загрузка...
 
Исследование препаратов с цитокиновой активностью в экспериментальной модели внутрикожной воздушной полости Б.А. Парамонов , А.С. Симбирцев , В.Г. Конусова , Е.В. Зиновьев , А.М. Харисов , В.Б. Бабкин
Повернутись до змісту

Исследование препаратов с цитокиновой активностью в экспериментальной модели внутрикожной воздушной полости Б.А. Парамонов , А.С. Симбирцев , В.Г. Конусова , Е.В. Зиновьев , А.М. Харисов , В.Б. Бабкин

Военно(медицинская академия МО РФ, С.Петербург;  2 ГНЦ НИИ особо чистых биопрепаратов, С.Петербург

Эксперименты проводили на 140 мышах обоего пола линии BALB/c массой 18–20 г. Животные были разделены на 10 групп по 14 особей. Внутрикожную воздушную полость (ВВП) формировали путем двукратного (с интервалом в два дня) внутрикожного введения 3 мл стерильного воздуха в кожу области спины. Спустя трое суток после этого в сформировавшуюся ВВП вводили по 1 мл раствора одного из исследуемых веществ. Изучали действие следующих агентов: 5 мг каррагенана (Servа); 0,5 нг интерлейкина 1? и 0,5 нг интерлейкина 8 (НИИ ОЧБ); 0,4 мг супероксиддисмутазы (НИИ ОЧБ); 15 мг ?-каротина (ГНИИ ОЧБ); 100 мг ?-токоферола  («Акрихин»). В двух отдельных  группах животным вводили смесь интерлейкина 1 и интерлейкина 8 с супероксиддисмутазой.

Исследуемые вещества были приготовлены на сбалансированном фосфатном буфере  (СФБ). В контрольных  группах животным вводили по 1 мл буфера или стерильный воздух. Спустя сутки после введения животных декапитировали, ВВП вскрывали, после чего в неё вводили 250 мкл раствора СФБ, промывную жидкость отбирали на анализ. Определяли количество клеток в единице объема, а также спонтанную и индуцированную хемилюминесценцию на хемилюминометре «Victor 2»  (Wallac, Финляндия). Результаты выражали в СРS — количестве импульсов за определенный временной интервал  (30 мин). Стенку ВВП иссекали, полученные биопта ты исследовали методами световой и электронной микроскопии. Установили, что в контрольных группах количество клеток в жидкости различалось на порядок  (от 0,3?106 до 13,0?106 в 1 мл) и при этом спонтанная (СХЛ) и индуцированнная зимозаном хемилюминесценция  (ИХЛ) была на низком уровне и составляла: СХЛ — от 10,0 ± 0,7 до 14,1 ± 2,6; ИХЛ — в пределах от 41,6 ± 1,8 до 464,0 ± 38. Общим для животных, которым в по лости вводили антиоксиданты (? токоферол, ? каротин и супероксиддисмутазу), было наличие цитоза. При изучении показателей хемилюминесценции (как спонтанной, так и индуцированной) была отмечена её полная ингибиция, что свидетельствовало о «гашении» свободных радикалов кислорода. У животных, которым вводили провоспалительные цитокины (IL-1?, IL-8) и каррагенан, в жидкости пузырей показатели спонтанной хемилюминесценции существенно не отличались от соответствующих данных в контрольных группах. Вместе с тем, возросла активность ИХЛ  (как общей, так и удельной). Величина данных показателей у всех животных была выше, чем в контрольных группах, и колебались в пределах от 227 до 11 000 СРS. Введение супероксиддисмутазы вместе с цитокинами  (IL-1? и  IL-8) оказывалось недостаточным для того, чтобы купировать возрастание хемилюминесценции. Повидимому, это связано с краткосрочностью действия фермента. При гистологическом исследовании были установлены существенные различия в строении ВВП в разных группах. При введении буфера или воздуха признаки воспаления были не выражены, в тонких и нежных стенках пузыря имелись 2–3 слоя клеток. Схожая картину наблюдали при введении антиоксидантов, в частности супероксиддисмутазы. Инъекция провоспалительных агентов  (например, интерлейкина 1?), способствовала привлечению большого количества активированных нейтрофилов и макрофагов. Стенка ВВП при этом набухала, часть нейтрофилов мигрировала из кровеносных сосудов в просвет полости.



загрузка...