загрузка...
 
Влияние хирургического стресса на уровень циркулирующих СЭ34+-гемопоэтических стволовых клеток: анализ возможные факторов мобилизации
Повернутись до змісту

Влияние хирургического стресса на уровень циркулирующих СЭ34+-гемопоэтических стволовых клеток: анализ возможные факторов мобилизации

М.А. Алиев, Н.Н. Беляев, М.Р. Рысулы, Е.А. Ахметов, А.О. Сейдалин, Т.А. Супниязова, Ю.В. Перфильева, Р.Т. Тлеулиева, Б.А. Жумабаева, А.Т. Кодасбаев, КХ. Батталова, Ж.А. Сатыбалдиева

1 Научный центр хирургии им. А.Н. Сызганова МЗ РК;

Институт молекулярной биологии и биохимии им. М.А. Айтхожина ЦБИ КН МОН РК;

Национальный центр экспертизы лекарственных средств МЗ РК, 4 ТОО «Стэмкорд», г. Алматы, Республика Казахстан

Изучали содержание гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) с фенотипом Сй34+ в периферической крови больных, подвергнувшихся хирургическим операциям различной степени тяжести, в сочетании с оценкой уровня цитокинов, специфически влияющих на функциональную активность ГСК. Обследовано 27 больных с ишемической болезнью сердца. В опытной группе больные с множественными поражениями коронарных артерий подвергались аортокоронарному шунтированию с использованием венозных трансплантатов. В контрольной группе больным проводили стентирование коронарных артерий стентами. Процедура стентирования не приводила к увеличению уровня циркулирующих ГСК. В опытной группе к моменту выписки наблюдалось достоверное увеличение количества циркулирующих ГСК в 2,9 раза и 3,5-кратное увеличение концентрации БйР-1 в крови. Уровень СМ-СБР, БСР и ИР практически не менялся у больных обеих групп на протяжении всего периода наблюдений. Уровень С-СБР после операции транзиторно повышался в 2,6 раз только в опытной группе. Предполагается, что значительная травматизация тканей, вызванная операцией аортокоронарного шунтирования, приводит уже в первый день к повышению продукции С-СБР, который, в свою очередь, стимулирует выброс ГСК из костного мозга. Совпадение максимума содержания ГСК в крови с максимумом продукции БйР-1 по времени свидетельствует о важности оси С-СБР — ГСК — поврежденная ткань — БйР-1 в регенерационном процессе в посттравматический период. (Цитокины и воспаление. 2008. Т. 7, № 2. С. 45-48.)

Ключевые слова: кардиохирургия, гемопоэтические стволовые клетки, цитокины, SDF-1.

 

 

 

Обнаружение феномена пластичности у гемопоэтических стволовых клеток (ГСК), инициировало взрыв исследовательского интереса к возможности восстановления поврежденных патологическим процессом или травмой тканей жизненно важных органов, таких как сердце, печень, легкие, спинной мозг. Ряд экспериментальных работ, проведенных на животных, доказал несомненность регенерационного потенциала ГСК, выделенных из костного мозга или мобилизованных из него с помощью колониестимулирующих факторов, и привел к появлению новой концепции восстановительной терапии поврежденных тканей, в основе которой лежит принцип соблюдения естественных механизмов клеточной репарации. Предполагаемый механизм заключается в том, что любая гибель клеток, связанная с травмой (в том числе, хирургической) или патологическим процессом, включая инфекционное и неинфекционное воспаление, инфаркт (например, вызванный ишемией), инсульт и т. п., приводит к выбросу в кровь из очага тканевого повреждения ряда факторов, обладающих мобилизующими свойствами в отношении ГСК костного мозга. ГСК покидают свою естественную нишу и перемещаются с кровотоком в область повреждения за счет хоуминга, обусловленного рядом факторов, образующихся в поврежденном участке. Наиболее изученным фактором хоуминга является хемокин SDF-1 (Stroma Derived Factor), к которому на ГСК
имеются рецепторы типа СХСИ4 [6]. В результате в очаге повреждения скапливаются ГСК, которые осуществляют репарацию поврежденной ткани. Однако экспериментальные находки нуждаются в подтверждении и, самое главное, в доказательстве существования феномена естественной клеточной репарации у человека. Важным этапом в этом процессе является изучение феномена мобилизации ГСК и механизмов хоуминга, инициированных тканевым повреждением, в частности, хирургической операцией.

