Цитокинотерапия интерлейкином в спонтанной мышиной модели неполной мастэктомии С.Г. Семушина, Ю.Ф.В. Тан, Е.В. Моисеева Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, г. Москва
Цитокинотерапия, в том числе интерлейкином 2 (И-2), изначально предполагалась для лечениянеоперабельных опухолей и применяется в клинике по сей день для преодоления вызванной хирургическим шоком иммуносупрессии. Неполная мастэктомия естественно возникающих аденокарциноммышей ВЬРВ была использована для моделирования клинической ситуации, при которой иссечениеопухоли в пределах здоровых тканей невозможно, а применение химио- или радиотерапии проблематично. И-2 вводили однократно локально в остаточную опухолевую массу непосредственно во времяпроведения частичной мастэктомии, лечение каждой самки рассматривалось как индивидуальныйклинический случай. Эффективность иммунотерапии оценивали по увеличению продолжительности иулучшению качества жизни самок-опухоленосителей. Для выявления прогностических факторов учитывали физиологический статус самок и особенности опухолевого роста. Показано, что инъекция И-2 существенно снизила появление вторичных опухолей, что свидетельствовало о системном действии цитокинотерапии и об улучшении качества жизни реципиентов. Однако терапия И-2 была эффективна только для особей с определенными характеристиками, а именно: девственных самок более молодого возраста с медленно растущими аденокарциномами с выраженным латентным периодом, особенно с предсуществующими геморрагическими кистами и патоморфологическими признаками спонтанного отторжения опухоли. Факторами, ограничивающими эффективность иммунотерапии, являлся пожилой возраст самок, наличие беременностей в анамнезе, быстрый рост опухоли и наличие муциновых кист в опухоли. (Цитокины и воспаление. 2008. Т. 7, № 4. С. 21-28.)
Несмотря на значительные успехи в лечении и изучении причин и особенностей рака молочной железы (РМЖ), смертность от него продолжает увеличиваться [1], обусловливая актуальность разработки новых и совершенствования существующих методов лечения, в том числе и иммунотерапевти- ческих. Цитокинотерапия интерлейкином 2 (1Ь-2) применяется в клинической практике для лечения меланомы, рака почки и других солидных опухолей [4]. Эффективность этого вида иммунотерапии при РМЖ изучена недостаточно, результаты исследований неоднозначны [6]. Возникает необходимость поиска возможных прогностических факторов с целью предварительного отбора пациентов для успешного применения иммунотерапии 1L-2 [8], для чего необходимы исследования на адекватных моделях РМЖ. Известно, что естественно возникающие, в том числе, и под действием хронических воспалительных процессов, опухоли молочных желез (ОМЖ) самок мышей ВLНВ-НL(8.17)11еш по патоморфологическим характеристикам адекватно отражают клиническую картину семейного РМЖ человека [13]. Было показано, что однократная пери- туморальная (подкожная вокруг опухоли) инLекция 1L-2 приводила к задержке роста ОМЖ у определенной части мышей-опухоленосителей [13].
В некоторых клинических случаях РМЖ по тем или иным причинам невозможно полное удаление опухолевой массы, что является причиной рецидивов и исключает возможность излечения пациента. Хирургическая операция сама по себе способна вызвать длительную иммуносупрессию, приводя к развитию септических осложнений, обеспечивая благоприятную почву для метастазирования [5, 13].
Это послужило основанием для клинического применения IL-2 в дооперационном периоде у больных раком желудка [3] и прямой кишки [2].
Поскольку на мышиной модели SL-2 лимфолей- коза интратуморальный (внутрь опухоли) способ введения IL-2 был признан более эффективным по сравнению с перитуморальным [7], мы предположили, что на спонтанной мышиной модели РМЖ однократная интратуморальная инLекция IL-2 при неполном иссечении опухолевой массы поможет снизить интенсивность роста остаточной первичной опухоли и/или предупредить появление вторичных, увеличив продолжительность жизни (ПЖ) реципиентов. Таким образом, целью исследования было проверить данную гипотезу и выявить возможные прогностические факторы, определяющие исход иммунотерапии, как связанные с самим реципиентом, так и с патоморфологическими особенностями роста опухоли.
