загрузка...
 
Н.А. Зорин, Т.В. Аппельганс, Т.П. Маклакова, В.Н. Зорина ГОУ ДПО «Институт  усовершенствования врачей»,  г. Новокузнецк Сравнительное изучение уровней некоторых цитокинов, белков острой фазы,  тиреотропного  гормона и антител к  тиреопероксидазе при лечении аутоиммунного  тиреоидита
Повернутись до змісту

Н.А. Зорин, Т.В. Аппельганс, Т.П. Маклакова, В.Н. Зорина ГОУ ДПО «Институт  усовершенствования врачей»,  г. Новокузнецк Сравнительное изучение уровней некоторых цитокинов, белков острой фазы,  тиреотропного  гормона и антител к  тиреопероксидазе при лечении аутоиммунного  тиреоидита

Исследовали сыворотку крови 24 женщин с верифицированным аутоиммунным тиреоидитом (АИТ) до и через 6 месяцев от начала лечения L тироксином в адекватной дозе. До лечения констатированы повышенные концентрации аутоантител к  тиреопероксидазе  (АТТПО),  тиреотропного гормона (ТТГ), IL1?, IL6 и IFN?; неизменные концентрации ?2 макроглобулина (?2М) и ?1 антитрипсина (?1А), и IL2; пониженное содержание TNF? по сравнению со здоровыми. Через 6 месяцев лечения выявлена нормализация уровней ТТГ, IL6 и IFN?, а также значительное снижение АТТПО,  IL1? и TNF? на фоне неизменных уровней  IL2, ?2М и ?1А.  Таким образом, несмотря на лечение L тироксином, аутоиммунный процесс остается, о чем свидетельствует все еще высокий уровень АТТПО и повышенный уровень  IL1? .  (Цитокины и воспаление. 2006.  Т. 5, № 3. С. 46–48.)

Ключевые  слова:  аутоиммунный  тиреоидит, цитокины, ?2 макроглобулин, ?1 антитрипсин.

Аутоиммунные заболевания эндокринной системы, в частности аутоиммунный тиреоидит (АИТ),  сопровождаются синтезом аутоантител, способствующих нарушению механизмов эндокринной и цитокиновой регуляции [1, 4, 5, 7, 8]. Эффекторные функции пептидных гормонов и цитокинов реализуются при участии белков семейства макроглобулинов от этапа секреции до влияния на геном клеток мишеней  [3]. Целью исследования было изучение у больных АИТ до и после лечения комплекса показателей, включающего уровни циркулирующих аутоантител, ?2 макроглобулина, тиреоидных гормонов и цитокинов.

Материалы и методы

Обследовано 24 женщины с АИТ в возрасте от 23 до 56 лет до начала и через 6 месяцев после лечения  L тироксином. Диагноз АИТ был  установлен на основании «больших» диагностических признаков, а именно: первичного  гипотиреоза, наличия антител к  ткани щитовидной железы и  ультразвуковых признаков аутоиммунной патологии [5]. Венозную кровь на исследование брали в утренние часы, натощак, до начала терапии и через полгода лечения  гипотиреоза  L тироксиномв адекватной дозе (не менее 1,6 мкг/кг массы тела пациента) согласно «Клиническим рекомендациям Российской Ассоциации эндокринологов по диагностике и лечению аутоиммунного тиреоидита у взрослых» [5]. В сыворотке крови определяли концентрации  тиреотропного  гормона  (ТТГ), антител к тиреопероксидазе (АТТПО) и цитокинов IL1?, IL2, IL6, IFN? и TNF?. Исследование  концентрации цитокинов проводили твердофазным иммуноферментным методом  с применением реагентов фирм «Протеиновый контур»  (Санкт Петербург) и «Вектор Бест»  (Кольцово). Концентрации ?2 макроглобулина (?2 М) и другого острофазового белка крови ?1 антитрипсина  (?1 А) определяли методом ракетного иммуноэлектрофореза с использованием моноспецифических антисывороток и калибраторов  собственного производства  [2]. Для обработки результатов иммунохимического анализа применяли программу PC Microplate Manager  (Bio Rad, USA). Статистическую обработку данных проводили с помощью пакета прикладных программ InStat 2.0 (Sigma, USA).

