Т.К. Борисова, Е.В. Сидорова НИИ вирусных препаратов РАМН им. О.Г. Анджапаридзе, Москва
Большинство «наивных» В-лимфоцитов несет на поверхности IgM и/или IgD. В ходе иммунизации антигеном может происходить изменение класса синтезируемых иммуноглобулинов (Ig) — переключение изотипа Ig с IgM на IgG, IgA и IgE. При иммунном ответе на многие белковые антигены (Т-зависимые антигены) показано участие Т-клеток и их факторов в процессах Ig-переключения. Растворимые полисахариды (Т-незави- симые антигены 2-го типа, ТН-2) способны индуцировать иммунный ответ без помощи антигенспецифичных Т-хелперов, при этом образуются, в основном, IgM-антитела и очень небольшие количества антител (АТ) других изотипов. Вместе с тем имеется немало данных, свидетельствующих о возможности переключения изотипа АТ при ответе на ТН-2.
Целью данной работы было изучение роли клеточных популяций и факторов в переключении изотипа АТ при иммунном ответе на ТН-2 антигены — ДНФ-фиколл и ДНФ-декстран. Для решения поставленной цели были использованы 2 модельные системы: 1) культура спленоцитов мышей СВА и 2) культура гибридных клеток, продуцирующих ДНФ-специфичные АТ IgM-изотипа. О величине иммунного ответа судили, определяя число антителообразующих клеток методом локального гемолиза в геле. Для удаления из суспензии спленоцитов Т-клеток применяли обработку клеток анти-Thy 1,2 моноклональными АТ в присутствии комплемента морской свинки. Изотип АТ и их количество определяли с помощью ИФА. Было изучено влияние кондиционированных сред (супернатант мышиной тимо- мы EL-4 и человеческой Т-Т-гибридомы МР6) и рекомбинантных цитокинов (rIL-2 человека, rIL-6 и rIFNy мыши) на иммунный ответ in vitro на ТН-2 антигены и на продукцию анти-ДНФ АТ клетками гибридомы.
Добавление супернатантов EL-4 и МР6, а также rIL-6 в культуру спленоцитов мышей приводило к повышению величины иммунного ответа на антигены и появлению IgG1 анти-ДНФ АТ. Аналогичные результаты наблюдали и при иммунизации in vitro спленоцитов, лишенных Т-клеток («В-спленоциты»). Присутствие в среде rIL-2 человека не влияло ни на величину ответа, ни на изотип АТ, а добавление IFNy, напротив, угнетало величину ответа. При добавлении в среду смеси цитокинов (rIL6 + rIFNy + EL-4-супернатант) в ходе иммунного ответа на ДНФ- фиколл наблюдали переключение изотипа антител на IgG1, IgG2a и IgG3. Полученные результаты свидетельствуют о том, что при иммунном ответе на ТН-2 под действием цитокинов может происходить переключение изотипа АТ. Поскольку использованные в работе факторы могут секретироваться не только Т-лимфоцитами, но и другими клетками (натуральные киллеры, макрофаги, В-лимфоциты), можно предположить, что при иммунном ответе на ТН-2 переключение изотипа Ig происходит под действием факторов, секретируемых не только Т-лим- фоцитами, но и другими клетками. Во 2-й модельной системе
культуре гибридных клеток, продуцирующих IgM, добавление в среду цитокинов приводило к увеличению секреции АТ, но не влияло на их изотип. Это может свидетельствовать о том, что для запуска переключения изотипа Ig недостаточно одних цитокинов, необходимы дополнительные сигналы, получаемые, возможно, при клеточных контактах В-лимфоцитов.