Мы показали, что цитокинотерапия путем однократной инъекции IL-2 внутрь опухоли при проведении частичной мастэктомии способствует улучшению качества жизни всех реципиентов и выживанию только чувствительной к IL-2 популяции реципиентов, а именно, преимущественно молодых девственных самок с лагположительными медленно растущими опухолями.
Материалы и методы
Описание модели
Использовали самок мышей BLRB-Rb(8.17)1Iem (BLRB) [14]с высокой частотой возникновения спонтанного РМЖ с возможным участием экзогенного MMTV-ретровируса, обнаруженного у них в лейкоцитарной фракции крови. Частота возникновения опухолей молочных желез (ОМЖ) близка к 100 % для многоро- жавших самок BLRB при среднем возрасте около 11 месяцев на момент обнаружения первой опухоли. У каждой третьей самки развивается более одной опухоли [13] в соответствии с расположением молочных желез (рис. 1а).
Дизайн эксперимента
До проведения операции самок с опухолями распределяли в контрольную и опытную группы попарно с учетом физиологических характеристик (возраст, гормональный статус: рожавшие/ нерожавшие) и особенностей опухолевого роста (количество локализаций, наличие/отсутствие латентного периода, начальный размер, динамика роста). Пальпируемые опухоли размером менее 4 мм в течение, по крайней мере, двух недель (с выраженным латентным периодом), называли лагположительными (лаг+). Опухоли размером более 4 мм уже при первом обнаружении называли лаготрицательными (лаг-). Измерение размера опухолей производили еженедельно путем вычисления среднего диаметра индивидуальной опухоли (СДО) по трем взаимно перпендикулярным параметрам [13]. Было прооперировано 20 самок (10 контрольных и 10 опытных). Однако две самки экспериментальной группы были исключены из рассмотрения вследствие
обнаружения у них сопутствующего лимфолейкоза. Хирургические операции проводили на наркотизированных животных. При наличии у самки одной опухоли проводили частичное удаление ОМЖ — неполную мастэктомию (НМЭ), иссекая 50-80 % опухолевой массы (рис. 16). В остаток опухоли самкам экспериментальной группы (n = 8) инLецировали 0,2 мл IL-2 (Chiron, Амстердам) в физиологическом растворе в дозе 1 х 106 МЕ на мышь. Самкам контрольной группы (n = 10) вводили аналогичным образом соответствующее количество физиологического раствора. При наличии у самок нескольких опухолей (n = 2) операбельную ОМЖ удаляли полностью, а в оставшуюся неоперабельную опухоль самке экспериментальной группы интратуморально вводили IL-2, самке контрольной группы вводили физиологический раствор. Операционную рану закрывали непрерывным швом.
Регистрация и оценка параметров
Эффективность локальной однократной инLекции IL-2 при НМЭ оценивали по улучшению качества жизни (замедлению роста остаточных опухолевых масс и отсутствию вторичных ОМЖ) и выживанию мышей в экспериментальной группе по сравнению с контролем. Учитывали следующие временные параметры: возраст самки на момент возникновения опухоли, ПЖ самки с момента обнаружения опухоли до операции и после операции до момента гибели, а также полную ПЖ. После проведения операции у самок еженедельно оценивали физическое состояние, измеряли массу тела, размеры остаточной опухолевой массы, отмечали появление вторичных опухолей и время гибели самок. При размере опухоли более 15 мм и потере веса более 20 % самок подвергали эвтаназии. При проведении мониторинга роста остаточных опухолевых масс рассчитывали прирост СДО опухоли в конце жизни самки, который вычисляли по формуле (СДОк - СДОнмэ /СДОниэ) х 100 %, где СДОк — конечный и СДОнмэ — диаметр опухоли на момент НМЭ. Затем на основании этого параметра рассчитывали скорость роста опухоли после НМЭ как прирост СДО в неделю.