Целью настоящего исследования явилось изучение содержания ГСК с фенотипом СБ34+ в периферической крови больных, подвергшихся хирургическим операциям различной степени тяжести, в сочетании с оценкой уровня цитокинов, специфически влияющих на функциональную активность ГСК.

Материалы и методы

Обследовано 27 больных с ишемической болезнью сердца (ИБС) в возрасте от 35 до 55 лет. Больше половины больных (68 %) страдали ИБС в течение 1-5 лет. К моменту обследования 78 % больных были инвалидами 1-Ш групп. Большинство пациентов (93 %) перенесли инфаркт миокарда. У восьми больных в анамнезе имелся 1 инфаркт миокарда, у трех больных — 2 и у трех больных — 3. У трех больных острый инфаркт миокарда осложнился аневризмой левого желудочка, с наличием в просвете тромба. Все больные до операции предъявляли жалобы на повторяющиеся боли за грудиной или в области сердца, купирующиеся приемом нитроглицерина. По функциональной классификации Нью-Йоркской ассоциации кардиологов ^НА),

% больных были отнесены к III функциональному классу (ФК), 6,3 % — к IV ФК, столько же процентов больных имели нестабильную стенокардию, а 38,3 % — клинику II ФК.

Операции выполняли в условиях искусственного кровообращения, комбинированной фармакохолодовой кардиоплегии и общей гипотермии при температуре 28 °С. В случаях распространенного поражения коронарных артерий использовали методику антеградного и ретроградного введения кардиопле- гического раствора.

Исследовали две группы больных, принципиально отличавшихся объемом хирургического вмешательства. В опытной группе, состоящей из 10 человек, больные подвергались аортокоронарному шунтированию. Среднее время искусственного кровообращения при этом составило 135 мин. Всем больным шунтировали от 2 до 5 коронарных артерий. При этом трем больным — в сочетании с аневризмэктомией и ремоделированием левого желудочка и одному больному — в сочетании с тромбэк- томией. Маммарокоронарное шунтирование было произведено всем десяти больным. Аортокоронарное шунтирование с венозным трансплантатом осуществляли при множественности поражения коронарных артерий (шунтирование правой коронарной артерии у 5 больных, огибающей ветви левой коронарной артерии у 6 больных, ветви тупого края у 3 больных, диагональной ветви у 3 больных). В контрольной группе (17 человек) больным проводили стентирование коронарных артерий стентами (от 1 до 4) «CYPHER» фирмы «Johnson&Johnson».

Исследовали периферическую кровь больных, взятую за день до операции, на следующий день после операции и в момент выписки из стационара (на 8-10 день). Процент содержания CD34+ клеток определяли с помощью моноклональных антител, меченых фикоэритрином, используя стандартный протокол фирмы «BD Biosciences» (Germany) и проточный цитофлуориметр FACS CaLibur. В качестве негативного дискриминирующего контроля использовали неспецифические меченые моноклональные антитела идентичного изотипа.

