Российский онкологический научный центр РАМН; 2ГП Институт иммунологии ФУ МБ и ЭП при МЗ РФ, Москва
Мишенью антигенспецифических рецепторов (TCR) Т-лимфоцитов, осуществляющих вспомогательные и эффекторные функции специфического клеточного иммунитета, являются молекулы главного комплекса гистосовместимости (MHC), представленные на поверхности клеток в виде комплексов с антигенными пептидами. Значительный вклад во взаимодействие TCR с комплексом молекула MHC/пептид вносят C-концевые участки а-спиралей доменов а1 и а 2 молекул MHC класса I. Контактный сайт домена а2 имеет ограниченную гомологию с Р-це- пями молекул MHC класса II, что делает его привлекательным объектом исследований, направленных на стимуляцию иммунного ответа и дизайн новых вакцин. Ранее нами показано, что введение животным мультиплетного тетрамера AA158-175 молекулы H-2Db приводит к увеличению доли периферических Т-лимфоцитов CD4+ и стимуляции ответа на слабоиммуноген- ные продукты MHC. С целью выяснения влияния подобных препаратов на процессы внутритимусной дифференцировки Т-кле- ток последовательности контактных сайтов молекул H-2Db (H-2Ld), H-2Kk и H-2Kb АА158-175 синтезировали в форме древовидных тетрамеров. Обнаружено, что однократная подкожная иммунизация тетрамерами приводила к изменению баланса внутритимусных субпопуляций Т-лимфоцитов: снижению доли клеток основного ядра тимоцитов CD4+CD8+ с одновременным увеличением доли «ярких» тимоцитов CD4+CD8+, CD4+CD810, CD4loCD8+ и CD4+CD8-, что свидетельствовало о влиянии мультиплетных пептидов на процессы внутритимус- ной дифференцировки и селекции Т-лимфоцитов. Наиболее выраженные изменения наблюдали на 3-й день после инъекции препаратов, что предшествовало появлению клеток CD4+ в периферических лимфоидных органах. Показано, что пептиды AA158-175 различных аллельных форм молекул MHC облада
ли различной способностью к стимуляции периферических Т-лимфоцитов CD4+. Наибольшая эффективность стимуляции у мышей C57B1/10 (H-2b) достигалась при применении пептида AA158-175 молекулы H-2Kk. Однократная подкожная иммунизация мышей этой линии тетрамером в дозе 100 мкг приводила к увеличению доли клеток CD4+ с повышенной экспрессией активационного маркера CD44 и сниженной экспрессией CD62L в периферических лимфоидных органах. Такие изменения в экспрессии активационных маркеров не наблюдались, если последовательность звеньев тетрамера содержалась в какой-либо из молекул MHC реципиента.
Полученные результаты свидетельствуют о возможности имитации естественных лигандов Т-клеточных рецепторов синтетическими пептидными конструкциями, что открывает перспективы создания новых и существенного повышения эффективности имеющихся вакцин, направленных на стимуляцию иммунитета к микробным и вирусным патогенам, а также антигенам злокачественно трансформированных клеток.
Данная работа выполнена при поддержке РФФИ (грант №
04-49042) и программы «Вакцины нового поколения и медицинские диагностические системы будущего».