Патоморфологический анализ
Образцы иссеченных опухолей фиксировали в 4 %-ном растворе нейтрального формалина. Для проведения классификации опухолей, визуализации геморрагических участков опухоли и выявления эозинофильных гранулоцитов (Эо) в лейкоцитарном инфильтрате опухоли (ЛИО) использовали стандартную окраску гематоксилином-эозином по Майеру. Для визуализации секреторной активности клеток и выявления макрофагов (Мф) в ЛИО использовали окраску по Шиффу. Опухоли молочных желез классифицировали по разработанной ранее схеме [12, 13].
Статистическую значимость различий в значениях параметров определяли с помощью непараметрического U-критерия Вилкоксона—Манна—Уитни.
Результаты и обсуждение
Зависимость способа введения IL-2 от морфологии опухоли
Морфологический анализ иссеченной опухолевой массы при проведении НМЭ выявил как солидные (рис. 1в), так и кистозные ОМЖ (рис. 1г). Макроскопические особенности морфологической структуры опухоли повлияли на способ локального введения 1L-2: весь обLем 1L-2 был введен интратуморально, т. е. в остаток опухолевой массы, только в случае солидных опухолей, тогда как при кистозном строении опухоли примерно половина инLецированного в опухоль обLема 1L-2 выливалась в поле операции и, таким образом, действовала перитуморально.
Оценка эффективности К-2 по выживанию мышей
Анализ динамики выживания в опытной и контрольной группах выявил различия только после достижения 50 %-ного выживания (рис. 2а, б). Реципиенты были представлены короткоживущей (КЖ, при ПЖ после НМЭ менее 6 нед.) и долгоживущей (ДЖ, более 6 нед.) подгруппами, как в контроле, так и в эксперименте (см. рис. 2б). Анализ полученных данных по индивидуальной ПЖ леченныхIL-2 самок после НМЭ показал, что способ введения не повлиял на выживание (см. рис. 2б). Таким образом, данные, полученные на спонтанной модели РМЖ, отличаются от результатов в перевиваемой мышиной модели лимфолейкоза БL2, что, вероятно, связано с особенностями неоваскуляризации лим-фомы и карциномы. Для стандартизации дизайна экспериментов по цитокинотерапии ІЬ-2 при НМЭ в дальнейшем целесообразно вводить ІЬ-2 в район остаточной опухоли после закрытия операционной раны швом.
По средней ПЖ после операции, леченные ІЬ-2 самки уже получили некое преимущество (7 нед. при 6 нед. в контроле). Более того, с учетом времени жизни самок с момента обнаружения опухоли до проведения операции, тенденция к продлению жизни леченых самок оказалась более выраженной (13 нед. при 9 нед. в контроле, рис. 2е). Анализ ПЖ самок в КЖ и ДЖ подгруппах показал, что цитокинотерапия ІЬ-2 оказалась эффективной только для ДЖ самок (19 нед. при 10 нед. в контроле, р < 0,05, рис. 2г).
Влияние характеристик реципиента на выживание
в) г)
Рис. 1. Неполная мастэктомия
а) схема расположения ткани молочных желез у мыши;
б) вид опухоли до неполной мастэктомии (маркером отмечены границы опухоли и ее иссекаемой части);
в) остаток солидной опухоли после иссечения опухолевой массы;
г) остаток кистозной опухоли после иссечения опухолевой массы.
Самки с разными физиологическими характеристиками распределялись по группам равномерно, однако их соотношение в КЖ и ДЖ подгруппах оказалось разным (табл. 1). Это предполагает возможность влияния физиологического статуса реципиента на эффективность иммунотерапииIL -2. Популяциилеченых и контрольных самок допроведения НМЭ не различалисьпо возрасту на момент обнаружения опухоли (55 и 50 недель,соответственно). Изначальносоотношение старых (возрастболее года, или 52 недель) имолодых самок было одинаковым в контрольной и опытной группах. Однаковыведение из рассмотрения (см. методику) двухсамок, оказавшихся молодыми, привела к увеличению доли старых самок в опытной группе посравнению с контролем. В КЖ подгруппе опытнойгруппы оказались только старые самки, в то время как в контрольной группе возраст, вероятно,не повлиял на выживание, так как старые самкираспределились в подгруппах КЖ и ДЖ поровну.Неэффективность терапииIL -2 для старых самокнапоминает ситуацию при лечении этим цито- кином спонтанного РМЖ мышей без хирургии [13] и при примененииIL -2 перед хирургическим лечением рака желудка в клинике [3]. Вероятно, как в клинике, так и в эксперименте, пожилой возраст может быть ограничивающим фактором для применения цитокинотерапии.
