загрузка...
 
Ассоциация полиморфных вариантов гена IL18 (G137C) с острым инфарктом миокарда Н.С.  Сенникова , Е.Н. Воронина , Ю.А. Ровных , М.Б. Шинтяпина , Л.В. Попова, М.Л. Филипенко  Кафедра клинической иммунологии НГМА;  Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН,  Центральная клиническая больница СО РАН, г. Новосибирск
Повернутись до змісту

Ассоциация полиморфных вариантов гена IL18 (G137C) с острым инфарктом миокарда Н.С.  Сенникова , Е.Н. Воронина , Ю.А. Ровных , М.Б. Шинтяпина , Л.В. Попова, М.Л. Филипенко  Кафедра клинической иммунологии НГМА;  Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН,  Центральная клиническая больница СО РАН, г. Новосибирск

Исследование полиморфных локусов при изучении заболеваний, имеющих мульти факториальную природу, в том числе болезней сердечнососудистой системы, является актуальным направлением  геномной медицины. В настоящее время изучается достаточно большое количество полиморфных вариантов  генов, участвующих в формировании пато! логии сердечно сосудистой системы, в частности  генов цитокинов. В соответствии с современными концепциями, ведущую роль в патогенезе сердечнососудистых заболеваний  (ССЗ) играет иммуно воспалительная активакция, опосредованная про воспалительными цитокинами. Так, например,  IL1? и TNF? приводят к уменьшению максимальной скорости сокращения кардиомиоцитов, причем их действие синэргично. Недавно открытый про воспалительный цитокин—IL18, является ключевым медиатором в регуляции реакций  гуморального и клеточного иммунитета и в значительной  степени определяет продукцию других биологически активных молекул, в том числе и про воспалительных. Промотор  гена  IL18 содержит два полиморфных локуса, которые входят в сайты связывания транскрипционных факторов. Замена G на С в положении –137 приводит к нарушению взаимодействия H4TF1 с промотором и, соответственно, к изменению уровня транскрипции  гена и экспрессии конечного белкового продукта  IL18. Ранее была показана ассоциация данного полиморфного локуса с такими заболеваниями, как диабет и саркоидоз. Целью нашего исследования являлось изучение ассоциации аллельных вариантов  гена  IL18  (G137C)  с инфарктом миокарда. Для этого было обследовано 93 больных с острым инфарктом миокарда  (ОИМ) и 112 человек без ССЗ. Диагноз ОИМ верифицировался на основании данных клиники, наличии превышения тропонина  I, динамики ЭКГ, данных ЭХОКГ. Контрольная  группа подбиралась в соответствии с возрастным и половым составом  группы ОИМ. Исследование полиморфного локуса G137C проводили с помощью аллель специфичной ПЦР. Результаты данной работы представлены в таблице. Частоты встречаемости аллелей практически не различались между исследованными выборками, в то время как частота встречаемости  генотипа СС была практически в 2 раза выше в  группе ОИМ, чем в контроле  (?2, p = 0,02). Следовательно, генотип СС может являться фактором риска развития острого инфаркта миокарда. Таким образом, в нашем исследовании установлено, что  генотип СС полиморфного локуса G137C гена  IL18 ассоциирован с ОИМ, что может указывать на патогенетическую роль этого провоспалительного медиатора при данной патологии.

Таблица Частота встречаемости аллелей и генотипов полиморфного локуса G137C гена IL18 в группах ОИМ и контроле Кинетика уровня мРНК IL34 и IL342 в мононуклеарных клетках периферической крови человека при стимуляции митогеном А.Н. Силков, С.В. Сенников, В.А. Козлов ГУ НИИ клинической иммунологии СО РАМН, г. Новосибирск

 

IL42 известен как естественный антагонист  IL4, образующийся при альтернативном сплайсинге. Для исследования экспрессии  IL4 и  IL4?2 в мононуклеарных клетках  (МНК) человека разработан метод количественной оценки уровня их мРНК и оценена кинетика накопления специфических транскриптов. МНК выделяли из цельной периферической крови здоровых индивидов стандартными методами. Клетки культивировали в среде RPMI!1640, содержащей 10 % ЭТС и 2 мМ L глутамина, при 37 °С и 5 % СО2. Митогенную  стимуляцию проводили конканавалином А в дозе 5 мкг/мл, концентрация клеток составляла 106  кл/мл. Часть свежевыделенных клеток, а также клетки, культивированные 1, 3, 6, 18, 24 и 48 ч использовали для выделения РНК стандартным методом фенольной экстракции, синтез кДНК проводился в реакции обратной транскрипции. Уровень мРНК  IL4 и  IL4?2 оценивался методом конкурентной ПЦР с синтетическими внутренними  стандартами. Установлено, что исходный уровень мРНК  IL4 превышает уровень мРНК  IL4?2 во всех исследованных образцах нестимулированных клеток, количественное  соотношение мРНК IL42/IL4 при этом составляло от 15 до 30 %. При культивировании клеток в присутствии митогена уровень  IL4?2 значительно возрастал уже в течение 1 ч и начинал заметно снижаться через 6 ч культивирования. Уровень мРНК  IL4, напротив, достаточно плавно возрастал, достигая  своего максимального уровня в течение первых 6 ч культивирования, а затем столь же плавно понижался. Количественное  соотношение мРНК  IL4?2/IL4 имело максимальное значение (60–75 %) в клетках, культивированных 1 ч в присутствии митогена, далее наблюдалось практически линейное понижение соотношения, и исходный уровень восстанавливался в 24–48 часовых культурах. Таким образом, кинетика изменения уровня для мРНК  IL4 и  IL4?2 различается, что свидетельствует об изменении активности альтернативного сплайсинга премРНК  гена  IL4 в клетках человека при активации.



загрузка...