Цитокины определяли в сыворотке крови, используя коммерческие иммуноферментные тест-системы фирмы «IBL» (Germany) согласно рекомендациям фирмы-производителя. Определяли концентрацию LIF (Leukemia inhibitory factor), SCF (stem ceLL factor), G-CSF (granulocyte colony stimulating factor), GM-CSF (granuLocyte-monocyte colony stimulating factor). SDF-1 определяли в иммуноферментном анализе типа «сэндвич», используя стандартные методические подходы [1] по следующей схеме. Поликлональные антитела к SDF-1a («PeproTech», USA) в концентрации 3 мкг/мл иммобилизовали на полистирольном планшете («Nunc», Denmark) в карбонат-бикарбонатном буферном растворе в течение ночи при +4 °С. Блокирование неспецифического связывания проводили 0,5 % бычьим сывороточным альбумином и 0,1 % твином-20 в фосфатно-солевом буферном растворе в течение 1 ч при комнатной температуре. Образцы сыворотки крови или калибровочные растворы рекомбинантного SDF-1a («PeproTech», USA) в концентрациях от 0,08 до 20 нг/мл вносили совместно с биотинилированными поликлональными антителами к SDF-1a (1 мкг/мл) и инкубировали 2 ч при комнатной температуре. Вторые антитела выявляли полимерным конъюгатом стрептавидин — пероксидаза («Sigma», USA) в разведении 1:1000. В качестве субстрата использовали о-фе- нилендиамин («Sigma», USA).

Полученные данные обрабатывали методами математической статистики, используя прикладную программу Microsoft ExceL. Вычисляли среднюю арифметическую, среднюю квадратическую ошибку средней арифметической и достоверность различия средних (p), используя функцию ТТЕСТ.

Результаты и обсуждение

На рисунке представлены результаты определения СБ34+-клеток в динамике наблюдения. Как оказалось, исходное содержание ГСК в контрольной и опытной группах было одинаковым и составляло 0,69±0,17 и 0,65±0,12 %, соответственно. Процедура стентирования приводила к увеличению уровня циркулирующих ГСК у 60 % больных. Однако по средним значениям достоверных изменений не наблюдалось (p = 0,380). К моменту выписки из стационара у всех больных уровень ГСК возвращался к исходному состоянию. В опытной группе на следующий день после операции содержание СБ34+-клеток не отличалось от исходного уровня (p=0,183). Однако к моменту выписки наблюдалось достоверное увеличение
количества циркулирующих ГСК в 2,9 раза (р=0,048).

Исследование факторов, способных регулировать поведение ГСК, показало, что их роль в мобилизации ГСК из костного мозга не одинакова. Как видно из таблицы, уровень GM-CSF практически не изменялся у больных обеих групп на протяжении всего периода наблюдений. При этом частные значения этого показателя варьировали незначительно, что может свидетельствовать о полном отсутствии влияния операционного стресса на его уровень в периферической крови.

Иная картина наблюдалась при анализе уровня содержания SCF. Хотя достоверных различий в динамике наблюдения отмечено не было как между группами, так и внутри каждой группы, большой разброс данных внутри вариационных рядов свидетельствует об отсутствии общей закономерности изменения уровня данного цитокина в зависимости от объема проведенной хирургической операции.

При анализе содержания цитокина Ъ]Г единственное существенное изменение его уровня было отмечено в контрольной группе в момент выписки из стационара: оно выразилось в виде трехкратного снижения его концентрации по сравнению с исходным значением (р=0,005). Поскольку содержание СБ34+-клеток в эти же сроки в контрольной группе оставалось неизменным, можно заключить, что уровень Ъ]Г в периферической крови никак не модулирует мобилизацию ГСК из костного мозга. В опытной группе существенных изменений содержания Ъ]Г в динамике наблюдения не отмечалось. Поскольку в этой группе отмечалось повышение уровня ГСК в конце наблюдения, этот факт также подтверждает вывод о непричастности эндогенного Ъ]Г к мобилизации ГСК при хирургическом стрессе.

В отличие от перечисленных факторов уровень цитокина G-CSF в опытной группе после операции транзиторно повышался в 2,6 раза (р=0,044), тогда как в контрольной группе он не изменялся в динамике наблюдения. Как известно, G-CSF является сильнейшим мобилизационным фактором для ГСК и используется для этой цели в клинической практике [3]. Обращает на себя внимание тот факт, что повышение уровня мобилизационного фактора G-CSF наблюдалось в первый день после операции, а подъем уровня циркулирующих ГСК — к моменту выписки, когда уровень G-CSF снизился до исходного состояния.