Таблица 1Соотношение самок в группах и подгруппах в зависимости от физиологического статуса мышей
Рис. 2. Выживание самок мышей после неполной мастэктомии и лечения 11--2
а) динамика выживания леченых самок по сравнению с контрольными;
б) индивидуальная продолжительность жизни самок с чисто интратуморальным и с интра- и перитуморальным введением И-2 (штриховка);
в) средняя продолжительность жизни до (штриховка) и после неполной мастэктомии и лечения И-2;
г) средняя продолжительность жизни до (штриховка) и после неполной мастэктомии и лечения И-2 для короткоживущих и долгоживущих самок.
Соотношение девственных и рожавших самок на момент НМЭ было приблизительно одинаковым в контрольной и опытной группах. После НМЭ в подгруппах как опытной, так иконтрольной групп преобладалидевственные самки (3/4 и 3/5,соответственно). Очевидно, изменение гормонального статусаво время беременности являетсяфактором, ускоряющим ростОМЖ и ограничивающим выживание. Полученные данныеиллюстрируют, насколько важнопроводить тестирование иммуномодулирующих препаратовна адекватных модельных системах. Ясно, что использованиеперевиваемых линий РМЖ намолодых и девственных самках может привестик ложноположительным результатам. Известно,что перевиваемые мышиные модели вследствиенеадекватности неоангиогенеза не воспроизводятреальный, естественно возникающий РМЖ нетолько человека, но и мышей [9]. Важная особенность нашего подхода — наблюдение за каждойсамкой мыши в течение всей ее жизни, включаяпериод естественного развития патологическихпроцессов (хронические воспалительные процессыи проявление видимой ОМЖ). Это позволило рассматривать мышь как ветеринарного пациента, а ееисторию болезни — как уникальный клиническийслучай с полным использованием данных анамнеза.При разнообразии физиологических характеристик реципиентов и их ограниченном количествев спонтанной мышиной модели важно правильноподобрать животных для контрольной и опытнойгрупп (пары опыт-контроль со сходными характеристиками). Улучшение дизайна экспериментаприводит к уменьшению систематической ошибкии предполагает проведение серии так называемыхточечных экспериментов с целью увеличения количества примеров. Кроме того, при испытаниипрепаратов с неизвестными механизмами действия, по этическим соображениям, не следуетиспользовать избыточное количество животных.Так, для ІL-2 уже известен двойственный характервлияния как на рост ОМЖ, так и на выживаниереципиентов: ускорение роста лаг+ и замедлениероста лаг- ОМЖ при укорочении и удлинении ПЖопухоленосителей, соответственно [13]. При такойситуации, очевидно, увеличение количества животных в экспериментальной группе не приводит кповышению уровня статистической достоверностиотличий показателей от их значения в контроле.Влияние характеристик опухоли на выживаниеПопуляции леченых и контрольных самок допроведения НМЭ не различались по параметрампроявления и роста опухоли после видимого проявления (табл. 2). Однако после НМЭ в ДЖ подгруппеопытной группы преобладали самки с лаг+ ОМЖ.
Таблица 2Характеристика опухолевого роста до и после операции
В контрольной группе этот фактор, вероятно, не повлиял на выживание, так как непролеченные самки с лаг+ опухолями распределились поровну в КЖ и ДЖ подгруппы. Как пролеченные, так и контрольные самки с медленно растущими после видимого проявления опухолями попали в ДЖ подгруппы (данные не показаны).
