Изучение иммунорегуляторных эффектов перорального применения трансгенной моркови, несущей ген IL318 Ю.А. Лопатникова, Е.В. Якушенко , Е.В. Дейнеко , Е.А. Храпов,  Е.Н. Воронина, М.Л. Филипенко,  С.В.  Сенников , В.К. Шумный, В.А. Козлов ГУ НИИ клинической иммунологии СО РАМН;  Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН;  Институт цитологии и генетики СО РАН, г. Новосибирск

Изучение иммунорегуляторных эффектов перорального применения трансгенной моркови, несущей ген IL318 Ю.А. Лопатникова, Е.В. Якушенко , Е.В. Дейнеко , Е.А. Храпов,  Е.Н. Воронина, М.Л. Филипенко,  С.В.  Сенников , В.К. Шумный, В.А. Козлов ГУ НИИ клинической иммунологии СО РАМН;  Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН;  Институт цитологии и генетики СО РАН, г. Новосибирск

Показано, что пероральное введение антигенов или цитокинов можно использовать для модуляции  гемопоэза и иммунных реакций. Одним из возможных путей доставки антигенов или цитокинов может быть использование трансгенных растений. Исследования идут в направлении создания трансгенных растений, несущих опухолевые, инфекционные антигены или иммунорегуляторные цитокины с целью модуляции специфических иммунных реакций. Целью нашего исследования являлось создание трансгенной по  гену  IL18 человека моркови и изучение возможности ее перорального применения для модуляции иммунных ре! акций у мышей. IL18—это белок, постоянного продуцирующийся различными клетками в организме человека и участвующий в формировании врожденного и приобретенного иммунного ответа. Этот медиатор регулирует функциональную активность Тh клеток и определяющих путь, по которому будет преимущественно развиваться иммунный ответ. Основные эффекты  IL18 направлены на стимуляцию продукции таких цитокинов, как  IFN?, TNF?,  IL1?, а также молекул адгезии и факторов, стимулирующих апоптоз. На базе Института цитологии и  генетики СО РАН совместно  с Новосибирском институтом химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН было получено трансгенное растение морковь — Daucas carota L. —продуцент  IL18 человека. Для трансформации растений методом агробактериального переноса использовали  генетическую конструкцию, позволяющую проводить экспрессию  IL18 в виде  гибридного белка, несущего N терминальный HIS6!тракт нуклеотидную последовательность под управлением 35S промотора. Геномные ДНК отобранных растений были проанализированы на наличие последовательности  IL18 человека методом ПЦР. Во всех проанализированных растениях показано присутствие продуктов, соответствующих по размерам целевому  гену  IL18. Изучение иммунорегуляторных эффектов  IL18, экспрессирующегося в трансгенной моркови, проводилось на мышах линии С57Bl/6 и  (CBAЧC57Bl/6)F1, животные получали к стандартному рациону, в течение 16 дней трансгенную морковь в дозе 1,7–2  г/мышь ежедневно. В качестве контроля использовалась  группа мышей, получавшая обычную морковь в той же дозе, а также  группа мышей, содержавшаяся на стандартном рационе без добавок. Установлено, что прием в пищу моркови трансгенной по IL18 в течение 16 дней не влияет на спонтанную и митоген индуцированную пролиферативную активность спленоцитов и тимоцитов. Определение продукции  IFN? показало, что пероральный прием трансгенной моркови может достоверно стимулировать продукцию  IFN?  спленоцитами мышей. Влияние моркови, несущей  ген  IL18, на развитие клеточного иммунного ответа, оценивалась по степени выраженности реакции  гиперчувствительности замедленного типа на Т зависимый антиген  (эритроциты барана). Установлено, что добавление в пищу трансгенной моркови в указанной дозе в течение 16 дней достоверно стимулирует формирование клеточного иммунного ответа по сравнению с интактной  (обычный рацион) и контрольной  (добавление обычной моркови)  группой. При изучении формирования  гуморального иммунного ответа не выявлено достоверного влияния трансгенной моркови с  IL18 на уровень первичного  гуморального ответа на Т зависимый антиген  (ЭБ). Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что пероральное введение моркови, несущей  ген  IL18, достоверно стимулирует продукцию  IFN? спленоцитами, а также стимулирует клеточный иммунный ответ, регистрируемый по увеличении. реакции  гиперчувствительности замедленного типа.