Анализ уровня SDF-1 показал отсутствие различий между контрольной и опытной группой в исходном состоянии и в первый день после операции. Не было изменений в контрольной группе и в

Контроль

До операции І I После операции

Рисунок. Динамика содержания CD34+-гемопоэтических стволовых клеток в периферической крови у больных с ИБС до и после операции стентирования (контроль) или аортокоронарного шунтирования (опыт)

момент выписки из стационара. Однако в опытной группе в этот срок наблюдалось 3,5-кратное увеличение (р=0,001) концентрации SDF-1 в крови, что совпадало с повышением уровня CD34+-клеток в крови в этой же группе.

Таким образом, наши исследования показали, что хирургические операции приводят к мобилизации CD34+-ГСК/предшественников из костного мозга в периферическое кровообращение. Причем объем хирургического вмешательства играет определяющую роль в этом процессе. Ранее было показано, что хирургический стресс и высокие физические нагрузки способствуют мобилизации дендритных клеток и ГСК из костного мозга [2, 5]. Значительное повышение уровня циркулирующих ГСК отмечали при ортотопической трансплантации печени, а также при ее частичной резекции при гепатоцеллюлярной карциноме [7]. И, наконец, недавно группа польских ученых установила, что
инсульт и острый инфаркт миокарда у человека приводит к существенной мобилизации ГСК из костного мозга [8]. В наших исследованиях подъем уровня G-CSF на следующий день после операции свидетельствует о том, что именно хирургический стресс индуцирует усиление его продукции. И хотя к мобилизационным факторам относятся также GM-CSF и SCF, которые способны самостоятельно или в кооперации с другими факторами вызывать мобилизацию ГСК из костного мозга [3, 4], отсутствие изменений в их продукции в послеоперационный период может свидетельствовать об их непричастности к процессу мобилизации СБ34+-клеток при хирургическом стрессе.

Исходя из наших данных, можно предположить, что хирургический стресс приводит к транзиторному повышению продукции G-CSF, который, в свою очередь, инициирует мобилизацию из костного мозга CD34+-клеток. Причем уровень ГСК в периферической крови существенно возрастает лишь через 8-10 дней. Значительное повышение в этот же период уровня SDF-1, играющего роль фактора хоуминга для ГСК, очевидно, свидетельствует в пользу гипотезы участия ГСК в восстановлении поврежденных тканей. Полученные данные наводят на мысль о том, что с точки зрения поддержания и усиления мобилизационного процесса, индуцированного хирургической операцией, представляет интерес использование лекарственных препаратов на основе рекомбинантных колониестимулирующих факторов с целью ускорения заживления раневых поверхностей

и,       соответственно, реабилитации хирургических больных.

Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства здравоохранения Республики Казахстан в рамках научно-технической программы 0.0364.

 

 

ЛИТЕРАТУРА

 

 

 

Брэдуэлл А., Кэтти Д., Дайкс П. и др. Антитела. Методы. Кн.    2:       Пер.  с        англ.

/ Под ред. Д. Кэтти. — М.: Мир, 1991. — 384 с.

Bonsignore M.R., Morici G., Santoro A. et al. Circulating hematopoietic progenitor cells in runners // J. Appl. Physiol. — 2002. — Vol. 93, № 5. — P. 1691-1697.

Cottler-Fox M.H., Lapidot T., Petit I. et al. Stem cell mobilization // Hematology Am. Soc. Hematol. Educ. Program. — 2003. — P. 419-437.

Glaspy J.A., Shpall E.J., LeMaistre C.F. et al. Peripheral blood      progenitor cell      mo

bilization using stem cell factor in combination with filgrastim in breast cancer patients // Blood. — 1997. — Vol. 90, № 8. — P. 2939-2951.

Ho C.S., Lopez J.A., Vuckovic S. et al. Surgical and physical stress increases circulating blood dendritic cell counts independently of monocyte counts // Blood. — 2001. — Vol. 98, № 1. — P. 140-145.

Kucia M., Reca R., Miekus K. et al. Trafficking of normal stem cells and metastasis of cancer stem cells involve similar mechanisms: pivotal role of the SDF-1 — CXCR4 axis // Stem cells. — 2005. — Vol. 23, № 7. — P. 879-894.