Диаметр опухоли на момент НМЭ в опытной группе был несколько меньшим, чем в контроле. Тенденция к распределению самок с меньшим размером опухоли в КЖ подгруппы как в опытной, так и в контрольной группах наводит на мысль о том, что оперировать ОМЖ мышей слишком рано, вероятно, не стоит. Известно, что иногда только начальный размер ОМЖ на момент хирургии предопределяет исход лечения [10]. Превалирует мнение, что хирургическое вмешательство при РМЖ должно быть проведено как можно раньше. Однако наши наблюдения на спонтанной модели РМЖ позволяют усомниться в безоговорочной правомочности этой точки зрения. Известно, что при спонтанном образовании ОМЖ возможно независимое зарождение нескольких микроскопических зачатков опухоли. Согласно нашему предположению, тот зачаток, который почему-либо получает преимущество, обгоняет остальные по росту и при достижении им определенного размера начинает «угнетать» рост остальных. Поэтому удаление опухоли до этого момента может привести к ускоренному росту остальных узелков, повышая вероятность появления рецидивов и вторичных ОМЖ после удаления первичной ОМЖ.
На момент операции как в контрольной, так и в опытной группе присутствовало по одной самке с двумя ОМЖ разных локализаций, представляя, таким образом, ситуацию, близкую к реальной клинической. Такая самка с удаленной операбельной ОМЖ, получившая инLекцию в неоперабельную опухоль, в опытной группе прожила после НМЭ 7 недель, тогда как соответствующая контрольная самка прожила 5 недель. После проведения НМЭ у некоторых контрольных самок возникли вторичные опухоли (у 4 из 10). Одновременно, среди 8 пролеченных была толькоIL-2 повышает защиту от рака молочной железы
Рис. 3
а) прогрессия от высокодифференцированной (слева вверху) до низкодифференцированной (справа внизу) аденокарциномы солидного типа, ГЭ;
б) аденокарцинома с бедной стромой, кистозными полостями, заполненными кровью (слева вверху) или муциноподобной жидкостью (справа вверху) и инвазией в
мышцу (справа внизу), ГЭ;
в) низкодифференцированная солидная карцинома с инфильтратами, напоминающая медуллярный рак человека, ГЭ;
г) некроз по типу «comedo», ГЭ;
д) солидная форма кистозно-папиллярной аденокарциномы, окраска по Шиффу выявляет муцины;
е) полнокомпонентный инфильтрат с плазматическими клетками, лимфоцитами и макрофагами, окраска по Шиффу.
одна самка с вторичной ОМЖ, что свидетельствовало о системном действии ]L-2 и улучшении качества жизни самок опытной группы.
Средние темпы роста остаточной опухолевой массы не различались в опыте и контроле. Однако у КЖ самок опухоль росла быстрее как в опыте, так и в контроле (27 % против 16 %, соответственно).
Патоморфологический анализ образцов РМЖ
У самок BLRB было выявлено наличие нескольких типичных видов спонтанных ОМЖ: солидная аденокарцинома (АБ, рис. 3а); кистозная аденокарцинома (СА, рис. 3б); солидный тип карциномы, напоминающий медуллярную карциному человека (Б,рис. 3е); протоковая карцинома, напоминающая тип «comedo» человека (D-comedo, рис. 3г); кистозная протоковая папиллярная карцинома (СР, рис. 39). Таким образом, выявленные у мышей наших линий виды РМЖ по морфологии соответствуют аналогичным типам, описанным для человека [13]. Некротические образования типа «comedo» встречались только в опухолях КЖ самок, предопределяя неблагоприятный исход, как и в клинике РМЖ [11, 15]. Преобладание участков CP с муцинообразным содержимым (рис. 39, положительная ШИК-реакция) встречалось чаще у КЖ самок, а типы AD и D наблюдались как в КЖ, так и ДЖ подгруппах. У двух наиболее долгоживущих самок с медленным ростом ОМЖ до и после НМЭ (одна — в контроле и одна — в опыте) был выявлен своеобразный тип папиллярной карциномы, не встречавшийся ранее, с признаками спонтанного отторжения опухоли, а именно: острой воспалительной реакций и некрозом, наличием кальцифицированных телец и участков кариорексиса в удаленных образцах. Вероятно, IL-2 оказался наиболее эффективным при наличии предсуществующего иммунного ответа организма на опухоль.
