загрузка...
 
Значение цитокинов в патогенезе хронического гастродуоденита у детей дошкольного возраста Е.А. Галова ФГУ «НИИ детской гастроэнтерологии Росмедтехнологии», Нижний Новгород
Повернутись до змісту

Значение цитокинов в патогенезе хронического гастродуоденита у детей дошкольного возраста Е.А. Галова ФГУ «НИИ детской гастроэнтерологии Росмедтехнологии», Нижний Новгород

Для исследования роли цитокинов в развитии хронического гастродуоденита (ХГД) у детей дошкольного возраста обследовано 49 больных и 14 здоровых (контрольная группа) в возрасте 4-7 лет.

Содержание цитокинов IL-ip, TNFa и IL-4 определяли в тощаковой порции желудочного сока. Установлены тесные корреляционные связи между содержанием цитокинов в желудочном соке и клинико-морфологическими особенностями хронического гастродуоденита у дошкольников. (Цитокины и воспаление. 2008. Т. 7, № 1. С. 48-51.)

Ключевые слова: цитокины, хронический гастродуоденит, гастрит, дети.

Немногочисленные исследования по проблеме хронических воспалительных заболеваний же­лудка и двенадцатиперстной кишки (ДПК) у детей младшей возрастной группы свидетельствуют об их этиологической неоднородности и патогенети­ческой многофакторности, ранней манифестации, хронизации, склонности к рецидивированию и недостаточной эффективности терапии [1, 6, 11].

Ведущая роль в формировании хронического гастродуоденита (ХГД) у дошкольников отводится иммунологическим механизмам [8].

Цитокины, являясь начальным звеном актива­ции иммунного ответа, определяют эффективность и тип иммунного реагирования на инфекционные и неинфекционные агенты, принимают непосред­ственное участие в регуляции иммунологической защиты [2, 3, 12].

Имеющиеся единичные литературные данные, посвященные проблеме про- и противовоспа­лительных цитокинов при гастродуоденальной патологии у детей, касаются их определения в сыворотке крови [4, 7, 10]. Между тем, цитокины, в первую очередь, регулируют развитие местных воспалительных, иммунных реакций в тканях. Можно полагать, что оценка особенностей изме­нения цитокинового профиля пищеварительных секретов непосредственно в очаге воспаления в значительно большей степени будет отражать ха­рактер, выраженность воспаления, ориентировать в отношении типа иммунопатологической реакции и уровня местной специфической и неспецифичес­кой защиты.

Цель работы состояла в изучении содержа­ния про- и противовоспалительных цитокинов в тощаковой порции желудочного сока у детей дошкольного возраста при ХГД и установить их диагностическое значение.

Материалы и методы

Обследовано 63 ребенка в возрасте 4-7 лет, 49 — с ХГД, 14 — без такового (группа сравнения, контроля). Диагноз основ­ного заболевания верифицирован с помощью эндоскопического,гистологического исследований, с бактериоскопией слизистой оболочки (СО) антрального отдела желудка на H. pylori. У части детей (30) проведен морфометрический анализ биоптата слизис­той оболочки желудка (СОЖ). Определение уровня провоспали- тельных цитокинов IL-1?, TNFa и противовоспалительного IL-4 в тощаковой порции желудочного сока, после нейтрализации его с помощью NaHCO3, проводили с помощью тест-системы ООО «Протеиновый контур» (Санкт-Петербург, Россия) твердофаз­ным иммуноферментным методом.

Статистическую обработку полученных данных проводили с применением интегрированного пакета прикладных программ Statistica 6.0 for Windows XP, в соответствии с общепринятыми методами медицинской статистики. Оценку корреляционных свя­зей осуществляли методом Гамма (С)-корреляции. Проверку нор­мальности распределения проводили методом Шапиро — Уилка. Нулевые гипотезы отвергали при достигнутом уровне значимос­ти соответствующего статистического критерия р < 0,05.