Lemoli R.M., Catani L., Talarico S. et al. Mobilization of bone marrow-derived hematopoietic and endothelial stem cells after ortotopic liver transplantation and liver resection // Stem Cells. — 2006. — Vol. 24, № 12. — P. 2817-2825.

Paczkowska E., Larysz B., Rzeuski R. et al. Human hematopoietic stem/progenitorenriched CD34(+) cells are mobilized into peripheral blood during stress related to ischemic stroke or acute myocardial infarction // Eur. J. Haematol. — 2005. — Vol. 75, № 6. — P. 461-467.

 

 

 

The influence of surgical stress on the level of circulating CD34+ hematopoietic stem cells: analysis of possible mobilization factors

M.A. Aliev1, N.N. Belyaev, M.R. Rysuly, E.A. Akhmetov, A.O. Seidalin, T.A. Supniyazova,

Yu.V. Perfilieva, R.T. Tleulieva, B.A. Zhumabaeva, A.T. Kodasbaev, K.S. Battalova, Zh.A. Satybaldieva4 1 A.N. Syzganov Scientific Centre of Surgery Ministry of Health; 2 M.A.Aitkhozhin Institute of Molecular Biology and Biochemistry; 3 National Centre of Drug Expertise Ministry of Health, Almaty, Republic of Kazakhstan;

Stemcord Ltd.

A study of CD34+ hematopoietic stem cell (HSC) content in peripheral blood of patients, undergoing surgery operation of different heaviness in connection with cytokine level specifically influencing functional activity of HSC was the aim of the investigation. 27 patients suffering from ischemic cardiomyopathy were observed. Experimental group with multiple lesions of coronary arteries underwent coronary artery bypass grafting. Endoprosthesis replacement was carried out in control group. Surgical operation did not modify the level of HSC in control group in any period. Experimental group showed 2.9-fold increase in HSC content and SDF-1 level (3.5-fold) in peripheral blood 10 days after operation. The level of GM-CSF, SCF and LIF did not change in both groups during entire period of observation. Transitory increase in G-CSF level (2.6-fold) was only observed in the experimental group 1 day after operation. Considerable surgical trauma is suggested to increase the G-CSF production as soon as in 1 day, which in turn stimulates HSC mobilization from bone marrow. Coincidence in time of maximums of HSC content and SDF-1 production provides evidence that the axis G-CSF - HSC - injured tissue - SDF-1 is important in tissue reparation during posttraumatic period. (Cytokines and Inflammation. 2008. Vol. 7, № 2. P. 45-48.)

Key words: cardiosurgery, hematopoietic stem cells, cytokines, SDF-1.

Ц И Т О иК И Н Ы

 

© Коллектив авторов, 2008 УДК 616.517-097:612.017.1

Содержание эпидермального фактора роста у больных псориазом и атопическим дерматитом

С.Л. Кашутин, Ю.С. Дегтяр

Северный государственный медицинский университет, г. Архангельск

Представлены данные о содержании в крови больных эпидермального фактора роста (ЕСР) при обострении атопического дерматита и псориазе. Полученные результаты выявили более высокую концентрацию ЕСР при атопическом дерматите, чем при псориазе. Возможно, более выраженная активация клеточной цитотоксичности и апоптоза при псориазе имеет сдерживающий характер в отношении секреции ЕСР. (Цитокины и воспаление. 2008. Т. 7, № 2. С. 49-51.)

Ключевые слова: псориаз, атопический дерматит, эпидермальный фактор роста.

