загрузка...
 
Гемопоэтические стволовые клетки. Практика подготовки к трансплантации Е.Е. Зуева, Л.С. Комарова, И.В. Молчанова, А.В. Куртова, Л.М. Фрегатова, Б.В. Афанасьев, А.А.  Тотолян Санкт Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова
Повернутись до змісту

Гемопоэтические стволовые клетки. Практика подготовки к трансплантации Е.Е. Зуева, Л.С. Комарова, И.В. Молчанова, А.В. Куртова, Л.М. Фрегатова, Б.В. Афанасьев, А.А.  Тотолян Санкт Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова

Использование  гемопоэтических  стволовых  клеток (ГСК) является современным видом цитотерапии многих гематологических и негематологических заболеваний. При планировании трансплантации ГСК  (ТГСК) необходима точная информация о количестве жизнеспособных CD34+ клеток. Основными преимуществами ПЦР по сравнению с другими методами количественного определения ГСК являются высокая точность результатов и скорость их получения. Разработанная нами модификация протокола ISHAGE позволила оценить ГСК в различном биологическом материале, в том числе, в периферической и пуповинной крови, костном мозге и аферезном продукте. Для точного определения области негативных событий включен изотипический контроль; для анализа жизнеспособности фракции мононуклеаров использован 7 аминоактиномицин D. Для исключения наложения спектров флюоресценции при анализе двух малоклеточных популяций  (ГСК и нежизнеспособные клетки) 7!AAD был использован нами не в качестве третьего компонента сочетания CD45 и CD34, а в комбинации CD45FITC/7AAD, что позволяло определять жизнеспособность лейкоцитов вне зависимости от количества ГСК. На основании анализа 360 образцов периферической крови и продукта афереза выявлено, что данные об объеме фракции мононуклеаров недостаточны для предварительного определения качества аферезного продукта (p > 0,05) при планировании аутологичной и аллогенной родственной ТГСК для пациентов  гематологического и негематологического профиля. Количество ГСК в аферезном продукте в значительной мере зависит от относительного содержания CD34+CD45+ клеток  фракции мононуклеаров периферической крови  (p < 0,05). При планировании аллогенной родственной ТГСК количество процедур афереза, необходимых для получения достаточного количества ГСК, было достоверно меньше по сравнению с планированием аутологичных ТГСК  (p < 0,05).



загрузка...