Самостоятельная работа студентов: а) взятие проб крови из подкрыльцевой вены в пробирки; б) получение сыворотки; в) постановка на предметном стекле СКРА с поливалентным микоплазменным антигеном; г) учет реакций.
Этиология. Возбудитель — Mycoplasma gallisepticum, а также Mycoplasma synovia из рода Mycoplasma, занимает промежуточное положение между бактериями и фильтрующимися вирусами. Свойство микоплазм культивироваться на искусственных питательных средах (Эдварда) сближает их с бактериями, а незначительные размеры (0,05...0,8 мкм), благодаря которым они проходят через бактериальные фильтры, — с вирусами. По Романовскому—Гимзе окрашиваются в бледно-фиолетовый цвет.
Диагностика. Предварительный диагноз основан на эпизоото- логических, клинических, патологоанатомических данных. Диагноз подтверждают лабораторными исследованиями.
Эпизоотологические данные. Продолжительное время микоплазмы выживают в желтке яиц, хорошо культивируются в куриных эмбрионах, поэтому заболевание передается через инкубационные яйца. Цыплята заражаются также аэрогенным путем. К заболеванию восприимчива птица любого возраста, но наиболее чувствителен 1...2-месячный молодняк. К предрасполагающим факторам относят несоблюдение ветеринарно-зоогигиенических норм содержания цыплят.
В эпизоотологическом отношении важен факт синергидного действия микоплазм с возбудителями вирусных болезней — инфекционного бронхита, ларинготрахеита, оспы и бактерийных — эшерихиоза, сальмонеллеза, гемофиллеза и др., поэтому респираторный микоплазмоз часто проявляется в форме смешанной инфекции.
Клинические признаки. Основным клиническим признаком служит поражение дыхательных путей: ринит, одышка, кашель, трахеальные хрипы. У индеек нередко в патологический процесс вовлекаются подглазничные синусы.
Для респираторного микоплазмоза птиц характерны медленное его распространение в стаде, продолжительное течение, сопровождающееся задержкой роста молодняка и, как следствие, истощением; у кур — снижение яйценоскости.
Патологоанатомические изменения. При вскрытии наблюдают гиперемию и катаральное воспаление слизистых оболочек органов дыхания, в особенности воздухоносных мешков, в которых нередко обнаруживают фибринозные сгустки и мутный экссудат.
Бактериологическое исследование. Для выделения микоплазм делают посевы на питательные среды, заражают куриные эмбрионы, ставят биопробу на цыплятах, используют ИФА (иммуноферментный анализ).
Для прижизненной (ретроспективной) диагностики прибегают к серологическому методу: ставят кровекапельную реакцию агглютинации (ККРА) и сывороточно-капельную реакцию агглютинации (СКРА).
Антиген для СКРА или ККРА изготовлен из штамма возбудителя респираторного микоплазмоза птиц Mycoplasma gallisepti- cum.
Препарат, выпускаемый во флаконах, представляет собой окрашенную кристаллвиолетом жидкость, состоящую из взвеси обезвреженных фенолом микробных клеток, выпадающих в легко разбивающийся при встряхивании осадок.
Срок годности препарата 1 год со дня изготовления при условии хранения в сухом темном месте при температуре 5... 10 °С.
Антиген предназначен для прижизненной диагностики микоплазмоза кур и индеек. При этом ККРА применяют, чтобы определить эпизоотическое состояние стада, а СКРА, как более чувствительную, используют для индивидуальной диагностики болезни и чтобы уточнить степень распространения микоплазмоза.
При обследовании индюшиных хозяйств, а также кур и индеек, принадлежащих населению, используют только СКРА.
Обследуют 3...5 % стада кур или индеек в возрасте от 2 мес и старше в подозреваемых и благополучных по микоплазмозу хозяйствах.
За 20...25 дней до исследования на микоплазмоз птице прекращают давать антибиотики и препараты нитрофуранового ряда.
Для постановки СКРА и ККРА кровь берут до кормления или через 5...6 ч после него.
Для ККРА кровь получают из гребня и используют немедленно.
Для СКРА кровь берут в количестве 1... 1,5 мл из подкрыльце- вой вены каждой птицы в пробирки, предварительно увлажненные физиологическим раствором. Пробы крови выдерживают при комнатной температуре (18...25°С) 1..,1,5 ч, после чего отделяют сгустки от стенок пробирок и помещают на 10..,15 ч в холодильник (4...5 °С) для получения сыворотки.