 

 

 

Изучение механизмов, направленных на сохранение клеточного гомеостаза, несомненно, представляет большой теоретический и практический интерес. Известно, что регуляция пролиферации и апоптоза происходит комплексно. Механизмы, участвующие в регуляции клеточного гомеостаза, находятся в состоянии динамического баланса: нарушение регуляции одного влечет за собой изменения регуляции другого [4]. Результатом дисбаланса процессов программированной клеточной гибели и клеточной пролиферации является формирование различных патологических состояний, одним из которых является псориаз [7]. В настоящее время псориатическая болезнь рассматривается как системное заболевание кожи, характеризующееся наличием аутоиммунного механизма повреждения при опосредованной Т-лимфоцитами повышенной пролиферации кератиноцитов, ассоциированное с генетическими и окружающими триггерными факторами [3, 8]. Морфологические изменения в очагах поражения характеризуются резко выраженным акантозом в сочетании с папилломатозом, пара- и гиперкератозом, высокой митотической активностью кера- тиноцитов [6]. В свою очередь, имеются сведения, что явления пролиферации кератиноцитов в очагах поражения, хотя и в несколько меньшей степени, наблюдаются при атопическом дерматите, в основе которого лежит ]^Е-зависимое воспаление кожи и ее гиперреактивность, нарушение естественной реакции на внешние и внутренние раздражители [1,5]. Известно, что в регуляции пролиферативной реакции кератиноцитов немаловажное значение имеет эпидермальный фактор роста (EGF). Данный ростовой фактор секретируется кератиноцитами кожи, а также активированными макрофагами, действует как сильный митоген, стимулируя пролиферацию самих же кератиноцитов и фибробластов дермы, играет важную роль в заживлении раневой поверхности и при определенных условиях может вызвать малигнизацию клеток [11, 12]. С этих позиций представляло интерес сравнительное изучение содержания эпидермального фактора роста отличных по патогенезу хронических дерматозов, таких как псориаз и атопический дерматит.

Материалы и методы

Проведено клинико-иммунологическое обследование 58 практически здоровых лиц (43 женщины и 15 мужчин), 60 человек с атопическим дерматитом в стадии обострения (32 женщины и

мужчин) и 80 человек с псориазом в прогрессивной и стационарной стадиях (34 женщины и 46 мужчин). Возраст обследуемых колебался от 20 до 60 лет. Длительность заболевания составила от

года до 10 лет. Диагноз основывался на комплексе анамнестических, клинических и лабораторных данных. Венозную кровь для исследования брали утром натощак. Субпопуляции Т-лимфоцитов определяли методом непрямой иммунопероксидазной реакции с использованием моноклональных антител на препаратах лимфоцитов типа «высушенной капли» производства Онкологического центра (г. Москва) и НПО «ДиагноТех» (г. Новгород). Определяли следующие фенотипы: CD5+, СйЭ + , CD4+, Сй8+, CD16+, Сй10+,

 

EGF при псориазе и атопическом дерматите

 

 

 

CD71+, CD25+, HLADR+, CD22+, Сй95+. Содержание EGF, TNFa, IL-2, трансферрина в периферической крови определяли на фотометре «Мультискан» МСС 340. Полученные результаты обрабатывали с помощью компьютерных пакетов программ 51ай'$1:1'са. Достоверность вычисляли по критерию Стьюдента. Данные сведены в таблице и представлены в виде М ± т.

