загрузка...
 
 Влияние комплексной терапии на показатели местного иммунитета больных пародонтитом
Повернутись до змісту

 Влияние комплексной терапии на показатели местного иммунитета больных пародонтитом

 

О.В. Беляева, Н.Н. Кеворков

Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения РАН, Пермь

 

Проведено изучение местного иммунного статуса больных хроническим генерализованным пародонтитом. Иммунологическое исследование включало оценку содержания в жидкости пародон-тальных карманов иммуноглобулинов классов С, М и А, а также интерлейкинового профиля: МР', 11.-4 и И-8. При пародонтите на местном уровне наблюдается развитие иммунного ответа преимущественно по Тп2-пути. Комплексная терапия, включающая медикаментозное, физиотерапевтическое, хирургическое и ортопедическое лечение, у больных с пародонтитом привела к нормализации многих показателей местного иммунитета, но не повлияла на уровень 1ЫРу. Резистентность последнего к лечению дает возможность предположить, что ослабление провоспалительного Т-клеточного ответа является важным звеном патогенеза пародонтита.

Ключевые слова: иммуноглобулины, цитокины, жидкость десневых карманов, хронический генерализованный пародонтит.

Заболевания пародонта по распространенности среди стоматологических заболеваний занимают второе место после кариеса. Основным этиологическим фактором пародонтита являются микроорганизмы зубной бляшки [6, 8]. О связи иммунитета с рядом патологических состояний в пародон-те свидетельствуют многие клинические ситуации. Так, при СПИДе, длительном стрессе, лейкозах, сахарном диабете и других видах патологии, ассоциированных с нарушениями состояния иммунной системы, наблюдается повышенная частота развития пародонтита [1, 6, 8]. Причем в патогенезе заболевания существенная роль принадлежит нарушениям именно местного иммунитета, что и определяет интерес к изучению этого вопроса [2-7, 9-12, 14-18, 22-24]. В большинстве работ, посвященных изучению параметров местного иммунитета, основным объектом для исследования служат слюна и капиллярная кровь десны [4, 5, 14, 17-20].

Целью данной работы явилась оценка состояния местного иммунитета в жидкости десневых карманов (ЖДК) у больных с хроническим генерализованным пародонтитом (ХГП) и влияния на него комплексной терапии. 

Была исследована ЖДК 40 больных ХГП в возрасте от 22 до 57 лет до и после лечения и 10 лиц с интактным пародонтом (группа сравнения).

Определение содержания в ЖДК иммуноглобулинов (19) классов С, М и А, а также цитокинов ИЧГу, 11_-4 и 11_-8 проводили методом твердофазного иммуноферментного анализа: концентрации 1д классов М, С, А — наборами ЗАО «Вектор-Бест» (г. Новосибирск), цитокины — наборами ООО «Цитокин» (С.-Петербург).

Для забора материала была использована оригинальная методика, суть которой состоит в следующем.

Специальные диски круглой формы диаметром 6,0 мм, изготовленные из хроматографической бумаги, помещали в зубо-десневую борозду. Когда они пропитывались жидким содержимым, их высушивали на воздухе при комнатной температуре, помещали в пластиковые стерильные пробирки (/=1,5 см3; «Медполимер», С.-Петербург) и хранили при -18 °С.

Жидкостную емкость фильтров, использованных для забора материала, оценивали в контрольных исследованиях по их способности впитывать определенный объем дистиллированной воды. Диск взвешивали до и после пропитывания его водой и определяли соответствующее изменение веса. Среднее значение массы жидкости, поглощенной одним фильтром, было стандартным и составило 2,10 ± 0,11 мг.

Содержимое фильтров экстрагировали в постоянном объеме солевого буферного раствора (рН = 7,2). Дальнейшее исследование выполняли согласно инструкциям, прилагаемым к указанным выше наборам.

Комплексная терапия больных с ХГП включала медикаментозное, физиотерапевтическое, хирургическое и ортопедическое лечение.

В связи с тем что индивидуальные показатели в выборках имели многократные отличия, статистическую обработку данных проводили на основе логарифмированных величин абсолютных значений концентрации. Достоверность различий определяли по ^критерию Стъюдента.

Результаты и обсуждение

У больных с ХГП в динамике лечения отмечены выраженные изменения концентрации различных классов в ЖДК (табл. 1). Так, исходный уровень у них более чем в 100 раз превышал таковой в контрольной группе. Уровень и был также повышен, но в меньшей степени: соответственно в 1,8 и 3,6 раза. Обнаруженные отклонения, по всей вероятности, свидетельствуют о развитии в тканях пародонта поликлональной активации В-лимфоцитов.

