загрузка...
 
Динамика изменения активности цитокинови функций нейтрофилов в крови крыс после термического ожога кожи В.И. Коненков, О.П. Макарова, Н.П. Бгатова, И.Г. Ракова
Повернутись до змісту

Динамика изменения активности цитокинови функций нейтрофилов в крови крыс после термического ожога кожи В.И. Коненков, О.П. Макарова, Н.П. Бгатова, И.Г. Ракова

ГУ НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН, г. Новосибирск

Проведено исследование сывороточного уровня IL-1?, TNF?, IL-2, IL-4 и функций нейтрофилов (Нф) в крови крыс Вистар в норме и после термического ожога кожи степени 3А (10 % поверхности тела). Концентрацию цитокинов определяли проточной иммунофлюориметрией с использованием тест-системы «Bio-Rad», функциональное состояние Нф — по фагоцитозу убитых S. aureus и восстановлению НСТ до и после стимуляции продигиозаном или убитыми S. aureus. В течение первой недели обнаружено снижение уровня IL-1?, IL-2 и TNF? и выраженное увеличение (в 2,2 раза) концентрации IL-4. Процент фагоцитирующих Нф снижался в 1,4 раза. Повышенный окислительный метаболизм Нф наблюдали только на 3-и сутки. В течение второй недели происходило восстановление фагоцитарной и снижение биоцидной функции Нф, что сочеталось со снижением способности Нф отвечать на стимуляцию продигиозаном и S. aureus. Повышение провоспалительных цитокинов IL-1?, TNF? наблюдали к 30-м суткам. Таким образом, выявлено двухфазное изменение активности цитокинов с различной биологической активностью и функций Нф. (Цитокины и воспаление. 2007. Т. 6, № 3. С. 57–62.)

Ключевые слова: ожог кожи, цитокины, нейтрофилы, НСТ-тест, фагоцитоз.Функциональное состояние нейтрофилов во многом определяет прогноз как местного раневого процесса при ожоге кожи, так и течение ожоговой болезни при обширных поражениях в целом [7]. Термическое повреждение кожи часто сопровож-дается угнетением функций фагоцитарных систем организма, активно участвующих в формировании защитной воспалительной реакции. В то же время именно нейтрофилы, обладая высоким провоспалительным потенциалом, способны провоцировать развитие системного воспалительного ответа при ожоговой травме [4]. На функциональное состояние нейтрофильных лейкоцитов и их готовность к реа-гированию на бактериальные стимулы оказывают существенное влияние продукты активированных иммунных клеток — цитокины [3]. В зависимости от характера воздействия на воспалительный процесс цитокины подразделяются на провоспалительные (IL-1?, IL-6, IL-8, TNF?, IFN?) и противовоспалительные (IL-2, IL-4, IL-10, TGF?) [4, 6]. Исследований, посвященных комплексному изучению реактивности этих клеток и продукции цитокинов на всем протяжении воспалительного процесса после ожога кожи, проведено недостаточно. В связи с этим целью данного исследования явилось одновременное изучение динамических изменений активности цитокинов – IL-1?, TNF?, IL-2, IL-4 и функционального состояния нейтрофилов по поглотительной и биоцидной активности, а также по изменению кислородного метаболизма после стимуляции при развитии воспаления после термического ожога.

Материалы и методы

В эксперименте использовали 29 крыс-самцов породы Вистар массой 180–200 г. питомника «Рассвет» (г. Томск). Работу с животными проводили в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных». Под эфирным наркозом крысам выбривали участок кожи в грудопо-ясничной области и наносили ожог диаметром 2 см с помощью специально разработанного устройства, путем подачи водяного пара в течение 5 сек. У животных развивалась ожоговая рана кожи 3А степени, занимающая 10 % поверхности тела. Контролем служили интактные животные. Развитие воспалительной реакции в ответ на термическое повреждение документировалось морфологическими исследованиями раневой поверхности кожи. Образцы кожи фиксировали в 1%-ном растворе ОsО4 на спирте возрастающей концентрации и заключали в эпон. Из полученных блоков готовили полутонкие срезы толщиной 1 мкм,фосфатном буфере (pH 7,4) [13], дегидратировали в этиловом окрашивали толуидиновым голубым, изучали под световым микроскопом.

