Цель занятия. Изучить иммунную систему птиц, общие положения об активном и пассивном иммунитете, характеристику биопрепаратов и методы применения вакцин.
Материалы и оборудование. Птица разного возраста;
кюветы, набор инструментов для вакцинации: шприцы-автоматы (для иммунизации цыплят против болезни Марека, введения инактивированных вакцин), игольчатый инъектор (для иммунизации против оспы), стеклянный рифленый шпатель, глазная пипетка или флакон с глазной пипеткой, ручной аппарат-спрей, стерильный флакон с водой, вата.
Примерный план занятия. Контрольные вопросы.
Объяснение преподавателя.
Демонстрация различных вакцин против инфекционных болезней птиц и инструментов для вакцинации.
Отработка студентами методов вакцинации.
Подведение итогов занятия.
Задание к следующему занятию.
СОДЕРЖАНИЕ ЗАНЯТИЯ
Понятие «вакцинация» включает в себя ряд мероприятий, цель которых предохранить птицу путем активизации ее специфической иммунной защитной системы против вирусных и бактериальных инфекций или инвазионных заболеваний.
Органы иммунной системы птиц. В иммунной системе птиц выделяют два основных лимфоидных органа: фабрициеву сумку и тимус, и вторичные, к которым относят селезенку, костный мозг и такие структуры, как гардериева железа, железы слепого отдела толстой кишки, пейеровы бляшки, дивертикул Меккеля (рис. 3).
Иммунитет — это защита, обеспечиваемая иммунной системой, способствующая развитию клеточного и гуморального иммунитета. Необходимо помнить следующие основные факты:
Т-клетки отвечают за клеточные иммунные реакции в целом. Они активируют В-клетки и запоминают любые встреченные антигены;
основная функция В-клеток — выработка антител. Последние известны как плазмоциты и отвечают за гуморальный иммунитет;
гранулоциты, макрофаги и другие клетки иммунной системы участвуют в неспецифических иммунных реакциях — фагоцитозе или цитотоксичности.
Сумка Фабрициуса начинает развиваться на пятые сутки эмбрионального развития, и уже к 12-му дню завершается ее формирование.
Своих максимальных размеров у кур она достигает в 3...4-месячном возрасте, а первые В-лимфоциты появляются на 8... 10-е сутки.
Тимус начинает развиваться на 3-и сутки инкубации как парный орган, состоящий из 6...7 долек с каждой
стороны шеи птицы. На 10-е сутки развития эмбриона в тимусе можно обнаружить лимфоциты, которые в нем созревают. Т-лим- фоциты принимают прямое участие в регуляции синтеза антител.
Вторичные лимфоидные органы служат местом депонирования лимфоцитов и дифференциации других иммунных клеток (рис. 4).
Характеристика иммунитета. Существует пассивный и активный иммунитет.
Пассивный иммунитет обеспечивается исключительно материнскими антителами, которые передаются от курицы цыпленку через яичный желток. Эта форма иммунитета развивается специфически в ответ на патогены или вакцинации, которым была подвергнута мать, а не цыпленок. Это в основном гуморальный иммунитет, обеспечиваемый иммуноглобулинами класса в (^О). Клеточный иммунитет передается через яйцо.
Уровень материнских антител у однодневных цыплят напрямую коррелирует с уровнем антител у матери и постепенно снижается по мере роста цыпленка (рис. 5). Защита, обеспечиваемая материнскими антителами, значительно варьирует в зависимости от заболевания: хорошую защиту отмечают против инфекционной
Рис. 5. Корреляция между уровнем антител у матери и материнских антител у цыпленка
*
антитела) и клеточном (цитотоксичность, фагоцитоз и др.).
В условиях хозяйства птиц часто повторно вакцинируют против конкретного возбудителя. Эту технику повторных вакцинаций называют гипериммунизацией или ревакцинацией. Гипериммунизация обеспечивает максимальный уровень антител, а также улучшает их качество (рис.6).
Биопрепараты для иммунизации.Применяют следующие вакцины:
инактивированные, в которых возбудитель болезни обезврежен;
живые аттенуированные, в которых ослаблены вирулентные свойства возбудителя.