После проведенной комплексной терапии у пациентов с ХГП было обнаружено значительное снижение в ЖДК концентраций 1^ всех трех классов. Так, уровень уменьшился в 38 раз и не отличался от соответствующего показателя в контроле (р > 0,05).

Содержание в ЖДК под влиянием лечения также снизилось в 3,8 раза и достигло уровня, который оказался в 2 раза меньше, чем в группе лиц с интактным пародон-том.

Близкие по характеру изменения были зафиксированы при оценке влияния комплексного лечения ХГП на концентрацию в ЖДК ]^Ы. Его уровень после лечения снизился в 3,5 раза и сравнялся с контролем.

Исследование в ЖДК у больных с ХГП концентрации ЩЕу, 1Ъ-4 и 1Ъ-8 позволило выявить следующие закономерности. Содержание ЩЕу у пациентов как до, так и после лечения было более чем в 2 раза ниже по сравнению с этим показателем в контроле (табл. 2).

Концентрация 1Ъ-4 в ЖДК больных с ХГП была значительно (в 3,4 раза) повышена относительно соответствующего параметра в группе контроля (см. табл. 2). После проведения комплексной терапии содержание 1Ъ-4 уменьшилось в 8,8 раза и оказалось на 38 % ниже контрольного значения.

До лечения у больных отмечено также достоверное увеличение концентрации 1Ъ-8. Содержание 1Ъ-8 после лечения восстанавливалось до уровня соответствующего показателя в контроле.


Показатели содержания иммуноглобулинов в жидкости десневых карманов у больных пародонтитом в динамике лечения

 


 

 


Местный иммунитет при пародонтите

 

Таким образом, на основании полученных данных создается впечатление, что в основе развития ХГП лежит нарушение локальных иммунных механизмов реализации полноценного провоспали-тельного ответа. Доказательством этого служит достоверное снижение в ЖДК пациентов концентрации INFy и усиление продукции IL-4, что в свою очередь является индикатором активации ТЬ2-пути. В результате происходит местная по-ликлональная активация В-лимфоцитарного пула, сопровождающаяся избыточным синтезом IyG, IgM и IgA.

Понятно, что такой путь малоэффективен в реализации иммунной защиты, однако это позволяет несколько ослабить разрушительные процессы в костной ткани и перевести острое воспаление в хроническое.

В усиление ТЬ2-ответа определенный вклад могут вносить и пародонтопатогенные бактерии. Так, клетки периферической крови больных и здоровых людей того же возраста культивировали с Actinobacillus actinomycetem-comitans, PWM (митогеном лаконоса) и E. coli в течение 24 ч или 7 сут. В супернатантах культур определяли IL-4, INFy, IgA, IgG и IgM. В результате у больных был обнаружен достоверно более высокий уровень продукции IL-4 и достоверно более низкая интенсивность синтеза INFy по сравнению с аналогичными показателями здоровых добровольцев. Повышенная продукция IL-4 коррелировала также с увеличением концентрации IgM в культурах, стимулированных E. coli [15].

А. асИпотус^гтсотИапв способны также вызывать анергию Т-лимфоцитов. Лишь 2-5 % всех взаимодействовавших с микробом Т-лимфоцитов оказались способными вслед за этим продуцировать какой-либо из тестированных цитокинов; после активации Т-клеток А. асЫпотус^гт-сотИапэ две трети их подвергается апоптозу [21, 25]. Таким образом, было установлено, что микроорганизм А. асИпотус^гтсотИапв, который рассматривается как один из основных этиологических факторов развития пародонтита, непосредственно способен вызывать Т-клеточный иммунодефицит, индуцируя анергию или гибель Т-клеток.

Наряду с этим важно подчеркнуть и то обстоятельство, что, несмотря на ослабление ТЫ-отве-та у пациентов с пародонтитом, уровень 1Ъ-8 в ЖДК достоверно превышает соответствующий показатель у лиц с интактным пародонтом. Известно, что 1Ъ-8 поддерживает развитие воспалительного процесса за счет привлечения в очаг ней-трофилов [16]. Однако, необходимо отметить, что местное образование 1Ъ-8 эпителиальными и эн-дотелиальными клетками в значительной мере определяется действием провоспалительных ци-токинов — 1Ъ-1 и ТОТа [13, 22]. При этом ШТу не влияет на синтез 1Ъ-8 [22]. На основании этих данных можно заключить, что при пародонтите происходит не столько снижение провоспалительно-го ответа, сколько его рассогласованность. Принципиально важно, что в результате проведения комплексной терапии ХГП концентрация 1Ъ-8 в ЖДК снижалась до уровня, соответствующего норме. Это может свидетельствовать о том, что клиническое улучшение сопровождалось реальным ослаблением воспалительного процесса в тканях пародонта.

