загрузка...
 
IL-8 как сигнальная молекула повреждения клетки
Повернутись до змісту

IL-8 как сигнальная молекула повреждения клетки

Ю.В. Чалый1, Н.Н. Нашкевич1, Н.Н. Войтеноки аНИИ гематологии и переливания крови МЗ РБ, Минск; 2Фонд развития молекулярной гематологии и иммунологии, Москва

Интерлейкин 8 (IL-8) относится к СХС-семейству хемокинов и является основным хемоаттрактантом и активатором нейтро- филов. Повреждение тканей при различных заболеваниях сопровождается локальным накоплением нейтрофильных лейкоцитов. Предполагая, что IL-8 может быть пусковым медиатором воспаления, индуцируемого разнообразными неантигенными воздействиями, повреждающими клетки, мы изучили экспрессию гена IL-8 в культуре различных клеток человека под воздействием веществ, вызывающих клеточный стресс и суб- летальное повреждение. В опытах использованы перекись водорода, оксидаза глюкозы, NO-образующие соединения, агенты, приводящие к дезорганизации цитоскелета (колхицин, вин- бластин, цитохалазин В), фактор некроза опухолей a (TNF) и катионные бактерицидные белки a-дефензины HNP, выделенные из нейтрофилов человека.

Продукцию цитокинов в культуральной среде исследуемых клеточных линий изучали с помощью иммуноферментного анализа. Специфическую экспрессию мРНК определяли с помощью количественной полимеразной цепной реакции. Жизнеспособность клеток оценивали с использованием трипановой сини или [3Н]-тимидинового теста, а также с помощью МТТ-анализа.

Показано, что в присутствии Н2О2, колхицина, цитохалазина В и винбластина синтез мРНК и белка IL-8 значительно усиливался в клетках миеломоноцитарной клеточной линии THP-1, в то время как TNF не вызывал индукцию IL-8 в этих клетках. Напротив, эндотелиальные клетки пупочного канатика человека слабо отвечали на химические стимулы, однако наблюдали значительную индукцию синтеза IL-8 при добавлении TNF. В культуре клеток нейробластомы человека SK-N-SH синтез IL-8 увеличивался в присутствии перекиси водорода, колхицина, винб- ластина и TNF, тогда как индуктор NO ингибировал активацию экспрессии гена IL-8. Было показано, что соединения, имитирующие гипоксические условия, десфероксамин и C0CI2, стимулировали продукцию IL-8 клетками нейробластомы. Дефензины в концентрации 10-4 M вызывали полную гибель клеток в бессыво- роточных культурах, тогда как в субтоксичных концентрациях 1-3х10-5 M они индуцировали синтез IL-8 клетками THP-1 и эндотелия, в том числе, в присутствии сыворотки. Показано, что ингибитор тирозиновых киназ генистеин в концентрации 10 мкг/ мл предотвращал эту стимуляцию. Полученные данные позволяют предположить, что любые сублетальные повреждения клеток и воздействия, вызывающие клеточный стресс, могут приводить к индукции синтеза IL-8, что позволяет рассматривать его в качестве сигнальной молекулы клеточного повреждения. При этом реактивность на отдельные стимулы зависит от типа клеток. Вместе с тем токсические концентрации агентов, которые вызывали быструю гибель клеток, не приводили к индукции синтеза IL-8. Можно предположить, что индукция IL-8, вызванная повреждением клеток, наблюдается лишь при сохранении их относительной жизнеспособности, при которой они еще способны к синтезу мРНК и белка. Вызываемая IL-8 лейкоцитарная инфильтрация может быть фактором воспаления и последующего тканевого повреждения. Также выделение IL-8 при повреждении клеток может стимулировать антибактериальную резистентность за счет привлечения нейтрофилов и репаративную реакцию за счет известного ангиогенного действия IL-8.




загрузка...