Геморрагические участки отмечались чаще в опухолях ДЖ самок, особенно явно тенденция прослеживалась для пролеченной IL-2 группы. Это позволяет предположить, что наличие пред- существующих геморрагий могло способствовать механизму действия IL-2 [4].
Было сложно выявить четкую зависимость выживания самок от расположения, количества и состава ЛИО в образцах. Явные ЛИО отмечались чаще в опухолях ДЖ самок, особенно явно эта тенденция прослеживалась для пролеченной IL-2 группы. Однако, вероятно, более важным фактором был состав ЛИО: у самок ДЖ подгруппы встречались полнокомпонентные истинные инфильтраты (проникающие внутрь опухоли), содержащие лимфоциты, плазмоциты и макрофаги при наличии признаков острого воспаления (эозинофи- лов и нейтрофилов) у самых ДЖ самок (рис. 3е). У контрольных и пролеченных IL-2 КЖ самок преобладали слабо выраженные, ассоциированные с опухолью инфильтраты; и даже в выраженных инфильтратах преобладал только один тип клеток: или лимфоциты, или макрофаги (данные не показаны). Однако при выявлении роли количественного и качественного состава ЛИО для прогноза выживания после НМЭ следует иметь в виду, что, во-первых, важно расположение ЛИО (истинные и ассоциированные с опухолью инфильтраты), во- вторых, при сходных количествах и композиции ЛИО, расположение и происхождение ЛИО может быть различным, и, естественно, функции данного инфильтрата в опухоли могут различаться [13].
Таким образом, цитокинотерапия путем однократной инLекции ІL-2 внутрь опухоли при неполном удалении спонтанного РМЖ улучшила динамику выживания только долгоживущих самок по сравнению с долгоживущими самками в контроле. Был выявлен системный эффект локальной терапии: у пролеченных ІЬ-2 самок почти не наблюдался рост вторичных опухолей, что свидетельствовало об улучшении качества их жизни.
Проведенный анализ влияния характеристик реципиента и опухоли на выживание после НМЭ выявил ряд важных прогностических факторов. Гормональный статус девственных самок благоприятно сказался на выживании как пролеченных ІЬ-2, так и контрольных животных. Тогда как наличие беременностей и возраст более 1,5 лет служили отрицательными прогностификаторами. Применение ІЬ-2 улучшило выживание самок с медленно растущими опухолями с выраженным латентным периодом и предсуществующими патоморфологическими признаками спонтанного отторжения.
Эти данные в дальнейшем могут послужить аргументами в пользу выбора пациентов с определенными характеристиками для успешного применения данного вида иммунотерапии при проведении неполной мастэктомии как в эксперименте, так и в клинике.
Благодарности
Авторы выражают благодарность профессору Виллему ден Оттеру за любезно предоставленный ІЬ-2 и доктору Джону Якобсу за участие в обсуждении дизайна эксперимента (Открытый университет, г. Амстердам, Нидерланды).
ЛИТЕРАТУРА:
Breast Cancer Facts and Figures, 2007 — 2008:
Brivio F., Fumagalli L., Lissoni P. et al. Pre-operative immunoprophylaxis with interleukin-2 may improve prognosis in radical surgery for colorectal cancer stage B-C // Anticancer Res. — 2006. — Vol. 26, № 1B. — P. 599-603.
Cesana G.C., Romano F., Piacentini G. et al. Low-dose interleukin-2 administered pre-operatively to patients with gastric cancer activates peripheral and peritu- moral lymphocytes but does not affect prognosis // Ann. Surg. Oncol. — 2007. — Vol. 14, № 4. — P. 1295-1304.
Den Otter W., Jacobs J.J., Battermann J.J. et al. Local therapy of cancer with free IL-2 // Cancer Immunol. Immunother. — 2008. — Vol. 57, № 7. — P. 931-950.