Концентрацию цитокинов IL-1?, IL-2, IL-4, TNF? в сыворотке крови оценивали методом проточной иммунофлюориметрии на 2-х лучевом лазерном автоматизированном анализаторе (Bio-Plex Protein Assay System, Bio-Rad, USA). Сыворотку крови крыс получали через 3, 7, 15 и 30 суток после нанесения ожога. Образцы сыворотки для анализа быстро замораживали и хранили при – 70°С. Перед исследованием образцы сыворотки размораживали и фильтровали через одноразовые нитроцеллюлозные фильтры с порами 0,4 нм в диаметре. Для исследования концентрации цитокинов в 50 мкл образца использовали коммерческую тестсистему фирмы «Bio-Rad» (USA) в соответствии с инструкцией фирмы-производителя. Для расчета концентрации исследуемых цитокинов использовали стандартные калибровочные разведения и программное обеспечение, поставляемое фирмой Bio-Rad (Bio-Plex Manager версии 3.0). Данные представлены в пг/мл. Для оценки степени эндогенной интоксикации использовали метод определения средних молекул в сыворотке крови экспе- риментальных животных. «Средние молекулы» представляют собой гетерогенный континуум веществ в основном пептидной природы, молекулярная масса которых колеблется в диапазоне 300–5000 Да. Определение концентрации молекул средней массы проводили по методу, предложенному И.И. Габриелян и др. [1].Оценку кислород-зависимой биоцидности нейтрофильных лейкоцитов и способности их к фагоцитозу выполняли по методам, описанным Д.Н. Маянским и др. [5]. Забор крови у экспериментальных животных производили при обрезании кончика хвоста под эфирным наркозом. Кислород-зависимую биоцидность нейтрофилов крови определяли в НСТ-тесте, в спонтанном и индуцированном вариантах. В качестве стимуляторов применяли продигиозан —  липополисахаридный  комплекс, выделенный из непатогенного микроорганизма B. prodigiosum («Мосхимфармпрепараты», Россия), и убитые бактерии S. aureus (Харьковское предприятие по производству бактерийных препаратов, Украина). Фагоцитарную активность нейтрофилов оценивали по способности поглощать убитые бактерии S. aureus. Статистическую обработку результатов проводили с применением пакета статистических программ Statistica 6.0.

Результаты и обсуждение

Морфологическое исследование показало, что термическое повреждение кожи приводило к развитию коагуляционного некроза эпидермиса и дермы. Через 3-е сут после ожога образовывался плотный ожоговый наличие воспалительной инфильтрации, стаз эритроцитов в кровеносных капиллярах (рис. 1а, б). Лимфатические капилляры образовывали петли, их просветы были значительно расширены и заполнены электронноплотным содержимым (рис. 1в). В структуре нейтрофилов и макрофагов отмечали значительное накопление лизосомаль-ных структур (рис. 1г). Максимальное развитие воспалительной реакции, определяемое по содержанию воспалительного инфильтрата, определяли на 15-е сут после ожога (рис. 1д). Снижение интенсивности воспалительного процесса и развитие грануляционной ткани у животных развивалось на 20-е сут после ожога, а полная эпителизация раневой поверхности наступала к 42-м сут эксперимента (рис. 1е).

 

 Рис. 1. Структурные изменения кожи в различные сроки после термического ожога

а) структура интактной кожи. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 10 ? 25;

б) коагуляционный некроз эпидермиса и дермы через 1 сут после термического ожога кожи.Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 10 ? 25;

в) накопление электронноплотного содержимого в просвете  лимфатического капилляра.Увеличение ? 8000;

г) увеличение размеров вторичных лизосом в цитоплазме нейтрофилов и макрофага. Увеличение ? 6000;

д) воспалительный инфильтрат под ожоговым струпом через 15 суток после термического ожога кожи. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 10 ? 16;

е) эпителизация раневой поверхности кожи через 42 суток после термической травмы.Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение 10 ?  16.

