загрузка...
 
А.И. Симакова, Н.В. Мандракова, Е.В. Маркелова, В.А. Иванис Владивостокский  Государственный медицинский  университет Цитокиновый профиль у больных с иксодовым клещевым боррелиозом
Повернутись до змісту

А.И. Симакова, Н.В. Мандракова, Е.В. Маркелова, В.А. Иванис Владивостокский  Государственный медицинский  университет Цитокиновый профиль у больных с иксодовым клещевым боррелиозом

Представлены результаты исследований  системы цитокинов у больных  с иксодовыми клещевыми боррелиозами.

По клиническому маркеру эритемы на месте укуса клеща выделены две группы больных:

1) с эритемной формой (28 человек),

2) с безэритемной формой (17 человек).

В обеих группах в острый период исследован уровень в сыворотке крови TNF?, INF? , IL1? ?, IL8 и IL4. Установлено, что  синтез и активация цитокинов  зависят от формы болезни. Показано преобладание иммунного ответа Th2 типа у больных обеих групп, что предопределяет недостаточность реакций клеточного типа при иксодовых клещевых боррелиозах. (Цитокины и воспаление. 2004. Т. 3, № 4. С. 21–24.)

Ключевые слова: иксодовый клещевой боррелиоз, цитокины, Th2тип иммунного ответа.

Проблема иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) чрезвычайно актуальна во всем мире. Это объясняется широким распространением инфекции, наличием ее тяжелых хронических форм, нередко приводящих к инвалидизации человека. Приморский край России является активным природным очагом ИКБ, заболеваемость человека составляет в среднем 10,42 на 100 тысяч населения и превышает таковую по Российским показателям в разные годы в 2–2,5 раза [5]. Возбудители ИКБ относятся к семейству Spirochaetaceae, роду Borrelia. К настоящему времени выделено 11  геновидов боррелий. Для человека доказана патогенность 3 х геновидов: B. burgdoferi sensu strico, B. garinii и B. afzelii. Все эти  геновиды распространены на территории России  [1, 3]. Согласно общепринятому взгляду на течение боррелиозной инфекции, выделяют три стадии развития болезни (стадия локальной инфекции, диссеминации и органных поражений). Однако это разделение довольно условно и во многом основывается на клинических проявлениях, а также временных характеристиках от момента инфицирования [1, 5, 6, 8]. Наиболее острые вопросы в проблеме ИКБ связаны с неизученностью механизмов формирования хронической органной патологии. Цикличность течения, полиморфизм симптоматики позволяют предполагать участие иммунной системы в патогенезе ИКБ. Считают, что незавершенный фагоцитоз в первую стадию болезни, а также способность боррелий к длительному внутриклеточному переживанию в фибробластах играют определенную роль в формировании хронического процесса [3, 6]. В литературе имеются единичные данные о механизмах иммунной защиты при ИКБ [2, 4, 9]. К настоящему времени у человека идентифицировано более ста цитокинов. Им принадлежит ведущая роль в развитии воспалительной реакции [7]. Среди провоспалительных цитокинов, принимающих участие в формировании мигрирующей эритемы  (МЭ) и гриппоподобного синдрома, названы IL1 и IL8 [7, 9]. Доказана способность B. burgdoferi стимулировать образование TNF? мононуклеарами периферической крови человека. Нет единого мнения в отношении роли Th1 или Th2 типов иммунного ответа в разрешении ИКБ. В эксперименте на моделях ИКБ у мышей был  выявлен цитокиновый паттерн, характерный для Th1 ответа. Однако при изучении иммунного ответа у детей в ранний период ИКБ установлен смешанный Th1/Th2 тип [2, 4, 7, 10, 11, 12]. Недостаточность и противоречивость сведений об иммуногенезе ИКБ послужили основанием для проведения исследований системы цитокинов в сыворотке крови у больных с разными формами ИКБ.

Цель работы состояла в сравнении уровня и соотношения про и противовоспалительных цитокинов у больных ИКБ с разными формами в динамике острой фазы болезни.

Материалы и методы

Под наблюдением находилось 45 больных иксодовыми клещевыми боррелиозами, поступивших в инфекционное отделение Краевой клинической больницы № 2 Приморского края. В анамнезе большинство  (88,9 %) имели  укус клеща. Среди пациентов с острыми формами ИКБ было 23 (51,1 %) мужчины и 22  (48,9 %) женщины в возрасте от 16 до 80 лет  (средний возраст 50,31 ± 2,42 лет). Клиническое наблюдение осуществляли в остром периоде заболевания и через 6 мес. после стационарного лечения. Все больные получили курс антибактериальной  терапии. Серологическую диагностику ИКБ осуществляли стандартным методом НМФА с использованием коммерческого диагностикума НИИЭМ им Н.Ф.  Гамалеи РАМН. Содержание цитокинов в  сыворотке крови определяли методом  твердофазного ИФА  с использованием реактивов «R&D Diagnostic Inc.» (USA) с чувствительностью 1 пг/мл; анализ цитокинов проводили при поступлении и на 10 й день болезни. Контрольную  группу  составили 50  здоровых доноров Краевой  станции переливания крови.