Таким образом, формирование ХГП на местном уровне сопровождается переключением на ТЬ2-путь иммунного реагирования. Ослабление провоспалительного ответа, связанное со снижением концентрации ЩЕу в ЖДК, скорее свидетельствует не о затухании воспалительного процесса, а о его вялом течении (хронизации). При этом продолжается привлечение в зону поражения нейтрофильных лейкоцитов и развивается по-ликлональная активация В-клеток, что в условиях неэффективной продукции специфических оп-сонизирующих факторов является неадекватным ответом на присутствие пародонтопатогенных микроорганизмов.

В заключение следует уточнить, что ослабление продукции ШЕу тормозит формирование ТЫ-ответа, но не препятствует усиленному синтезу 1Ъ-1 и ТМЕа, которые не только поддерживают хронизацию воспалительного процесса, но и способствуют разрушению костной ткани [13, 22].
Исходя из вышесказанного, мы выдвинули гипотезу о ведущей роли дефицита INF в развитии пародонтита (рисунок).

 

Выводы

При пародонтите наблюдаются выраженные отклонения в показателях местного иммунитета: в жидкости десневых карманов резко повышается концентрация иммуноглобулинов классов О, М и А, увеличивается содержание ГЪ-4 и ГЪ-8, снижается уровень ГЖЕу.

Проведение комплексной терапии у больных с ХГП сопровождается не только клиническим улучшением, но и нормализацией содержания в ЖДК иммуноглобулинов, снижением уровня ГЪ-4 и ГЪ-8; концентрация ГЖЕу под влиянием стандартной терапии не изменяется.

ЛИТЕРАТУРА

Грудянов А.И. Пародонтология: Избранные лекции. — М., 1997. — 32 с.

Грудянов А.И., Безрукова И.В. Быстропрогрессирующий пародонтит — кли-нико-лабораторные аспекты (предварительные результаты) // Стоматология. — 1999. — № 1. — С. 28-30.

Грудянов А.И., Безрукова И.В., Охапкина Н.Б. Быстропрогрессирующий пародонтит в молодом возрасте, протекающий на фоне хронического гепатита С, цирроза печени, железодефицитной анемии и тромбоцитопении (клиническое наблюдение) // Пародонтология. — 2000. — № 2. — С. 3-8.

Жяконис Й.М. Иммунологические аспекты гингивита и пародонтита: Автореф. дис. ... д-ра мед. наук. — М., 1986. — 44 с.

Иванюшко Т.П., Баярт Б., Ковальчук Л.В. Регуляция лимфокинами фагоцитарной активности нейтрофилов у больных с воспалительными заболеваниями пародонта // Стоматология. — 1989. — № 6. — С. 51-52.

Канканян А.П., Леонтьев В.К. Болезни пародонта. — Ереван: Тигран Мец,

1998. — 360 с.

Левин М.Я., Орехова Л.Ю., Свирина О.А. Показатели местного иммунитета полости рта у спортсменов с воспалительными заболеваниями пародонта // Пародонтология. — 2000. — № 1. — С. 19-21.

Логинова Н.К., Воложин А.И. Патофизиология пародонта: Учебно-методическое пособие. — М., 1995. — 108 с.

Модина Т.Н., Леонтьев В.К., Варакина Н.И., Молькова С.С. Функциональная активность нейтрофилов и эластазо-ингибиторная активность сыворотки крови и тканей пародонта при лимфотропном методе лечения быстропрог-рессирующего пародонтита // Стоматология. — 2001. — № 1. — С. 51-54.

Орехова Л.Ю. Иммунологические механизмы в патогенезе воспалительных заболеваний пародонта: Автореф. дис. .   д-ра мед. наук. — СПб., 1997. — 42 с.

Орехова Л.Ю., Левин М.Я., Калинин В.И. Аутоиммунные процессы при воспалительных заболеваниях пародонта // Новое в стоматологии. — 1996. —

№ 3. — С. 19-22.

Орехова Л.Ю., Левин М.Я., Оганян Э.С. Динамика иммунологических показателей ротовой полости при лечении воспалительных заболеваний паро-донта у больных инсулинзависимым сахарным диабетом // Стоматология. —

2001. — № 1. — С. 42-46.