Глубокое нарушение структуры кожи после термического ожога приводило к инициации воспаления и к изменению продукции цитокинов, ока зывающих плейотропные биологические эффекты на различные типы клеток и участвующих в формировании и регуляции защитных реакций организма. В норме у крыс Вистар концентрация IL-1? в сыворотке крови варьировала от 0,41 до 3,03, IL-2 — от 37,68 до 185,83, IL-4 — от 2,02 до 15,08 и TNF? —  от 36,86 до 42,71 пг/мл. Распределение показателей в вариационных рядах для всех типов цитокинов согласно критерию Шапиро — Уилкса было нормальным (IL-1? — W = 0,91; p = 0,26; IL-2 — W = 0,91; p = 0,31; IL-4 — W = 0,93; p = 0,45;  TNF? — W = 0,96;  p = 0,74). Исследование корреляционных взаимо- связей между показателями активности всех типов цитокинов показало, что только для уровней IL-1? и IL-2 имелась высокая положительная взаимозависимость (? = 0,94; р = 0,0005; критерий Спирмена). О количественном изменении уровня IL-2, по мере изменения концентрации IL-1?, судили по соответс-твующему уравнению регрессии:y = 14,10 + 56,10 ? x,где y — уровень IL-2, а x — концентрация IL-1?.Развитие воспалительного процесса в коже экспериментальных животных после термического ожога сопровождалось изменением концентрации отдельных цитокинов в сыворотке крови и взаимосвязей между их показателями. Трансформация продукции цитокинов в ответ на повреждение влияла также на характер распределения показателей в вариационных рядах. Так, на третьи сутки распределение показателей IL-1? и на 15-е сут. распределение показателей IL-4, согласно критерию Шапиро — Уилкса становилось ненормальным  (W = 0,77;  p = 0,041  и W = 0,65;  p = 0,003, соответственно). Динамика показателей активности IL-1? носила фазовый характер. Концентрация IL-1? повышалась к 7-м сут в 1,6 раза, к 15-м сут возвращалась к норме и затем снова повышалась в 2 раза к 30-м сут (табл. 1). Характер динамики концентрации IL-2 был аналогичным. Высокий уровень положительной корреляционной зависимости между показателями активности IL-1? и IL-2 отмечали только на 15-е сут исследования (? = 0,90;  р = 0,04; критерий Спирмена). Количественный уровень зависимости концентрации IL-2 от концентрации IL-1? определялся уравнением регрессии y = 6,78 + 56,10 ? x,где y — уровень IL-2, а x — концентрация IL-1?. Через неделю после термического повреждения кожи в сыворотке крови опытных животных наблюдали рост активности IL-4 в 2,2 раза по сравнению с контролем. При этом между показателями концентраций IL-2 и IL-4 обнаружили высокую положительную

Таблица 1 Изменение концентрации цитокинов в сыворотке крови животных после термического повреждения кожи, M ± m

 

Примечание.   Достоверность отличий от контроля: * — р < 0,05, ** — p < 0,001 по критерию Фишера, +р < 0,05 по критерию Манна — Уитни.

Таблица 2 Изменение соотношения провоспалительных цитокинов и IL-4 в сыворотке крови животных после термического ожога кожи, М  ±  m

 

Примечание.   * — р < 0,05 по сравнению с контролем (критерий Манна — Уитни)

взаимозависимость (? = 0,90;  p = 0,374;  критерий Спирмена). Следует отметить, что в течение 15-ти сут после термического ожога кожи уровни TNF? в сыворотке крови оказались достоверно ниже, чем в контроле.

При изучении соотношений провоспалительных цитокинов к IL-4 обнаружено, что на третьи сутки показатель соотношения IL-1?/IL-4 увеличивался почти вдвое (табл. 2).Максимальные изменения в концентрациях циркулирующих в сыворотке цитокинов выявлены в конце первой недели после ожога, предшествующей наиболее выраженным проявлениям воспалительных процессов. Именно в этот период отмечалось выраженное преобладание содержания в сыворотке IL-1?, IL-2 и TNF? над содержанием IL-4. В этот же период нарастало количество нейтрофилов, и повышалась их биоцидная активность. То есть имело место явное преобладание активности провоспалительных цитокинов в этот период. Резкое увеличение концентрации сывороточного IL-4 к концу 2-й недели после ожога, вероятно, отражало переключение иммунного ответа к некротизированным тканям в очаге поражения на Th2-тип, что и приводило к ингибиции защитных функций нейтрофилов. Восстановление сниженного уровня TNF? через месяц после термической травмы способствовало активной пролиферации. фибробластов, рост которых стимулировался активностью этого фактора. Выраженное преобладание его концентрации над уровнем сывороточного IL-4 с противовоспалительной активностью начинало возрастать уже на 3-й день наблюдения и сохранялось в течение всего месяца проведения исследования. Этот низкомолекулярный фактор является выраженным индуктором не только местного, но системного воспаления, вызывая увеличение синтеза IL-1?, усугубляющего повреждение тканей, тромбоз сосудов микроциркуляторного русла и задержку эвакуации тканевой жидкости в капиллярное русло [17].