Результаты и обсуждение

Результаты проведенных исследований показали, что чаще болеют мужчины в возрасте от 29 до 63 лет и женщины старше 55 лет. Лица трудоспособного возраста составили 68,4 % от числа всех наблюдаемых. По клиническому маркеру наличие эритемы на коже в области укуса клеща больные ИКБ были разделены на две  группы: 1 я — с эритемной формой  (ЭФ), составившая 28  (62,2 %) человек, 2 я—с безэритемной формой (БЭФ), составившая 17 человек (37,8 %). Инкубационный период у заболевших в обеих группах колебался от 1 до 26 дней, в среднем его продолжительность составила 8,7 ± 1,1 дня. Не было выявлено различий в сроках инкубационного периода у больных разных групп. Клинические проявления ИКБ у больных обеих  групп характеризовались наличием общетоксического синдрома. Наиболее частыми симптомами последнего явились общая слабость, озноб, головная боль, лихорадка, артралгии и миалгии. Острое начало заболевания преобладало у больных с БЭФ (67,6 %). Средняя продолжительность лихорадочного периода составила 4,41 ± 0,4 и 6,31 ± 0,8 дня в этих  группах соответственно  (в группе ЭФ она оказалась на 2 дня меньше, чем в группе БЭФ). Поражения внутренних органов, свидетельствующие о диссеминации процесса, наблюдали у всех больных с БЭФ. Они проявлялись наличием энцефалопатии у 7  (41,1 %) больных, увеличением печени у 4  (23,5 %) человек и выраженными артралгиями у 6  (35,3 %). Мигрирующая эритема  (от 5 до 20 см в диаметре) в 1 й  группе больных наиболее часто локализовалась на коже живота и в паховых областях. У 4 пациентов она осложнилась наличием дочерних эритем и у  5 — региональным лимфаденитом. Длительность МЭ колебалась от 5 до 14 дней (8 ± 0,8 дня). Было проведено сравнение уровня цитокинов в периферической крови у больных с разными формами ИКБ в первые дни поступления в стационар (1–5 день болезни) и через 10 дней (11–15 день болезни). В табл. 1 представлены средние сывороточные уровни провоспалительных цитокинов TNF?,  IL1?,  IL8, а также цитокинов Th1 типа (INF?) и Th2 типа  (IL4) в динамике острого периода больных ИКБ с МЭ. У больных с МЭ при первом исследовании зафиксировано достоверное повышение TNF? в 4,9 раза, на 10–11 сутки определена тенденция к снижению его содержания.  IL1? —продукт тканевых макрофагов, принимающий участие в формировании мигрирующей эритемы  [7, 11]. С этим, вероятно, связано то, что отмеченное повышение концентрации этого цитокина в сыворотке крови у больных с МЭ оказалось недостоверным по сравнению с  группой контроля. Концентрация  IL8, продуцентами которого являются нейтрофилы [7], незначительно повышалась при первом исследовании до 18,83 ± 6,02 пг/мл, но на 10 й день зафиксировано достоверное его повышение более чем в 2 раза (p < 0,01). В этот период болезни у большинства  (69,4 %) пациентов с МЭ в гемограмме отмечен нейтрофильный лейкоцитоз. Установлена прямая корреляционная связь уровня IL8 с нейтрофильным лейкоцитозом, возрастающая в динамике болезни. Интересные данные были получены при изучении динамики уровня цитокинов INF? и IL4— маркеров Th1 и Th2 типов иммунного ответа. В первую неделю болезни у пациентов с МЭ отмечено умеренное повышение INF? до 19,68 ± 9,87 пг/мл с последующей тенденцией к снижению, однако различия с контрольной  группой оказались недостоверными  (p > 0,05). При этом мы отмечали достоверное повышение концентрации  IL4 на 5 й день болезни в 3 раза и на 10 й день более чем в 4 раза. Соотношение INF?/IL4 в динамике снизилось с 1,53 до 0,75 (при 4,14 в группе контроля); т.о., констатировано превалирование Th2 типа иммунного ответа в динамике эритемной формы ИКБ. Анализ динамики уровня исследуемых цитокинов в периферической крови у больных второй

Таблица  1 Содержание цитокинов в периферической крови больных с эритемной формой ИКБ

 

Таблица  2 Содержание цитокинов в периферической крови больных с безэритемной формой ИКБ

 

Примечание к  табл. 1 и 2. Достоверность различий  с  контрольной  группой:

* — p < 0,05,

** — p < 0,01,

*** — p < 0,001.

группы с БЭФ иксодового клещевого боррелиоза представлен в табл. 2. В  группе больных с безэритемной формой также было зафиксировано достоверное повышение уровня TNF? более чем в 6 раз в первую неделю болезни с последующим его снижением на 10 й день. Установлено достоверное нарастание провоспалительного цитокина  IL1? более чем в 90 раз на 5 й день болезни и его некоторое снижение на 10 й день, однако его уровень в крови попрежнему превышал таковой в контрольной  группе в 70 раз, что, повидимому, обусловливает его системное действие у больных этой группы. Установлена прямая корреляционная зависимость уровня IL1? с выраженностью интоксикационного синдрома. Изучение в динамике IL8 в группе пациентов с БЭФ показало достоверное его повышение только привтором исследовании: он оказался повышенным в 2 раза по сравнению с группой контроля. Изучение динамики  INF? показало следующее. Было установлено двукратное повышение INF? при первом исследовании с последующим резким снижением до 2,99 ± 0,98 пг/мл (при 14,3 ± 1,7 пг/мл в группе контроля). При этом наблюдался активный синтез и секреция IL4, его уровень в крови оставался повышенным более чем в 3 раза при первом и втором исследовании. Соответственно коэффициент  INF?/IL4 в этой  группе больных снизился с 2,6 до 0,21 в динамике, отражая преобладание Th2 типа ответа [7, 11, 12]. Т. о., у больных с ИКБ синтез и активация цитокинов зависят от формы болезни. Наблюдается дисбаланс про и противовоспалительных цитокинов с преоблада нием Th2 типа иммунного ответа у больных обеих групп.

ЛИТЕРАТУРА

1. Ананьева Л.П., Барскова В.Г., Скрипникова И.А., Стир А.С. Стадийное течение Лаймборрелиоза у больных с мигрирующей эритемой в дебюте // Проблемы клещевых боррелиозов: Сб. научных трудов под ред. Э.И. Коренбер га. — М., 1993. — С. 66–74.

2. Васильева Ю.П., Железникова Г.Ф., Скрипченко Н.В. и др. Прогностическое значение уровней TNF?, INF?, IL4 и общего IgE при иксодовом клещевом боррелиозе у детей // Мед. иммунология. — 2002. — Т. 4, № 2. — С. 233.

3. Воробьева Н.Н. Клиника, лечение и профилактика иксодовых клещевых боррелиозов. — Пермь: УралПресс, 1998. — 136 с. 4. Железникова Г.Ф., Скрипченко Н.В., Васильева Ю.П. и др. Ранний цито киновый и иммунный ответ при иксодовом клещевом боррелиозе у де тей // Мед. иммунология. — 2002. — Т. 4, № 3. — С. 459–466.

5. Леонова Г.Н., Якушева С.С., Иванис В.А. и др. Клиникоэпидемиологические аспекты иксодовых клещевых боррелиозов в Приморском крае // Эпидемиол. инфекц. болезни. — 2002. — № 1. — С. 49–53.

6. Лобзин Ю.В., Усков А.Н., Козлов С.С. Лайм — боррелиоз (иксодовые клещевые боррелиозы). — СПб.: Фолиант, 2000. — 160 с.

7. Караулов А.В. Клиническая иммунология и аллергология. — М.: Медицинское информационное агенство, 2002. — 651 с.

8. Коренберг Э.И., Крючечников В.Н. Иксодовые клещевые боррелиозы — новая группа заболеваний человека // Ж. микробиол. — 1996. — № 4. — С. 104–107.

9. Федоров Е.С., Барскова В.Г., Ананьева Л.П. и др. Механизмы регуляции воспаления и иммунитета в патогенезе болезни Лайма // Клин. мед. — 1999. — № 6. — С. 14–19.

10. Корикова М.Ю. Специфический  гуморальный иммунный ответ при различных вариантах острого периода Лаймборрелиоза: Автореф. дис. канд. мед. наук. — Челябинск, 2002.

11. Dattwyler R.J., Volkman D.J., Halperin J.J. et al. Specific  immune responses  in Lyme borreliosis // Ann. N. Y. Acad. Sci. — 1998. — Vol. 538. — P. 93–102.

12.Forsberg P., Ernerudh  J., Ekerfelt C. et al. The outer  surface proteins of Lyme disese Borrelia  spirochetes  stimulate T  cells  to  secrete  interferongamma (INFgamma): diagnostic and pathogenic implications // Clin. Exp. Immunol. — 1995. — Vol. 101, №  3. — P. 453–460.

Cytokine pattern in patients with Ixodes tick%borne Borreliosis A.I. Simakova, N.V. Mandrakova, E.V. Markelova, V.A. Ivanis Vladivostok State Medical University The article presents the results of cytokine  investigation  in patients with Ixodes tick–borne Borreliosis. According to the erythema reaction at the site of tick sting, 2 groups of patients were distinguished: the first group — 28 patients with erythematous form and the second group — 17 patients with nonerythematous form. Levels of TNF ?, INF ?, IL1 ?, IL8, and IL4 in serum were analyzed in both groups during an acute period. It was determined that synthesis and activation of cytokines depended on the form of disease. The prevalence of Th2 type immune response in both groups of patients was revealed. This predetermines the incompetence of cellular type immune reactivity in Ixodes tickborne Borreliosis. (Cytokines and  Inflammation. 2004. Vol. 3, № 4. P. 21–24.)

Key words: Ixodes tickborne borreliosis, cytokines, Th2 type immune response.



загрузка...