Результаты и обсуждение

Содержание EGF (рис.) при изучаемых нозологиях выше уровня, наблюдаемого у практически здоровых лиц, с той разницей, что при обострении атопического дерматита регистрируется более значительное увеличение EGF (407,92 ± 34,83 против 165,71 ± 31,18 пг/мл; p < 0,01), чем при псориазе, при котором имеется всего лишь тенденция к увеличению (206,34 ± 31,70 против 165,71 ± 31,18 пг/мл). Только в одном случае — у пациента с псориатической арт- ропатией (подобную клиническую форму наблюдали у трех пациентов) — содержание эпидермального фактора роста составило 3087 пг/мл. Полученные результаты стали несколько неожиданными, поскольку данный ростовой фактор секретируется кератиноцитами кожи. В патогенезе представленных дерматозов наибольшая пролиферативная активность кератиноцитов регистрируется при псориазе, поэтому значительно повышенный уровень эпидермального фактора роста должен был бы наблюдаться именно при псориазе, но не при атопическом дерматите. Следовательно, имеются условия, при которых уровень изучаемого цитокина, несмотря на высокую пролиферативную активность кератиноцитов, сравнительно низок. С этих позиций представляло интерес выявление отличий в содержании фенотипов лимфоцитов при данных нозологиях. Содержание лимфоцитов с фенотипом CD5+при данных хронических дерматозах довольно высокое, особенно у больных с атопическим дерматитом (1,13 ± 0,09 х 109 против 0,61 ± 0,04 х 109 кл/л; p < 0,01). При этом же заболевании концентрация функционально активных Т-лимфоцитов также достоверно увеличена (с 0,61 ± 0,05 х 109 до 0,91 ± 0,08 х 109 кл/л; p < 0,01), а при псориазе наблюдается лишь тенденция к повышению (до 0,69 ± 0,08 х 109 кл/л). Превышение верхней границы физиологической нормы числа лимфоцитов с рецептором CD4 выявлено только при псориазе (0,93 ± 0,08 х 109 против 0,51 ± 0,02 х 109 кл/л; p < 0,01). Уровень цитотоксических Т-лимфоцитов практически одинаков и выше норматива при изучаемых нозологиях. Содержание естественных киллеров заметно снижено при атопическом дерматите (с 0,61 ± 0,06 х 109 до 0,31 ± 0,03 х 109 кл/л; p < 0,01). Наличие псориатических высыпных элементов на коже, наоборот, сопровождается тенденцией к увеличению лимфоцитов с фенотипом CD16 + (с 0,61 ± 0,06 х 109 до 0,68 ± 0,09 х 109 кл/л). Содержание клеток, экспрессирующих рецептор к интерлейки-

Таблица

Удержание фенотипов лимфоцитов в периферической крови больных псориазом, больных атопическим дерматитом и практически здоровых лиц, M ± т

Примечание. Достоверность различий с практически здоровыми: * — р < 0,05, ** — р < 0,01.

Уровень клеток с рецепторами к трансферрину снижен при псориазе (с 0,63 ± 0,06 х 109 до 0,46 ± 0,02 х 109 кл/л; p < 0,01), а при атопическом дерматите, наоборот, увеличен (с 0,63 ± 0,06 х 109 до 0,85 ± 0,07 х 109 кл/л; p < 0,01). При псориазе заметно нарастает содержание клеток с антигенами главного комплекса гистосовместимости класса II (с 0,51 ± 0,03 х 109 до 0,73 ± 0,05 х 109 кл/л; p < 0,01), тогда как при атопическом дерматите, наоборот, регистрируется снижение (с 0,51 ± 0,03 х 109 до 0,42 ± 0,02 х 109 кл/л; p < 0,05). Содержание CD10+-лим- фоцитов, способных к пролиферации, заметно увеличено только при псориазе (с 0,33 ± 0,05 х 109 до

 

 

 