В системной циркуляции после ожоговой травмы повышались концентрации не только биологически активных цитокинов, но и продуктов протеолиза поврежденных тканей, представленных молекулами средней массы. На 7-е сут после ожога у животных этот показатель возрастал на 40 % (табл. 3).

Накопление токсических продуктов и цитокинов в крови животных после термического ожога сопровождалось изменением функционального состояния нейтрофильных лейкоцитов. На 3-и П и 7-е сут после повреждения кожи наблюдали снижение в 1,4 раза фагоцитарной активности популяции нейтрофильных лейкоцитов крови по сравнению с контролем (рис. 2). Восстановление этой функции фагоцитов происходило к 15-м сут. Спонтанная биоцидная активность нейтрофилов в НСТ-тесте к третьим суткам, напротив, увеличивалась вдвое и постепенно снижалась к 15-м сут. Реактивность нейтрофилов крови, оцениваемая в индуцированном НСТ-тесте по ответу на золотистый стафилококк или продигиозан, оставалась стабильной в течение недели после термического повреждения кожи, не отличаясь от показателей интактного контроля, и резко снижалась к 15-м сут исследования (рис. 2). Следует отметить, что при развитии острой воспалительной реакции после термического ожога изменялись не только качественные характеристики популяции нейтрофильных лейкоцитов крови, но и количественные параметры. На третьи сутки более чем вдвое возрастал процент (интактные —  9,8 ± 1,6;  ожог —  22,2 ± 3,25;  p < 0,05) и абсолютное количество (интактные — 1,4 ± 0,36; ожог — 2,5 ± 0,5) нейтрофилов. Нейтрофилез в крови наблюдали до конца исследования. Анализ результатов наших исследований показал, что в ранний период развития воспалительной реакции в коже после ожоговой травмы наблюдалась несостоятельность факторов неспецифической резистентности, что, по-видимому, приводило к возникновению инфекционного процесса, в ходе которого формировалась вторая линия защиты организма — приобретенный иммунитет. В течение семи суток отмечали снижение способности нейтрофилов к фагоцитозу, а рост окислительного метаболизма этих клеток наблюдали только на третьи сутки. Ультраструктурный анализ нейтрофилов раневой поверхности кожи показал незавершенность фагоцитоза, что проявлялось в значительном накоплении лизосомальных структур в этих клетках. В этот же период в крови происходило накопление в крови молекул средней массы, обладающих токсичностью. Под действием молекул средней массы могла снижаться фагоцитарная активность лейкоцитов [2]. В это же время в сыворотке крови было обнаружено отсутствие значимого роста активности цитокинов — IL-1?, IL-2 и TNF?, что могло также отчасти объясняться увеличением активности протеолитических процессов. Активация протеолиза способна приводить к слущиванию рецепторов к цитокинам с поверхности клеток, их последующему связыванию с цитокинами и, как следствие, к инактивации последних [10]. Имеются данные о способности продуктов протеолиза — среднемолекулярных пептидов подавлять индуцированную эндотоксином секрецию IL-1? [11]

Таблица 3 Концентрация средних молекул (D254) в крови крыс с термическим  повреждением кожи, М  ±  m

 

 

Рис. 2. Изменение функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов в крови после термического ожога кожи

* — р < 0,05 по сравнению с интактным контролем.