Большинство вакцин готовят на куриных эмбрионах и выпускают в высушенном (лиофильном, лиофилизированном) состоянии. Вакцины следует хранить при температуре 5... 10 °С в специальных холодильниках, так как при более высокой температуре активность вакцины снижается; подмороженные вакцины выбраковывают (за исключением вакцины против болезни Марека).
Рис. 6. Изменение уровня антител после повторных вакцинаций — гипериммунизация. Стрелкой показаны вакцинации.
Инактивированные вакцины. Они содержат вирусные или бактериальные культуры, инактивированные физическими методами (температура, УФО, ионизирующая радиация и др.) или химическими (формальдегид, фенол, бета-пропиолактон, этанол, этиленамин).
Часто, чтобы повысить активность инактивированных вакцин, к ним добавляют адъюванты — вещества, усиливающие иммуно- генность антигенов вследствие избирательного влияния на В- или Т-лимфоциты, макрофаги. Широко используют адъювант Фрейнда, гидроксид алюминия, аэросил, хлорид кальция, фосфат алюминия, тапиоку, ланолин, холестерин, миндальное масло.
Положительные стороны. Инактивированные вакцины менее реактогенны и менее опасны осложнениями при массовой иммунопрофилактике.
Отрицательные стороны. К ним можно отнести следующие:
требуется индивидуальная иммунизация птицы (подкожно или внутримышечно), а это трудоемкий процесс; иммунитет наступает только через 10... 14 дней; инактивированной вакциной иммунизируют после нескольких вакцинаций живой аттенуированной. Только в некоторых случаях достаточно единичной инъекции инактивированной вакцины, чтобы создать высокий уровень длительной защиты.
Живые аттенуированные вакцины. Они содержат живые вирусы или организмы, чья патогенность ослаблена (аттенуирована) естественным путем (отбирают природно-ослабленные штаммы в условиях латентных или атипично протекающих инфекций) или искусственно — путем пассажа через соответствующие культурные среды, а также другими методами.
Положительные стороны. Нужно указать следующие достоинства:
иммунизация живыми аттенуированными вакцинами обеспечивает быструю защиту от 48 ч до 8 дней. Защита быстро развивается благодаря местным компонентам иммунной системы: антителам и иммунным клеткам слезной жидкости, слизистым оболочкам рта, респираторной и пищеварительной систем. Иммунитет длится примерно 4... 10 нед и дольше;
можно применять групповые вакцинации, например перорально: давать с питьевой водой, а также в виде крупнокапельного спрея или мелкокапельного аэрозоля;
чтобы создать длительную и надежную защиту, бывает достаточно разовой вакцинации (в случае болезни Марека, энцефаломиелита птиц, инфекционного ларинготрахеита, оспы птиц или потому, что к некоторым заболеваниям птицы восприимчивы только в течение определенного периода жизни и, таким образом, повторных вакцинаций в более поздний период не требуется — инфекционная бурсальная болезнь).
Отрицательные стороны. К недостаткам живых вакцин следует отнести такие особенности:
вызывают осложнения после иммунизации (но не все вакцины и в зависимости от возраста птицы) — паралич, парез крыльев и конечностей, шейных мышц, расстройство желудочно-кишечного тракта, дыхания; желточные перитониты; угнетение, снижение аппетита;
снижение яйценоскости в течение 2...3 нед; активизируют скрытые, хронически протекающие инфекции (респираторный микоплазмоз, эшерихиоз, пуллороз-тиф);
возможно вирусоносительство или бактерионосительство, а следовательно, вирусовыделение или бактериовыделение иногда очень длительно (до 2 лет): например вакцины против инфекционного ларинготрахеита;
существует опасность возврата к более вирулентному типу и распространения вируса среди невакцинированных птиц (вакцины против инфекционного бронхита, болезни Гамборо, инфекционного ларинготрахеита и реовируса);
возможна контаминация другими возбудителями (вакцины против болезни Марека могут быть контаминированы возбудителями лимфоидного лейкоза, ретиколоэндотелиоза и вирусом анемии цыплят).