74 ± 0,02 х 109 кл/л; p < 0,01). При атопическом дерматите концентрация указанных клеток сопоставима с уровнем практически здоровых людей. В отношении концентрации В-лимфоцитов существенных изменений не выявлено. При псориазе регистрируется наибольший уровень клеток, имеющих рецептор CD95 (1,21 ± 0,08 х 109 против 0,65 ± 0,06 х 109 кл/л; p < 0,01), тогда как при атопическом дерматите содержание лимфоцитов с данным фенотипом имеет тенденцию к снижению (0,56 ± 0,06 х 109 кл/л). Таким образом, высокий уровень содержания эпидермального фактора роста в крови больных атопическим дерматитом сопровождается увеличением концентрации функционально активных Т-лимфоцитов и активацией иммунокомпетентных клеток, реализуемой через трансферринзависимый механизм, а также снижением экспрессии рецепторов главного комплекса гистосовместимости класса II, уровня естественных киллеров и клеток с рецептором CD95. В отличие от атопического дерматита, при псориазе имеется увеличение концентрации естественных киллеров, Т-хелперов. Активация иммунокомпетентных клеток, в основном, опосредована через антигены главного комплекса гистосовместимости класса II и не связана с трансферринзависимым механизмом. Подавление экспрессии на лимфоцитах рецепторов к IL-2 при псориазе более значительно, чем при атопическом дерматите, а уровень клеток с рецептором CD95 чрезмерно высок. Кроме того, при псориазе нами выявлено статистически значимое увеличение в содержании как TNFa (0,93 ± 0,19 нг/мл; p < 0,05), так и IL-2 (3,31 ± 0,67 нг/мл; p < 0,05). Учитывая высокий уровень содержания у больных псориазом клеток с рецептором CD95, концентрации TNFa, а также количества цитотоксических Т-лимфоцитов, естественных киллеров, можно полагать, что сдерживающим механизмом высокой пролиферативной активности кератиноцитов является активация апоптоза [9, 13]. Возможно, именно этот механизм регуляции клеточного гомеостаза при псориазе является сдерживающим фактором для высокой секреции эпидермального фактора роста. Кроме того, вероятным механизмом регуляции активности пролиферативного процесса при псориазе, с одной стороны, может быть снижение в крови концентрации СD71+-клеток. Известно, что трансферрин поддерживает клеточную пролиферацию, а блокада рецепторов к трансферрину в трансферринзави- симых клетках индуцирует апоптоз [10]. С другой стороны, увеличение содержания IL-2 влечет за собой снижение активности рецепторов к данному цитокину в результате регуляции по типу обратной связи, что также, вероятно, имеет сдерживающий характер в отношении активности пролиферации. ^учаи взаимосвязанного увеличения содержания в крови (г = 0,68) концентраций IL-2 и клеток CD25+мы считаем неблагоприятными, что находит отражение в картине заболевания: клинические проявления более выражены и трудно поддаются лечению. Таким образом, в отличие от атопического дерматита при псориазе более выраженная активация клеточной цитотоксичности, апоптоза оказывает сдерживающий характер в отношении секреции эпидермального фактора роста.

 

 

 

ЛИТЕРАТУРА

 

 

 

Цыган В.Н., Булавин Д.В., Марьянович А.Т., Пахомов Е.Ю. Роль апоптоза в патогенезе и лечении заболеваний // Программированная клеточная гибель / Под ред. проф. В.С. Новикова. — СПб.: Наука, 1996. — С. 120-135.

Gudjonsson J.E., Jonhnston A., Sigmundsdottir H., Valdimarsson H. Immunopathogenic mechanisms in psoriasis // Clin. Exp. Immunol. — 2004. — Vol. 135, № 1. — P. 1-8.

Kiyono H., Kitamura K., Kurita T., McGhee J.R. T-cell networks for regulation of the mucosal immune system. // Ann. Sclavo. Collana Monogr. — 1986. — Vol. 3, № 1-2. — P. 65-76.

Neckers L.M. Transferrin receptors regulate proliferation of normal and malignant B cells // Curr. Top. Microbiol. Immunol. — 1984. — Vol. 113. — P. 62-68.

Voitenok N.N., Varivotskaya N.V. T cell growth factor production and protein synthesis // Scand. J. Immunol. — 1984. — Vol. 19, № 4. — P. 353-358.

Witte O.N. Steel locus defines new multipotent growth factor // Cell. — 1990. — Vol. 63, № 1. — P. 5-6.

Warren H.S., Smyth M.J. NK cells apoptosis // Immunol. Cell Biol. — 1999. Vol. 77, № 1. — P. 64-75.

 

 

 

The levels of epidermal growth factor in patients with psoriatic disease and atopic dermatitis

S.L. Kashutin, U.S. Degtyar Northern State Medical University, Arkhangelsk

The data on the blood levels of epidermal growth factor (EGF) in acute stage of atopic dermatitis and psoriasis are presented. Significantly higher concentrations of EGF were revealed in atopic dermatitis than in psoriasis. Low EGF secretion in psoriasis seems to be a result of elevated cell cytotoxicity and apoptosis. (Cytokines and Inflammation. 2008. Vol. 7, № 2. P. 49-51.)

Key words: psoriasis, atopic dermatitis, epidermal growth factor.

 



загрузка...