и TNF? [8] мононуклеарными клетками крови, продукцию IL-2 лимфоцитами [16]. Кроме того, отсутствие значимого роста активности цитокинов могло быть связано со стимуляцией процессов тромбогенеза, за счет усиления продукции тромбоксанов и простагландина Е, ингибирующих продукцию IL-1?, TNF? [9] и IL-2 [12]. Наряду с торможением роста активности провоспалительных цитокинов к 7-м сут наблюдения в сыворотке крови отмечали выраженное увеличение концентрации IL-4, что свидетельствовало об активации гуморального иммунитета. Известно, что IL-4 вызывает пролиферацию и дифференцировку активированных В-лимфоцитов, возрастание экспрессии МНС-антигенов II класса и низкоафинных рецепторов для IgE на мембранах покоящихся В-лимфоцитов, стимулирует синтез IgG1 и IgE, ингибирует синтез IgM, IgG3, IgG2a и IgG2b в активированных В-лимфоцитах [6]. Гуморальный тип иммунного ответа наиболее важен в отношении внеклеточно расположенных микробов, поскольку антитела усиливают их поглощение и переваривание фагоцитами. Рост активности IL-4 в крови не влиял на способность нейтрофилов к продукции кислородных радикалов и на чувствительность к дополнительным бактериальным стимулам. Наши данные согласуются с результатами исследований in vitro, в которых продемонстрировано, что IL-4 не влиял на окислительный метаболизм нейтрофилов и их готовность к реализации респираторного взрыва после дополнительной стимуляции [14]. Рост активности IL-4 на 7-е сут, видимо, способствовал защите обожженной кожи от избыточного притока нейтрофилов, обладающих высоким провоспалительным потенциалом. Показано, что эндогенное повышение уровня IL-4 тормозит инфлюкс нейтрофилов и ограничивает повреждение ткани при гломерулонефрите [15]. При исследовании динамики изменений концентрации TNF? в сыворотке крови животных было обнаружено достоверное снижение его содержания на 7-е сут после ожога. В этот период, очевидно, происходила активная перестройка цитокиновой сети, что проявлялось в одновременном повышении концентрации IL-4 и противофазном снижении уровня TNF? и отражало конкурентные отношения между этими цитокинами. В течение второй недели происходило восстановление фагоцитарной и снижение биоцидной функции нейтрофилов. Падение биоцидной активности лейкоцитов сочеталось со снижением общей реактивности этих клеток. Эта фаза реакции нейтрофилов, вероятно, была связана с феноменом деактивации. Деактивацию этих клеток зарегистрировали, изучая влияние рестимулирующих воздействий (S. aureus, S. epidermidis и др.) на образование радикалов кислорода [4]. К этому времени из крови опытных животных удалялись продукты протеолиза, и показатели концентрации молекул средней массы возвращались к норме. Вслед за снижением уровня интоксикации к 30-м сут наблюдали повышение активности провоспалительных цитокинов IL-1? и TNF?. Учитывая характер биологической активности IL-1? и TNF?, это могло свидетельствовать о стимуляции процессов регенерации за счет активации функций фибробластов и эндотелиоцитов, восстановления активационной способности по отношению к клеткам Лангерганса. Таким образом, можно выделить двухфазное изменение активности цитокинов с различной биологической активностью. В конце первой недели после термической травмы отмечалось нарастание концентрации IL-4, продуцируемого Th2-лимфоцитами и стимулирующего клеточные реакции распознавания антигенов инфекционных агентов и поврежденных тканей. В конце первого месяца после ожога продукция мононуклеарными фагоцитами IL-1? нарастала, что приводило к активации фибробластов, кератиноцитов, эндотелиальных клеток и усилению регенерации и восстановления тканевого дефекта.

Исследования выполнены в рамках интеграционного проекта СО РАМН — ДВО РАН № ИП-06–206р-2.

ЛИТЕРАТУРА

1. Габриелян И.И., Левицкий Э.Р., Дмитриев Н.Л. Скрининговый метод определения средних молекул в биологических жидкостях: метод. рекоменд. — М., 1985. — 20 c.

2. Карякина Е.В., Белова С.В. Молекулы средней массы как интегральный показатель метаболических нарушений (обзор литературы) // Клин. лаб. диагн. — 2004. — № 3. — С. 3–8.

3.  Коненков В.И., Ракова И.Г., Авдошина В.В., Гельфгат Е.Л. Комплексная оценка уровня спонтанной продукции цитокинов в культуре мононуклеарных клеток периферической крови здорового человека // Цитокины и воспаление. — 2005. — Т. 4, № 2. — С. 33–37.

4. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. — Новосибирск: Наука, 1989. — 256 с.

5. Маянский Д.Н., Цырендоржиев Д.Д., Макарова О.П. и др. Диагностичекая ценность лейкоцитарных тестов. II. Определение биоцидности лейкоцитов. — Новосибирск, 1996. — 32 c.

6. Михайленко А.А., Коненков В.И., Базанов Г.А., Покровский В.И. Руководство по клинической иммунологии, аллергологии, иммуногенетике и иммунофармакологии. В 2 тт. — М.: Триада, 2005. — 1072 с.

