Иммуногистохимическое исследование нормальной и злокачественных тканей щитовидной железы при помощи моноклональных антител против тиреоглобулина
А.А. Пиневич, И.Я. Руденко, О.А. Львова, В.Б. Климович,
Е.А. Залмовер, А.Ф. Романчишен
Центральный научно-исследовательский рентгено-радиологический институт МЗ РФ, С.-Петербург; Государственная медицинская педиатрическая академия МЗ РФ, С.-Петербург
Тиреоглобулин (ТГ) — йодированный белок, продуцируемый клетками щитовидной железы (ЩЖ), является предшественником тиреоидных гормонов тироксина и трийодтиронина. На молекуле ТГ обнаружено около 40 антигенных детерминант. Изменение структуры ТГ при нарушении функции ЩЖ оказывает существенное влияние на его иммунореактивность. Известно, что ТГ является маркером нормальной ткани ЩЖ и происходящих из нее дифференцированных опухолей. Таким образом, выявление ТГ в метастатических опухолях может иметь значение для определения тиреоидного происхождения опухоли. Цель настоящей работы состояла в оценке пригодности моноклональных антител (МКАТ) против ТГ для иммуногистохи- мического анализа препаратов ЩЖ человека (в норме и при патологии) и препаратов метастазов дифференцированного рака ЩЖ. Работа основана на использовании полученной ранее в лаборатории гибридомной технологии ЦНИРРИ МЗ РФ панели из 16 моноклональных антител против ТГ. Среди МКАТ, меченных изотиоцианатом флуоресцеина (ФИТЦ), были отобраны семь конъюгатов, пригодных для иммуногистохимических исследований. Эти МКАТ (1A8, 1G11, 4B12, 5E6, 5G5, 5G8 и 12G9) распознают семь различных эпитопов на молекуле ТГ. Материал ЩЖ был получен в ходе операций по поводу воспалительных или злокачественных заболеваний этого органа. Препараты фиксировали в формалине и заливали в парафин. Полученные срезы при помощи отобранных конъюгатов исследовали методом прямой иммунофлуоресценции. Были исследованы препараты ЩЖ больных аденоматозным зобом (АЗ), аутоиммунным тиреоидитом (АИТ), диффузно-токсическим зобом (ДТЗ) и людей без патологии ЩЖ. Установлено, что МКАТ 1A8, 1G11, 4B12, 5E6, 5G5, и 12G9 взаимодействуют с ТГ, локализованным в коллоиде фолликулов ЩЖ в норме и при всех исследованных патологических состояниях ЩЖ. МКАТ 5G8 распознает ТГ человека в норме, при АЗ и ДТЗ, но не распознает при АИТ. Отсутствие распознавания специфического для данного антитела эпитопа на молекуле ТГ позволяет предположить, что при данном заболевании его экспрессия менее выражена или нарушена. Также были исследованы препараты метастазов дифференцированного рака ЩЖ в лимфатические узлы. МКАТ 1A8, 1G11, 4B12, 5E6, и 5G8 взаимодействуют с ТГ, локализованным в фолликулоподобных структурах метастатических опухолей, что подтверждает их тиреоидное происхождение. МКАТ 5G5 и 12G9 не позволяют выявлять ТГ на тех же препаратах.
Таким образом, отобраны МКАТ 1A8, 1G11, 4B12, 5E6 и 5G8, позволяющие выявлять ТГ, локализованный в коллоиде фолликулов ЩЖ в норме и при всех исследованных заболеваниях ЩЖ, включая метастазы дифференцированного рака ЩЖ в лимфатические узлы. Исследование выполняется при поддержке РФФИ, грант № 01-04-49781.