Akiba J., Yano H., Ogasawara S. Expression and function of interieukin-8 in human hepatocellular carcinoma // Int. J. Oncol. — 2001. — Vol. 18, № 2. — P. 257-264.

Aramaki M., Nagasawa T., Koseki T., Ishikawa I. Presence of activated B-1 cells in chronic inflamed gingival tissue // J. Clin. Immunol. — 1998. — Vol. 18,

№ 6. — P. 421-429.

Bartova J., KratkaOpatrna Z., Prochazkova J. et al. Thl and Th2 cytokine profile in patients with early onset periodontitis and their healthy siblings // Mediat. Inflam. — 2000. — Vol. 9, № 2. — P. 115-120.

Brennan S., Cooper D., Sly P.D. Directed neutrophil migration to IL-8 is increased in cystic fibrosis: a study of the effect of erythromycin // Thorax. — 2001. — Vol. 56, № 1. — P. 62-64.

Conrads G., Herrler A., Moonen I. Flow cytometry to monitor phagocytosis and oxidative burst of anaerobic periodontopathogenic bacteria by human poly-morphonuclear leukocytes // J. Periodont. Res. — 1999. — Vol. 34, № 3. — P. 136-144.

Hagewald S., Bernimoulin J.P., Kottgen E., Kage A. Total IgA and Porphy-romonas gingivalis-reactive IgA in the saliva of patients with generalized early-onset periodontitis // Eur. J. Oral Sci. — 2000. — Vol. 108, № 2. — P. 147-153.

Kinane D.F., Lappin D.F., Koulouri O., Buckley A. Humoral immune responses in periodontal disease may have mucosal and systemic immune features //

Clin. Exp. Immunol. — 1999. — Vol. 115, № 3. — P. 534-541.

Lappin D.F., Macleod C.P., Kerr A. et al. Anti-inflammatory cytokine IL-10 and T cell cytokine profile in periodontitis granulation tissue // Clin. Exp. Immunol. — 2001. — Vol. 123, № 2. — P. 294-300.

Nalbant A., Zadeh H.H. Evidence for apoptosis of the majority of T cells activated in vitro with Actinobacillus actinomycetemcomitans // Oral Microbiol.

Immunol. — 2000. — Vol. 15, № 5. — P. 290-298.

Pechkovsky D.V., Zissel G., Ziegenhagen M.W. Effect of proinflammatory cytok-ines on interleukin-8 mRNA expression and protein production by isolated human alveolar epithelial cells type II in primary culture // Eur. Cytokine

Netw. — 2000. — Vol. 11, № 4. — P. 618-625.

Petit M.D.A., Wassenaar A., van der Velden U. et al. Depressed responsiveness of peripheral blood mononuclear cells to heat-shock proteins in periodontitis

patients // J. Dent. Res. — 1999. — Vol. 78, № 8. — P. 1393-1400.

Yamamoto M., Fujihashi K., Hiroi T. Molecular and cellular mechanisms for pe-riodontal diseases: role of Th1 and Th2 type cytokines in induction of mucos-al inflammation // J. Periodontal Res. — 1997. — Vol. 32, № 1 (pt 2).

P. 115-119.

Zadeh H.H., Tanavoli S., Haines D.D., Kreutzer D.L. Despite large-scale T cell

activation, only a minor subset of T cells responding in vitro to Actinobacillus actinomycetemcomitans differentiate into effector T cells // J. Periodont. Res.

— 2000. — Vol. 35, № 3. — P. 127-136.

The influence of combined therapy on Local immunity parameters in patients with

parodontics

O.V. Belyaeva, N.N. Kevorkov Institute of Ecoogy and Genetics of Microorganis, Ural Branch of the Russian Academy of Sciences, Perm

The aim of the study was to evaluate peculiarities of Local immune status in patients with chronic generalized parodontitis. IgG , IgM and IgA levels as well as these of IFN gamma, IL-4 and IL-8 were evaluated in parodontal pocket liquid. The obtained data showed, that in patients with parodontitis Th2-type of local immune response dominated. Combined therapy including medicinal, physiotherapeutic, surgical and orthopedic treatment caused the improvement of the immune system status, the levels of most of the parameters became normal. However, no changes of IFN gamma level were observed after the complex treatment. That fact may suggest that the attenuation of pro-inflammatory T-cells response is a significant event in the pathogenesis of parodontitis.

 

УДК 616.248-008.7-074-037       



загрузка...