Eggermont A.M., StelLer E.P., Sugarbaker P.H. Laparotomy enhances intraperitoneal tumor growth and abrogates the antitumor effects of interleukin-2 and lympho- kine-activated killer cells // Surgery, 1987. — Vol. 102, № 1. — P. 71-78.
Hadden J.W. The immunology and immunotherapy of breast cancer: an update // Int. J. Immunopharmacol. — 1999. — Vol. 21, № 2. — P. 79-101.
Jacobs J.J., Sparendam D., Den Otter W. Local interleukin 2 therapy is most effective against cancer when injected intratumourally // Cancer Immunol. Immunother. — 2005. — Vol. 54, № 7. — P. 647-654.
Kedar E., Klein E. Cancer immunotherapy: are the results discouraging? Can they be improved? // Adv. Cancer Res. — 1992. — Vol. 59. — P. 245-322.
IL-2 повышает защиту от рака молочной железы
9. Lee J.C., Kim D.C., Gee M.S. et al. Interleukin-12 inhibits angiogenesis and growth of transplanted but not in situ mouse mammary tumor virus-induced mammary carcinomas // Cancer Res. — 2002. — Vol. 62, № 3. — P. 747-755.
Lee Y.T. Surgical treatment of carcinoma of the breast: III. Pathological finding and probability of relapse // J. Surg. Oncol. — 1984. — Vol. 2 5, № 2. — P. 109-115.
McCready D.R., Hanna W., Kahn H. et al. Factors associated with local breast cancer recurrence after lumpectomy alone // Ann. Surg. Oncol. — 1996. — Vol. 3, № 4. — P. 358-366.
Moiseeva E.V., Rapoport E.M., Bov'n N.V. et al. Galectins as markers of aggressiveness of mouse mammary carcinoma: towards a lectin target therapy
of human breast cancer // Breast. Cancer Res. Treat. — 2005. — Vol. 91, № 3. — P. 227-241.
Moiseeva E. Original approaches to test anti-breast cancer drugs in a novel set of mouse models // Utrecht University, The Netherlands, 2005.
The Mouse Tumour Biology Database, 1999.
Yagata H., Harigaya K., Suzuki M. et al. Comedonecrosis is an unfavorable marker in node-negative invasive breast carcinoma // Pathol. Int. — 2003. — Vol. 53, № 8. — P. 501-506.
Cytokine therapy with IL-2 treatment in spontaneous murine modelof incomplete mastectomyS.G. Semushina, J.F.V. Tan, E.V. Moiseeva
M.M. Shemyakin and Yu.A. Ovchinnikov Institute of Bioorganic Chemistry, Russian Academy of Sciences,Moscow
Cytokine therapy, including therapy with interleukin 2 (IL-2), was initially proposed to treat non-operabletumors and is currently used preoperatively to overwhelm immunosuppression caused by surgical intervention. Incomplete mastectomy of naturally arising BLRB mouse mammary adenocarcinomas was employedto reproduce clinical cases with difficulties to extirpate tumor completely and to apply chemo- or radiotherapy properly. Single IL-2 treatment was applied into tumor residue during incomplete mastectomy;each female was considered as an individual clinical case. Immunotherapeutical efficacy was estimatedby survival prolongation and quality of life improvement of treated females comparing with the controls.Physiological status of female and tumor growth parameters were at consideration to reveal prognosticfactors. We demonstrated that single intratumoral IL-2 injection during incomplete mastectomy reducedrisk of secondary mammary tumor appearance resulting in systemic effect and life quality improvement ofoperated females. However, IL-2 was effective for the only certain recipients, i.e. virgins of the indicatedages bearing slowly growing adenocarcinomas with distinct latent period, especially demonstrating preexisting hemorrhagic cysts and signs of spontaneous tumor rejection. Old age of females, pregnancies inanamnesis, fast tumor growth rate and mucin tumor cysts limited IL-2 therapy effectiveness. (Cytokinesand Inflammation. 2008. Vol. 7, № 4. P. 21-28.)