Флаконы с антигеном перед употреблением тщательно встряхивают. Реакцию агглютинации ставят на хорошо вымытых и вытертых насухо предметных стеклах: наносят на них глазной пипеткой сначала две капли (0,05 мл) антигена, затем другой глазной пипеткой — одну каплю (0,025 мл) крови или сыворотки. После взятия каждой пробы крови или сыворотки пипетку промывают физиологическим раствором.
Компоненты реакции (антиген и пробы) смешивают покачиванием предметных стекол на грелке-качалке Артемичева. При отсутствии грелки-качалки предметные стекла с компонентами слегка подогревают над пламенем горелки, смешивая компоненты бактериологической петлей. При этом после каждой пробы бактериологические петли промывают в физиологическом растворе хлорида натрия с добавлением в него 0,5 % цитрата натрия.
Реакцию учитывают от нескольких секунд до 2 мин после соединения компонентов.
При положительной реакции образуются компактные сгустки (комочки). При отрицательной жидкость остается без изменения.
При выявлении положительно реагирующих птиц в хозяйствах проводят мероприятия согласно инструкции по борьбе с мико- плазмозом птиц.
Меры профилактики и борьбы. К ним относят следующий комплекс:
соблюдение санитарно-гигиенических и зоотехнических правил;
изолированное размещение разновозрастных групп птиц;
систематический мониторинг сывороток крови в РЗГА;
тщательная дезинфекция скорлупы яиц;
иммунопрофилактика. Институтом ВНИВИП создана инактивированная сорбированная вакцина против респираторного ми- коплазмоза птиц. Иммунологическая эффективность вакцины 80 %. Продолжительность иммунитета 6...8 мес. Благодаря вакцине сохранность поголовья увеличивается на 0,8...7 %, прирост массы тела птиц — на 150...200 г, снижается число случаев эшерихиоза до 30 %, повышается эффективность вакцинации против ньюкаслской болезни и инфекционного ларинготрахеита;
применение лекарственных препаратов:
тилан и его производные применяют с кормом, водой или аэрозольно;
эриприма концентрат (состав: тилозин [тартрат], сульфаметок- сазол, триметоприм, колистина сульфат). Такая комбинация активных компонентов обеспечивает активность препарата против микоплазменных, бактериальных и смешанных инфекционных заболеваний; препарат применяют орально в смеси с водой или кормом в следующих дозах: 1 кг/1000 л воды или 1,5 кг/1000 кг корма в течение 3...5 дней;
леновит — комплексный антибактериальный препарат, содержащий левомицетин, норсульфазол и хлортетрациклин. При пе- роральном применении левомицетин, хлортетрациклин и норсульфазол создают высокие концентрации в желудочно-кишечном тракте, а также легко проникают в органы и ткани, удерживаются на терапевтическом уровне 8...12 ч. Из организма активные компоненты леновита выводятся в основном через кишечник. Леновит применяют с лечебной целью при респираторном мико- плазмозе, эшерихиозе, пастереллезе, стафилококкозе, гемофиле- зе. Препарат дают птице с кормом два раза в сутки в течение
.7 дней в дозе 2,5 кг на 1 т корма;
тиамутин наиболее активен против М. gallisepticum, не способствует созданию резистентных штаммов; совместим с ионоформными кокцидиостатиками: диклазурилом (diclazuril), мадурамици- ном (maduramicin), ласалоцидом (lasalocid). Препарат уменьшает процент яиц, зараженных микоплазмами, на 10...20 %, увеличивает вывод цыплят на 5...10%, способствует увеличению прироста массы на 10...20 %; эффективен при смешанной инфекции респираторного микоплазмоза и эшерихиоза;
тетратиамутин содержит тиамутин и хлортетрациклин; эффективен при респираторном микоплазмозе, эшерихиозе, гемо- филезе (Haemophilus paragallinarum) и пастереллезе (Pasteurelia multocida); при профилактике и лечении иммуносупрессивной патологии, такой, как инфекционная бурсальная болезнь; совместим с ионоформным кокцидиостатиком — салиномици- ном.
ЗАДАНИЯ
Исследовать птицу на микоплазмоносительство. С этой целью: а) взять пробы крови из подкрыльцевой вены; б) получить сыворотку крови; в) поставить СКРА, используя поливалентный микоплазменный антиген.
Исследовать птицу в ККРА с вышеуказанными антигенами (реакцию поставить в грелке-качалке Артемичева).
Контрольные вопросы
С помощью каких серологических реакций выявляют микоплазмоноситель- ство?
Какие антигены используют для прижизненной диагностики респираторного микоплазмоза птиц?
В каком случае хозяйство считают неблагополучным по данному заболеванию?
В какие сроки исследуют птицу на респираторный микоплазмоз в благополучных и неблагополучных хозяйствах?