Правша применения вакцин. Перед использованием любой вакцины необходимо обратить внимание: на целостность флакона или ампул; срок годности препарата;
ГУ (хранить при определенной температуре);
№ серии;
№ госконтроля;
наличие хлопьев, комков (после встряхивания); если комки есть, то вакцину нельзя применять.
При наличии механических частиц флаконы направить в ВГНКИ (предъявляют рекламацию).
Методы иммунизации птицы. Вакцину вводят интраназально, накожно, в перепонку крыла, перорально, в клоаку, интраокуляр- но, внутримышечно, методом спрея, подкожно.
Методы введения живых вакцин против основных вирусных болезней птиц приведены ниже.
Название болезни Методы введения вакцины
Болезнь Марека Подкожный или внутримышечный
Ньюкаслская болезнь В виде крупнодисперсного спрея для 1-й вакцинации
Накожный (путем втирания в перьевой фолликул) В перепонку крыла Инфекционный энце- Пероральный с питьевой водой фаломиелит В перепонку крыла
Вирусная анемия цыплят В перепонку крыла
Подкожный
Пероральный с питьевой водой Реовирусная инфекция Подкожный или внутримышечный
Интраназальный метод. Сухую вакцину разводят и закапывают глазной пипеткой в ноздрю птицы всех возрастов в объеме 2 капель, при этом другую ноздрю закрывают пальцем, благодаря чему удается глубже ввести вакцину в носовую полость. Перед иммунизацией у птицы убирают воду, а после введения вакцины поить разрешается через 1...1,5ч.
При вакцинации интраназальным методом иммунитет наступает на 8... 10-й день.
Надкожный метод. Заключается в том, что вакцину втирают в перьевые фолликулы. Для этого на нижней части голени одной конечности (с передней и наружной поверхности) непосредственно перед нанесением вирус-вакцины выщипывают перья на участке кожи с 20...25 перьевыми фолликулами. На обнаженную поверхность кожи наносят 2...3 капли вакцины жесткой волосяной щеткой (кисточкой) или стеклянной палочкой с шероховатой поверхностью. Вакцину втирают энергично, но осторожно, не травмируя кожу. Одной щеточкой (кисточкой) или стеклянной палочкой вакцинируют 15...20 птиц, после чего эти предметы обеззараживают кипячением.
Вакцинированную птицу обеспечивают полноценным рационом, сбалансированным по белкам, витаминам и минеральным веществам.
Реакция наступает на 5...8-й день после иммунизации и характеризуется припуханием перьевых фолликул, а иногда и кожи через 15...20 дней. Всю иммунизированную птицу просматривают на
.7-й день после вакцинации. При этом птицу, проявившую реакцию на введение вакцины или со слабой реакцией (т. е. птицу, у которой оказалось менее 60 % воспалившихся перьевых фолли
кул), иммунизируют повторно в голень другой конечности. Иммунитет наступает через 15...20 дней после вакцинации.
Пункция в перепонку крыла. Используют специальный аппликатор в виде одно- или двухзубцовой иглы. Перед иммунизацией аппликатор погружают в разведенную вакцину. Бороздки иглы должны быть заполнены вакцинным раствором. Птицу держат на боку, с вытянутым крылом. Ветспециалист прокалывает подкры- льевую перепонку в неоперенном месте, стараясь не касаться аппликатором оперения птицы и не попасть в вены, мышцы, кости и суставы.
Иммунитет наступает через 6... 10 дней после вакцинации. Об иммунизации свидетельствует местная воспалительная реакция: на месте прокола обнаруживают отек и покраснение кожи.