Результаты и обсуждение

На момент обследования длительность основного заболевания у больных составила от 6 месяцев до 3 лет. У 60 % детей продолжительность болезни отмечалась менее 1 года, у 30 % — 1-2 года, у 10 % — более 2 лет. ХГД в фазе обострения име­ли 28 % обследованных, в неполной клинической ремиссии — 72 %. Инфицирование СОЖ H. pylori, по данным морфологического метода, зарегист­рировано в 57 % случаев (28 человек). По данным фиброгастродуоденоскопии, преобладало сочетанное поражение СОЖ и ДПК (76 %) над изоли­рованным гастритом (4 %, р = 0,0001) и дуоденитом (20 %, р = 0,0001). Наиболее часто отмечали наличие воспалительных изменений в СО антрального отдела желудка (73 %), ДПК (87 %) и луковицы ДПК (73 %). Реже (38 %) в патологический процесс вовлекалась СО тела желудка. Воспаление носило преимущественно эритематозно-экссудативный характер: тело желудка (82,5 %), антрум (55 %), СО ДПК (87 %) и луковица ДПК (61 %). Реже встре­чались узловатая эрозивная формы поражения СО: в теле желудка — 15 %/0 %; в антральном отделе — 28 %/17 %; ДПК — 14 %/0 %; луковице ДПК — 26 %/2 %.

Проведенное гистологическое исследование выявило преимущественно поверхностный гастрит (86 %) в теле желудка, в антральном отделе наряду с поверхностными формами (60 %) в 40 % случаев зарегистрирован диффузный гастрит. В ДПК у 65 % больных имел место диффузный дуоденит. В 30 % обнаруживали активный фундальный гастрит, в 40 % — антральный, и наибольшую частоту актив­ного воспалительного процесса регистрировали в ДПК (50 %).

Данные морфометрического анализа свиде­тельствовали о наличии хронического гастрита различной степени выраженности. Плотность

лимфоплазмоцитарного инфильтрата прямо кор­релировала с лейкоцитарной инфильтрацией, от­ражающей активность воспалительного процесса (g = 0,8, р = 0,0001).

Абсолютные уровни провоспалительных ци- токинов в желудочном соке имели значительные колебания: IL-1? — в пределах 5,0-533,0 пг/мл, TNFa — 13,8-321,5 пг/мл и достоверно отличались от показателей в группе сравнения (контроля) — р = 0,0002, р = 0,0323, соответственно.

Наиболее часто при ХГД у дошкольников выяв­ляли увеличение содержания IL-1? (78 %). TNFa имел повышенные значения лишь в 47 % (р = 0,0020) случаев.

Уровни провоспалительных цитокинов (IL-1? и TNFa) зависели от характера эндоскопических, гистологических изменений и наличия H. pylori в СОЖ. Так, установлены корреляционные связи между TNFa и эндоскопической формой гастри­та (от эритематозного и/или экссудативного до эрозивного: G = 0,5, p = 0,035), тяжестью воспа­лительного процесса по данным гистологического исследования (от поверхностного к диффузному: G = 0,6, р = 0,024) и наличием инфицирования СОЖ H. pylori (G = 0,8, p = 0,002). Наивысшие значения TNFa (80,0 ± 10,99 пг/мл, р = 0,0001) обнаруживали при наличии в СО микроэрозий и микроабсцессов.

Установлена прямая зависимость TNFa от об­щей клеточной плотности инфильтрата (G = 0,4, p = 0,045), количества макрофагов (G = 0,7, р = 0,0001) и фиброцитов (G = 0,5, p = 0,025). Уро­вень IL-1? коррелировал с морфометрическими показателями активности воспалительного про­цесса: нейтрофильной (G = 0,9, p = 0,016) и эозинофильной инфильтрацией (G = 0,5, p = 0,016) и также с наличием H. pylori в СО антрального отде­ла желудка (G = 0,4, p = 0,023). Антигены H. pylori, проникая через базальную мембрану, активируют макрофаги собственной пластинки. В ответ на это полиморфноядерные лейкоциты, макрофаги, мо­ноциты продуцируют в большом количестве про- воспалительные цитокины, которые активируют дифференцировку Т- и В-лимфоцитов. Эти клетки распознают и уничтожают H. pylori. IL-1? выде­ляется при антигенной стимуляции моноцитами, макрофагами, эндотелиальными, эпителиальны­ми клетками, нейтрофилами, В-лимфоцитами. IL-1? (в отличие от IL-1a, большая часть которого остается внутри клетки или связана с мембраной) осуществляет свое местное и системное действие. TNFa медиирует местную реакцию Шварцмана на микробные липополисахариды, обладает про­тивоопухолевой и противовирусной активностью [5]. Таким образом, на начальных этапах бакте­риального (геликобактерного) воспаления TNFa, вероятно, может рассматриваться как защитный фактор. Однако в дальнейшем продолжающаяся гиперпродукция TNFa активированными мак­рофагами оказывает повреждающее действие на клетки эпителия. Установлена прямая зави­симость между значениями TNFa и тяжестью поражения СОЖ по данным гистологического исследования (G = 0,9, р = 0,0014) у детей с ХГД, ассоциированным с H. pylori.

