Диагностика антифосфолипидного синдрома у женщин с привычным невынашиванием беременности К.В. Сальников , Н.В. Петёвка , Т.С. Гарбузенко , Т.С. Колесникова , И.Л. Дусь , А.М. Комлюк
НИИ гематологии и переливания крови МЗ РБ; 2 Республиканский
Центр репродукции и планирования семьи, Минск
Одним из наиболее характерных признаков антифосфолипидного синдрома (АФС) является акушерская патология: привычное невынашивание беременности (ПНБ), рецидивирующие спонтанные аборты, внутриутробная гибель плода, преэклампсия. Среди женщин с АФС частота акушерской патологии достигает 80 %. Основным действующим патогенетическим звеном АФС являются антифосфолипидные антитела, представляющие собой гетерогенную популяцию антител, реагирующих с широким спектром фосфолипидов и фосфолипидсвязывающих белков. Ключевую роль среди них играют волчаночные антикоагулянты (ВА), антикардиолипиновые антитела (АКА) и антитела к ?2 гликопротеину 1 (анти ?2 ГП1). Достоинством теста определения антител к ?2 ГП1 является его высокая специфич" ность: наличие высоких титров анти ?2 ГП1 антител у пациентов с клиническими проявлениями, а при отрицательных результатах анализов на АКА и ВА он позволяет установить диагноз первичного АФС. Нами была разработана тест система для количественного определения антител, связывающихся с иммобилизованным на твердой фазе ?2 ГП1 на основе иммуноферментного анализа. ?2 ГП1 был выделен из пула сыворотки крови человека, как описано Polz et al. (Int. J. Biochem, 11: 256 270). Очищенный ?2 ГП1 сорбировали в лунках микропланшета «Maxisorp» (Nunc, Denmark) в концентрации 5 мкг/мл. Неспецифические центры связывания были блокированы 1 % м раствором желатина, образцы сыворотки, разведенной 1:100 в ФСБ Твин 20 0,05 %, инкубировали в течение 2 ч. После 3 кратной отмывки тем же буфером в лунках инкубировали пероксидазный конъюгат антител против IgG человека (Abbott, Germany).
Результаты учитывали на многоканальном спектрофотометре при длине волны 492 нм. Обследовано 25 женщин с диагнозом ПНБ, состоящих на учете в Республиканском Центре репродукции и планирования семьи. Средний возраст женщин составил 32,5 года (от 21 года до 42 лет). В комплекс лабораторного обследования, кроме исследования анти ?2 ГП1 класса G, входили определение ВА («Staclot LA», Stago), рутинные параметры плазменного гемостаза: АЧТВ, ПТИ, фибриноген А (диагностические наборы «Boehringer» и «Cormay»), а также исследование агрегационных свойств тромбоцитов с индукторами агрегации АДФ и ристомицином («Ренам», Москва). Позитивными по ВА и анти ?2 ГП1 соответственно оказались 9 (36 %) и 7 (28 %) женщин. Коэффициент корреляции двух тестов составил 0,78 (р < 0,05). При сравнительном анализе групп ВА+ и ВА выявлено статистически достоверное увеличение количества эпизодов невынашивания беременности (Манн Уитни U тест, р < 0,05) в группе ВА+, причем с нарастанием титра антител рос показатель спонтанных абортов. Не было установлено разницы в показателях коагулограммы, однако у женщин в группе ВА+ отмечали тенденцию к более высоким значениям ПТИ (р < 0,062). У 4 из 9 женщин (44 %) с выявленными ВА отмечали спонтанную агрегацию тромбоцитов (степень агрегации от 11 до 26 %) и гиперагрегацию тромбоцитов с АДФ и ристомицином, в то время как у «негативных» женщин агрегационные свойства тромбоцитов были в норме или незначительно снижены.