инволюции вилочковой железы. Работа поддержана грантами NATO SA(LST.CLG 975197) и РФФИ № 000449430.



загрузка...