Абсолютные показатели IL-4 в желудочном соке колебались в менее значительных пределах: 11,1-32,60 пг/мл, при этом повышение его по срав­нению с уровнем в контрольной группе отмечалось лишь у 56 % обследованных. Установлена прямая зависимость между содержанием IL-4 в тощако- вой порции желудочного сока и плазмоцитарным инфильтратом в СОЖ: содержанием юных (G = 0,9, р = 0,043) и зрелых плазмоцитов (G = 0,8, р = 0,036) и показателями активности воспалительного процес­са: количеством нейтрофильных (G = 0,9, р = 0,004) и эозинофильных гранулоцитов (G = 0,8, р = 0,044). Обратная корреляционная связь определялась между уровнем IL-4 и плотностью в клеточном инфильтрате фибробластов (G = - 0,8, р = 0,038) и фиброцитов (G = - 0,6, р = 0,008).

IL-4 является медиатором, необходимым для терминальной дифференцировки В-лимфоци- тов в IgA-продуценты. Под влиянием того же цитокина происходит переключение синтеза низкоафинного IgM на высокоафинный IgA [9]. Возможно, отсутствие повышения его у 44 % обследованных может являться маркером сни­женной иммунологической защиты СО желудоч­но-кишечного тракта.

Проведен анализ содержания IL-4 в желудоч­ном соке в зависимости от давности ХГД (на мо­мент поступления) и характера его течения (при наблюдении за больными в катамнезе до двух лет). Пациенты (47 человек) были разделены на группы в зависимости от длительности болезни по призна­ку: обратились впервые или больны 6 и менее ме­сяцев (группа I — 33 ребенка) или ранее получали обследование и лечение по поводу хронического гастродуоденита (группа II — 14 больных). Выяв­лена отрицательная корреляционная связь между давностью болезни и содержанием IL-4 (G = - 0,6, р = 0,0068). У 28 пациентов удалось проследить характер течения болезни на протяжении 2-х лет. Катамнестическое наблюдение проведено в сроки 6, 12 и 18-24 месяцев. 10 больных (группа I) имела благоприятное течение болезни, 18 (груп­па II) — неблагоприятное. За благоприятное тече­ние ХГД принимали отсутствие прогрессирования воспаления в гастродуоденальной СО по данным фиброгастродуоденоскопии и гистологического исследования (уменьшение активности воспа­лительного процесса, выявление поверхностных форм против диффузных, установленных ранее, элиминация H. pylori). Неблагоприятное течение хронического гастродуоденита диагностировали в случае нарастания распространенности вос­палительного процесса в гастродуоденальной СО и утяжеление его эндоскопической формы (гиперпластический, эрозивный, язвенный, суб- атрофический) и отрицательную динамику со стороны гистологической картины (диффузное поражение или с явлениями субатрофии против поверхностного, нарастание активности воспа­лительного процесса и степени обсемененности H. pylori). Зависимость между содержанием IL-4 и характером течения болезни была обратной: G = - 0,4, р = 0,045.

В фазе обострения хронического гастродуоде- нита имелось достоверное повышение уровней провоспалительных цитокинов (IL-1?, TNFa) по сравнению с показателями у детей с неизменен­ной гастродуоденальной СО: 79,54 ± 21,85 пг/мл, р = 0,0003; 39,74 ± 5,22 пг/мл, р = 0,049 соответ­ственно. В фазе неполной клинической ремиссии ХГД содержание IL-1? и TNFa снижалось, однако оставалось повышенным по сравнению с таковыми в группе контроля: 45,20 ± 6,69 пг/мл, р = 0,0043, 49,12 ± 11,59 пг/мл, р = 0,0490 пг/мл. Среднее зна­чение IL-4 практически не изменялось.

