Влияние древовидных пептидов с последовательностью молекул главного комплекса гистосовместимости на баланс внутритимусных субпопуляций Т3лимфоцитов Д.Б. Казанский, Л.А. Побезинский, Е.Л. Побезинская, В.Н. Петрищев, Т.В. Анфалова, Л.М. Хромых, Л.Ю. Скляров, Н.А. Копина, И.Г. Сидорович
Российский онкологический научный центр РАМН; 2 ГП Институт иммунологии ФУ МБ и ЭП при МЗ РФ, Москва
Мишенью антигенспецифических рецепторов (TCR) Т-лимфоцитов, осуществляющих вспомогательные и эффекторные функции специфического клеточного иммунитета, являются молекулы главного комплекса гистосовместимости (MHC), представленные на поверхности клеток в виде комплексов с антигенными пептидами. Значительный вклад во взаимодействие TCR с комплексом молекула MHC/пептид вносят C-концевые участки ?-спиралей доменов ?1 и ?2 молекул MHC класса I. Контактный сайт домена ?2 имеет ограниченную гомологию с ?-цепями молекул MHC класса II, что делает его привлекательным объектом исследований, направленных на стимуляцию иммунного ответа и дизайн новых вакцин. Ранее нами показано, что введение животным мультиплетного тетрамера AA158-175 молекулы H-2Db приводит к увеличению доли периферических Т-лимфоцитов CD4+ и стимуляции ответа на слабоиммуногенные продукты MHC. С целью выяснения влияния подобных препаратов на процессы внутритимусной дифференцировки Т-клеток последовательности контактных сайтов молекул H-2Db (H-2Ld), H-2Kk и H-2Kb АА158-175 cинтезировали в форме древовидных тетрамеров.
Обнаружено, что однократная подкожная иммунизация тетрамерами приводила к изменению баланса внутритимусных субпопуляций Т-лимфоцитов: снижению доли клеток основного ядра тимоцитов CD4+CD8+ с одновременным увеличением доли «ярких» тимоцитов CD4+CD8+, CD4+CD8lo, CD4loCD8+ и CD4+CD8 , что свидетельствовало о влиянии мультиплетных пептидов на процессы внутритимусной дифференцировки и селекции Т-лимфоцитов. Наиболее выраженные изменения наблюдали на 3-й день после инъекции препаратов, что предшествовало появлению клеток CD4+ в периферических лимфоидных органах. Показано, что пептиды AA158-175 различных аллельных форм молекул MHC обладали различной способностью к стимуляции периферических Т-лимфоцитов CD4+. Наибольшая эффективность стимуляции у мышей C57Bl/10 (H-2b) достигалась при применении пептида AA158-175 молекулы H-2Kk. Однократная подкожная иммунизация мышей этой линии тетрамером в дозе 100 мкг приводила к увеличению доли клеток CD4+ с повышенной экспрессией активационного маркера CD44 и сниженной экспрессией CD62L в периферических лимфоидных органах. Такие изменения в экспрессии активационных маркеров не наблюдались, если последовательность звеньев тетрамера содержалась в какой-либо из молекул MHC реципиента.
Полученные результаты свидетельствуют о возможности имитации естественных лигандов Т-клеточных рецепторов синтетическими пептидными конструкциями, что открывает перспективы создания новых и существенного повышения эффективности имеющихся вакцин, направленных на стимуляцию иммунитета к микробным и вирусным патогенам, а также ан тигенам злокачественно трансформированных клеток. Данная работа выполнена при поддержке РФФИ (грант № 02-04-49042) и программы «Вакцины нового поколения и медицинские диагностические системы будущего».