Пероральный метод. Его используют в производственных условиях наиболее часто. Вакцинировать рекомендуют в ранние утренние часы, так как птица в это время пьет много воды. Порядок вакцинации следующий. К воде, используемой для иммунизации, предъявляют определенные требования:
она должна быть чистой и питьевой, свежей, свободной от взвешенных органических веществ и бактерий;
иметь pH 5,5...5,7; воду с повышенной щелочностью следует подкислять;
быть свободной от хлора и каких-либо дезинфектантов: если вода хлорированная, следует перекрыть систему подачи хлора по меньшей мере за 48 ч до вакцинации и возобновить хлорирование через 12...24 ч после нее; чтобы нейтрализовать остаточный хлор и защитить вирус, в разведенную вакцину добавляют сухое обезжиренное молоко (2,5 г на 1 л воды) или тиосульфат натрия (16 мг на 1 л воды). Эти препараты добавляют в воду за 10 мин до разведения вакцины;
она должна быть с низким содержанием металлов, так как ионы металлов могут нейтрализовать вакцинный вирус.
Птице прекращают давать воду: бройлерам за 0,5...3 ч, яичным курам за 3...4 ч до начала вакцинации. Готовят необходимое количество поилок, чтобы 2/3 поголовья птицы пили одновременно. После наполнения поилок вакциной включают полностью освещение. Свет стимулирует активность птицы, и она начинает есть и пить.
Вакцину выпаивают в течение 2 ч. Давать корм и воду птице после вакцинации разрешается через 1... 1,5 ч.
Ориентировочное количество воды для растворения вакцины на 100 голов цыплят
яичных пород
Возраст птицы, нед
Количество воды, л5102040
2..А
5...10
Ориентировочное количество воды для растворения вакцины на 1000 голов бройлеров
Возраст птицы, нед
7
14
21
28
35
7
14
21
28
35
Более 40
При напольном содержании молодняк птиц можно иммунизировать, давая вакцину с кормом: таким образом вакцинируют против ньюкаслской болезни (применяя вирус-вакцину из штамма «Оровак—НБВЦ—ВК») или эшерихиоза (инактивированная вакцина). Последнюю применяют с кормом из расчета 0,1 мл вакцины на голову. Перед иммунизацией вакцину разводят питьевой водой в соотношении 1:3 и тщательно перемешивают с кормом.
Клоачный метод. Вакцину легко втирают в слизистую оболочку верхнего свода клоаки специальным рифленым стеклянным шпателем. Помощник фиксирует птицу и оперение в области клоаки. Ветспециалист в одной руке держит флакон, а в другой — шпатель, который погружает на глубину 1 см, после чего осторожно вынимает его, не касаясь стенок горлышка флакона, и оставшуюся на рифленой части шпателя вакцину (примерно 0,02 мл) наносит на открытую слизистую оболочку клоаки. Затем 5...6-кратным движением стеклянного шпателя при легком надавливании втирает вирус-вакцину в слизистую оболочку клоаки до появления интенсивной гиперемии. При иммунизации взрослой птицы необходимы более энергичные движения шпателем.
Если птица испражняется в момент иммунизации, ее вакцинируют повторно.
Шпатели перед вакцинацией и после однократного использования обязательно стерилизуют кипячением. Птице прекращают давать корм за 10... 12 ч до вакцинации.
На 5...6-й день после иммунизации учитывают реакцию слизистой оболочки клоаки (отечность и гиперемию) у 100 вакцинированных цыплят.
Если клоачная реакция отмечена у 80 % цыплят и более, считают, что иммунизация удовлетворительная, если у меньшего числа цыплят, то их иммунизируют повторно и одновременно выясняют причину недостаточной эффективности вакцинации. Иммунитет у привитой птицы наступает на 10-й день.
Интраокулярный метод. Это один из наиболее эффективных методов, так как обеспечивает введение полной дозы вакцины каждой птице.
Птицу следует держать таким образом, чтобы ее голова находилась в боковом положении, а поверхность глаза — в горизонталь-
5 Б. Ф. Бессарабов и др.
ном. Ветспециалист держит бутылочку с вакциной вертикально и вводит по одной капле каждой птице, не касаясь поверхности глаза.
Необходимо обязательно выдержать птицу в таком положении несколько секунд, чтобы вакцина успела распределиться.
Внутримышечный метод. Этим методом иммунизируют суточных цыплят против болезни Марека. Цыпленка охватывают со стороны спины, пропуская конечности между указательным и средним пальцами, большим пальцем фиксируют свободное крыло. Ветспециалист вводит вакцину внутримышечно в область бедра в объеме 0,2 мл.