Достоверных отличий в содержании изучаемых цитокинов при ХГД между группой с обострени­ем и группой с неполной клинической ремиссией не выявлено, что, возможно, свидетельствует о стойкости иммунных нарушений в СОЖ по мере течения воспалительного процесса.

Таким образом, уровень провоспалительных цитокинов (IL-1? и TNFa) в желудочном соке отражает активность, характер и выраженность воспалительного процесса в слизистой оболочке желудка. IL-4 отражает состояние местной им­мунологической защиты слизистой оболочки и низкий его уровень сопряжен с прогрессирующим течением хронического гастродуоденита.

ЛИТЕРАТУРА

Дублина Е.С. Динамика клинической симптоматики хронического гастродуоденита в детском возрасте: Автореф. дисс. ... канд. мед. наук. — Хабаровск,2002. — 23 с.

Дубцова Е.А. Содержание и прогностическое значение интерлйкинов при язвенной болезни двенадцатиперстной кишки: Автореф. дисс. ... канд. мед.наук. — Москва, 2003. — 24с.

Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Цитокины мононуклеарных фагоцитов в регуляции воспаления и иммунитета // Иммунология. — 1995. — № 3. — С. 30-44.

Кильдиярова Р.Р., Шараев П.Н. Показатели обмена коллагена и фактор некроза опухоли человека у детей с хроническим гастродуоденитами // Педиатрия. — 2000. — № 2. — С. 48-50.

Кононов А.В. Местный иммунный ответ на инфекцию Helicobacter py­lori // Росс. ж. гастроэнтерол. гепатол. колопроктол. — 1999. — Т. IX, № 2. — С. 15-21.

Лаврова А.Е. Дефицит микронутриентов у детей с хроническим гастродуоде- нитом (факторы риска, особенности клинического течения, принципы про­филактики и коррекции): Автореф. дисс. ... докт. мед. наук. — Н. Новгород, 2007. — 41 с.

Цитокиновое звено иммунитета при заболеваниях желудочно-кишечного тракта у детей / И.В. Маянская и др. // Ремедиум Приволжье. Гастроэнтеро­логия. — 200б. — Апрель. — С. 200-201.

Сазанова Н.Е. Механизмы формирования и клинические варианты хро­нических заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки у детей

дошкольного возраста: Автореф. дисс. ... докт. мед. наук. — Н. Новгород,

— 42 с.

Хаитов Р.М., Пинегин Б.В. Иммунная система желудочно-кишечного тракта: особенности строения и функционирования в норме и патологии // Иммуно­логия. — 1997. — № 5. — С. 4-7.

Щербак В.А., Витковский Ю.А. Значение цитокинов в патогенезе хрони­ческого гастродуоденита, ассоциированного с Н. pylori, у детей // Педиат­рия. — 2005. — № 5. — С. 11-13.

Щербаков П.Л. Вопросы педиатрической гастроэнтерологии // Росс. мед. ж. — Т. 11, № 3. — С. 107-113.

Ярилин А.А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и при патологии // Иммунология. — 1997. — № 5. — С. 7-13.

The role of cytokines in pathogenesis of chronic gastroduodenitis in children

E.A. Galova

Federal State Institution «The Nizhniy Novgorod Scientific Research Institute of Children's Gastroenterology of Russian Ministry of Health», Nizhniy Novgorod Authors have examined 49 patients with chronic gastroduodenitis (CGD) and 14 4-7 years old healthy children as a control group in order to study the role of cytokines in CGD. Patients with CGD had increased levels of pro-inflammatory cytokines (IL-ip, TNFa) and anti-inflammatory cytokine IL-4 in gastric juice compared with controls. CGD patients showed positive correlation between cytokines level and phase of disease and activity of gastritis. The significant increase of TNFa and IL-4 levels in CGD was associated with Helicobacter pylori infection. (Cytokines and Inflammation. 2008. Vol. 7, № 1. P. 48-51.)

Key words: cytokines, chronic gastroduodenitis, gastritis, children.



загрузка...