Результаты и обсуждение

У пациенток с диагнозом АИТ до лечения были значительно увеличены концентрации аутоантител и ТТГ—они в среднем более чем в 10 раз превосходили допустимые пределы нормы  (табл.). Кроме того, выявлено значительное  (p < 0,0001) увеличение уровня IL1? (почти в 10 раз по сравнению с нормой) и несколько менее выраженное, но статистически значимое увеличение концентраций  IFN?  (p = 0,0139; в среднем трехкратное увеличение  по  сравнению  с  нормой)  и  IL6 (p < 0,0001; приблизительно в 6 раз выше нормы).

Таблица Концентрации изученных показателей в сыворотке крови больных АИТ до и после лечения

 

Примечание. * — достоверные отличия от  контрольной  группы; ** — достоверные отличия от  группы  с АИТ до лечения.

В то же время содержание IL2 в крови не отличалось от контрольных показателей, а уровень TNF? даже снижался  (p = 0,0083). Наконец, концентрации реактантов острой фазы ?1А и ?2 М оставались неизменными. Считается общепринятым, что  синтез  IL6, IL1? и TNF? тесно взаимосвязан  [6].  IL1?, TNF? и IL6 являются коиндукторами генов сывороточных белков—реактантов острой фазы воспаления, и активируют гены друг друга [3, 7]. Согласно полученным нами данным, при АИТ рост концентрации IL6 не приводил ни к изменению синтеза провоспалительных  цитокинов IL1? и TNF?, ни к развитию типичной острофазовой воспалительной реакции, что выражалось в отсутствии изменений уровней  ?1А и ?2М. Не изменялась и концентрация IL2 [35]. Недавно показано, что в крови больных АИТ с высокими титрами антитиреоидных антител присутствуют CD4+ и CD8+лимфоциты, продуцирующие IFN?, но не другие исследованные цитокины [7]. Данный факт имеет принципиальное значение для трактовки наших результатов: IFN? является ингибитором экспрессии основного рецептора эндоцитоза—липопротеинового рецепторного белка LRP1  (CD91), а именно через CD91 в клетку поступают регуляторные комплексы, состоящие из ?2 М и транспортируемых им цитокинов или пептидных гормонов [3]. Следовательно, увеличение концентраций цитокинов и ТТГ при АИТ можно рассматривать как результат снижения способности  гормонов и цитокинов проникать в клетки мишени за счет блокирования рецептора  транспортирующего их белка. Избыточный аутоантителогенез и увеличение концентрации ТТГ являются характерными чертами АИТ  [4, 5]. Через 6 месяцев от начала лечения пациенток с АИТ L тироксином в адекватной дозировке было констатировано статистически значимое снижение уровней ТТГ и АТТПО. Однако уровни ТТГ оставались несколько повышенными по сравнению с показателями, характерными для здоровых лиц; а концентрации АТТПО, несмотря на снижение, оставались в среднем в 8 раз выше, чем предельно допустимые (см. табл.). Содержание большинства изученных цитокинов  (за исключением  IL2) также значительно снижалось. При этом концентрации IL6 и IFN? нормализовались, содержание IL1? оставалась повышенным  (р = 0,0197), а уровень TNF? оказался значительно пониженным по сравнению со здоровыми (p < 0,0001). Выявленное нами снижение уровня TNF? при АИТ после лечения представляется важным. TNF? препятствует поддержанию иммунологической толерантности [6], и его снижение в результате проведенного лечения может служить дополнительным доказательством успешности терапии. Необходимо отметить, что нами выявлена большая индивидуальная вариабельность в уровнях IL1? и IL6 после лечения. Наконец, концентрации острофазовых белков ?1 А и ?2 М не изменялись при проводимом лечении АИТ, оставаясь в интервалах нормальных показателей. Наши данные согласуются с данными литературы, свидетельствующими о значительном повышении у больных АИТ спонтанной продукции провоспалительных цитокинов  (TNF?, IL1? и IL6) клетками периферической крови и снижении способности клеток отвечать на индуктор in vitro [1, 5]. Отмеченное нами снижение концентрации некоторых цитокинов после лечения АИТ тиреоидным препаратом может свидетельствовать о снижении активности аутоиммунного процесса при восстановлении функции щитовидной железы. Однако остающиеся повышенными уровни антител к тиреопероксидазе,  гетерогенность показателей содержания  IL6 и повышенный уровень  IL1? после лечения не позволяют  говорить о полном восстановлении иммунного статуса организма. Мы считаем, что оценка уровня  IFN? до и после лечения может быть использована в качестве дополнительного критерия оценки эффективности проводимого лечения.