Живую вакцину против болезни Марека можно вводить с помощью машины-автомата (Оешауак). Устройство работает под воздушным давлением. Вакцина вводится внутримышечно в конечность.
Метод спрей (крупнодисперсный). Этим методом вакцинируют как цыплят суточного возраста, так и взрослых птиц в птичниках. Обычно суточных цыплят иммунизируют в цехе инкубации после сортировки в транспортных контейнерах (ящиках), в которых содержится от 50 до 150 цыплят. Вакцина с помощью распылителя равномерно распределяется над всеми цыплятами. Часть вакцины попадает в глаза и в ротовую полость. Кроме того, цыплята охотно собирают маленькие капли разведенной вакцины друг с друга и с поверхности контейнера. Взаимная близость цыплят упрощает распространение вакцины за счет их непосредственного контакта друг с другом. При этом методе нужно учитывать, что оптимальный размер капель должен быть в пределах Ю0...300|х, так как именно они обеспечивают наиболее равномерное распределение вакцины, более мелкие капли имеют тенденцию находиться в потоке воздуха и не попадают в дыхательные пути.
Указанным методом прививают также уже подросших цыплят, физиологическое развитие которых значительно превышает уровень развития суточных цыплят. В этом случае используют аппараты различной модификации, но которые состоят из камеры высокого давления, штанги и распылительного агрегата. Эти аппараты образуют аэрозоли диаметром от 50 до 1000^. Часть вакцины вдыхается птицей, а остальное количество попадает в глаза, ротовую полость, на оперение либо оседает на пол, поэтому необходимо использовать большие объемы разведенной вакцины для обработки всех птиц — 15...30 л на птичник.
Аэрозольный метод (мелкодисперсный). Данным методом вакцинируют птицу против ньюкаслской болезни, инфекционного ла- ринготрахеита. Вакцина распыляется с помощью генератора САГ -1 или других агрегатов (рис. 7) путем подачи сжатого воздуха под давлением 0,35...0,4 МПа. Диаметр генерируемых капель меньше,
Рис. 7. Аппарат для аэрозольвой вакцинации:
А — генератор аэрозоля; Б — размер капель, вырабатываемых калиброванной насадкой; /—насос; .2 —баллон со сжатым воздухом; 3 — манометр; 4 — насадки
чем при методе дисперсного спрея. Дозу вакцины рассчитывают согласно наставлению по ее применению.
Подкожный метод. Вакцину (инактивированную) вводят в основание шеи. Эта зона имеет определенное преимущество, так как она у птицы наиболее чистая. Вытянув шею птицы, ветспециалист оттягивает кожу, слегка потянув оперение, и прокалывает ее в оттянутом месте.
Вакцинация в грудные мышцы. Это разновидность внутримышечного метода. В грудные мышцы иммунизируют инактивированными вакцинами. Во время вакцинации птица должна быть хорошо зафиксирована. Инъекционную иглу вводят в среднюю часть грудной мышцы на глубину 0,3...0,5 см под острым углом по направлению к голове (при введении иглы, направленной острием к хвосту, можно проколоть грудную кость и печень, что приведет к последующей гибели птицы).
ЗАДАНИЯ
Изучить особенности применения живых аттенуированных и инактивированных вакцин.
Освоить методы вакцинации птицы против инфекционных болезней.
Контрольные вопросы
Какие органы входят в состав иммунной системы птиц и чем она отличается от аналогичной системы млекопитающих животных?
Что собой представляют инактивированные вакцины и каковы способы их применения?
Какие методы иммунизации живыми вакцинами применяют в птицеводстве?
Каковы положительные и отрицательные стороны аттенуированных живых вакцин?
/—гардериева железа; 2 — тимус; 3 — селезенка; 4 — фабрициева сумка (бурса); 5— железы слепого отдела толстой кишки; 6— пейеровы бляшки; 7—дивертикул Меккеля; 8— костный мозг
Возраст птицы, нед
Более 40