загрузка...
 
Оценка чувствительности различных методов определения специфических антител к альфа  фетопротеину в сыворотке иммунизированных коз М.Б. Раев,   М.С. Красных , О.Л. Горбунова , Е.Г. Орлова , С.Ю. Родионов  Филиал Института иммунологии и физиологии УрО РАН, Екатеринбург;  ЗАО «Институт новых медицинских технологий», г. Краснокамск; Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН, г. Пермь
Повернутись до змісту

Оценка чувствительности различных методов определения специфических антител к альфа  фетопротеину в сыворотке иммунизированных коз М.Б. Раев,   М.С. Красных , О.Л. Горбунова , Е.Г. Орлова , С.Ю. Родионов  Филиал Института иммунологии и физиологии УрО РАН, Екатеринбург;  ЗАО «Институт новых медицинских технологий», г. Краснокамск; Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН, г. Пермь

Необходимым условием иммунизации животных является контроль уровня специфических антител в сыворотке крови. В настоящее время в лабораторной практике для оценки титра специфических антител наибольшее применение находит метод преципитации в геле по Оухтерлони. Однако этот метод малочувствителен и не позволяет количественно оценить уровень специфических антител в сыворотке иммунизированных животных. Поэтому, целью исследования явилась сравнительная оценка чувствительности двух методов: преципитации в  геле по Оухтерлони и турбидиметрического метода на примере определения уровня специфических антител к альфафетопротеину  (АФП) в сыворотке иммунизи! рованных коз. Титр специфических антител к АФП в сыворотке коз оценивали: • Методом преципитации в  геле по Оухтерлони. Чашки Петри заливали 1 % ным агаром. Через 30 мин. после застывания агара вырезали лунки. Лунки с раститрованной сывороткой располагали по окружности, а лунку с АФП — в центре. После внесения исследуемых образцов, чашки выдерживали во влажной камере при комнатной температуре в течение 24 ч. Оценку титра антител к АФП проводили по последней визуализируемой линии преципитации в ряду разведений сыворотки козы. • Турбидиметрическим методом. В 96 луночный полистирольный планшет вносили АФП с известной концентрацией и раститрованную козью сыворотку. Измерение проводили через  30  мин.  при  длине  волны  340  нм.  По  изменению оптической плотности оценивали титр специфических антител к АФП в сыворотке козы. Таким образом, в ходе проведенных исследований установили, что чувствительность турбидиметрического метода, как минимум, на порядок превосходит чувствительность метода преципитации в  геле по Оухтерлони. Также этот метод является существенно  более оперативным в процедурном исполнении, дающим не только качественную, но и количественную оценку. Быстрота и простата исполнения турбидиметрического анализа позволяет использовать его как экспресс метод.



загрузка...