ЛИТЕРАТУРА

1. Глазанова Т. В., Бубнова Л.Н., Трунин Е.М. и др. Продукция некоторых цитокинов  у больных  с аутоиммунными  заболеваниями щитовидной железы // Пробл. эндокринол. — 2004. — № 3. — С. 29–31.

2. Зорин Н.А., Жабин С.Г., Лыкова О.Ф. и др. Белки плазмы и сыворотки крови доноров // Клин. лаб. диагн. — 1992. — № 9–10. — С. 13–15.

3. Зорин Н.А., Зорина В.Н., Зорина Р.М. Универсальный модулятор цитокинов a2 макроглобулин // Иммунология. — 2004. — Т. 25, № 5. — С. 302–304.

4. Кнорринг Г.Ю. Цитокиновая сеть как мишень системной энзимотерапии // Цитокины и воспаление. — 2005. — Т. 4, № 4. — С. 45–49.

5. Фадеев В.В., Мельниченко Г.А. Гипотиреоз. — М.: РКИ Соверо пресс, 2004. — 286 с.

6. Ярилин А.А. Основы иммунологии. — М.: Медицина, 1999. — 608 с.

7. Karanikas G., Schuetz M., Wahl K. et al. Relation of anti TPO autoantibody titre and T lymphocyte cytokine production patterns  in Hashimoto’s  thyroiditis // Clin. Endocrinol. (Oxf.). — 2005. — Vol. 63, № 2. — P. 191–196.

8. Phenekos C., Vryonidou A., Gritzapis A.D. et al. Th1 and Th2 serum cytokine profiles characterize patients with Hashimoto’s thyroiditis (Th1) and Graves’ disease (Th2) // Neuroimmunomodulation. — 2004. — Vol. 11, № 4. — P. 209–213.

Comparative study of cytokines, acute phase proteins, thyrotropic hormone and antibodies to thyroid peroxidase in autoimmune thyroiditis under treatment N.A. Zorin, T.V. Appelgans, T.P. Maklakova, V.N. Zorina Institute of Postgraduate Medical Education, Novokuznetsk Blood samples from 24 women with verified autoimmune thyroiditis (AIT) before and 6 months after treatment with L thyroxin were investigated. Before treatment, increased concentrations of antibodies to thyroid peroxidase (anti&TPO), thyrotropic hormone (TTG), IL1? , IL6 and IFN? , unchanged levels of  ?2macroglobulin (?2 M), ?1 antitripsin ( ?1A) and IL2, and  lowered contents of TNF?   in compari& son with healthy donors were observed. After 6 months of  treatment,  levels of  TTG,  IL6 and  TNF ? became normal, anti TPO,  IL1?  and  TNF?   significantly decreased, and  concentrations of  IL2, ?2M, and ?1A  remained at  the  initial  level. Conclusion: despite  the  treatment,  the autoimmune process still persists as demonstrated by high  level of anti TPO and as yet elevated  level of  IL1?  in AIT patients treated with L thyroxine. (Cytokines and Inflammation. 2006. Vol. 5, № 3. P. 46–48.)

Key words: autoimmune thyroiditis, cytokines, ?2 macroglobulin, ?1 antitripsin.



загрузка...