7. Парамонов Б.А. Ожоги. Руководство для врачей. — СПб.: Специальная литература, 2003. — 480 с.

8.  Autore G., Marzocco S., Sorrentino R. et al. In vitro and in vivo TNFalpha synthesis modulation by methylguanidine, an uremic catabolyte // Life Sci. — 1999. — Vol. 65, № 11. — P. 121–127.

9. Endres S., Whitaker R.E., Ghorbani R. et al. Oral aspirin and ibuprofen increase cytokine-induced synthesis of IL-1 beta and of tumour necrosis factor-alpha ex vivo // Immunology. — 1996. — Vol. 87, № 2. — P. 264–270.

10. Fernandez-Botran R. Soluble cytokine receptors: basic immunology and clinical applications // Crit. Rev. Clin. Lab. Sci. — 1999. — Vol. 36, № 3. — P. 165–224.

11. Lonnemann G., Barndt I., Kaever V. et al. Impaired endotoxin-induced interleukin-1 beta secretion, not total production, of mononuclear cells from ESRD patients // Kidney Int. — 1995. — Vol. 47, № 4. — P. 1158–1167.

12. Miles  E.A., Aston L., Calder P.C. In vitro effects of eicosanoids derived from different 20-carbon fatty acids on T helper type 1 and T helper type 2 cytokine production in human whole-blood cultures // Clin. Exp. Allergy. — 2003. — Vol. 33, № 5. — P. 624–632.

 13. Millonig G. Further observations on a phosphate buffer for osmium solutions in fixation // Electron Microscopy: Fifth International Congress for Electron Microscopy (Philadelphia, Pennsylvania, August 29-September 5, 1962) / Ed. S. S. Breese, Jr.), Vol. 2. – New York: Academic Press, 1962. — P. 8.

14. Reglier-Poupet H., Hakim J., Gougerot-Pocidalo M.A., Elbim C. Absence of regulation of human polymorphonuclear oxidative burst by interleukin-10, interleukin-4, interleukin-13 and transforming growth factor-beta in whole blood // Eur. Cytokine Netw. — 1998. — Vol. 9, № 4. — P. 633–638.

15.  Saleem S., Dai Z., Coelho S.N. et al. IL-4 is an endogenous inhibitor of neutrophil influx and subsequent pathology in acute antibody-mediated inflammation // J. Immunol. — 1998. — Vol. 160, № 2. — P. 979–984.

16. Severini G., Diana L., Di Giovannandrea R., Sagliaschi G. Influence of uremic middle molecules on in vitro stimulated lymphocytes and interleukine-2 production //  ASAIO J. — 1996. — Vol. 42, № 1. — P. 64–67.

17. Tracey K.J., Vlassara H., Cerami A. Cachectin/tumor necrosis factor // Lancet. — 1989. — Vol. 1, № 8647. — P. 1122–1126.

Dynamic changes of cytokine activity and neutrophil functions in rats after thermal skin burnV.I. Konenkov, O.P. Makarova, N.P. Bgatova, I.G. Rakova

Institute of Clinical and Experimental Lymphology, Siberian Branch RAMS, NovosibirskInvestigation of serum levels of IL-1?, TNF?, IL-2, IL-4 and neutrophil (Nph) functions in Wistar rat blood in normal conditions and after thermal skin burn of 3А degree (10 % of body surface) has been performed. Cytokine levels were detected by flow cytometry using «Bio-Rad» test-system. Nph functions were estimated by the ability to uptake heat-killed S. aureus and according to spontaneous and stimulated (with B. prodigiosum LPS or heat-killed  S. aureus) NBT reduction. The decrease of IL-1?, IL-2 and TNF? levels and the 2-fold increase in IL-4 values were found on the first week. Nph phagocytic activity was decreased 1,4 times on days 3 and 7, while spontaneous NBT reduction was increased only on the 3rd day. Nph phagocytic activity returned to normal state on the second week, but the ability of these cells to reduce NBT and to respond on stimulation by prodigiosan or heat-killed S. aureus were decreased. The levels of proinflammatory cytokines IL-1? and TNF? were increased by the 30th day. Thus, two-phase change in concentrations of cytokines with different biological effects and blood neutrophil functional activity was found after skin burn. (Cytokines and Inflammation. 2007. Vol. 6, № 3. P. 57–62.)

Key words: skin burn, cytokines, neutrophils, NBT test, phagocytic activity.



загрузка...