А.Л. Позняк, Л.Н. Петров, Т.Я. Вахитов Военно-медицинская академия МО РФ, С.-Петербург,
ГНЦ НИИ особо чистых биопрепаратов, С.-Петербург
Ранее нами было установлено, что у большинства больных (90 %) с мочеполовыми хроническими хламидиозами диагностируются дисбактериозы кишечника, преимущественно II—III степеней. Этиотропная терапия усугубляет дисбиотические состояния в кишечнике, что требует применения дополнительных курсов бактериотерапии. Использование для этих целей «чужеродной» микрофлоры в виде современных бактериопрепаратов не всегда обеспечивает надежный результат. В связи с этим актуален поиск принципиально новых лечебных препаратов. Одним из них является Актофлор — комплекс низкомолекулярных экзометаболитов лечебного штамма E. coli M-17. Ранее в опытах in vitro нами было показано, что этот препарат способствует росту ряда представителей нормальной микрофлоры и увеличению ее антагонистической активности.
Обследовано 106 мужчин с хроническим мочеполовым хла- мидиозом. Все пациенты были разделены на 3 группы: контрольную, которая получала плацебо, опытную группу 1 (29 человек) и опытную группу 2 (55 человек). Лица группы 1 получали Актофлор в течение всего курса этиотропной терапии (18—
сут.) по 50 мг в сутки в виде ректальных свечей без дополнительного приема бактериопрепаратов, а пациенты группы 2 получали его по аналогичной схеме, но на фоне приема бактери- опрепаратов. Бактериопрепараты (Лактобактерин, Витафлор, Бифидумбактерин, Колибактерин) назначали с учетом их минимального наличия (или отсутствия) в содержимом кишечника после его изучения для диагностики степени дисбактериоза.
Результаты исследования показали, что наиболее выраженные дисбиотические нарушения диагностировались у лиц контрольной группы, в меньшей степени — у пациентов опытной группы 1 и минимальные — у лиц, одновременно принимавших Актофлор и бактериопрепараты. На основании полученных результатов исследований сделан вывод о целесообразности применения препарата Актофлор для профилактики дисбактериозов у больных хламидиозами, а также с целью повышения эффективности применения современных бактериопрепаратов.
Е.В. Самбук, М.В. Падкина, Л.В. Парфенова, М.Н. Смирнов Лаборатория биохимической генетики Биологического НИИ СПбГУ, ООО «БИОТЕХ»
Применение непатогенных микроорганизмов — дрожжей- сахаромицетов, не содержащих токсических и пирогенных факторов, в качестве продуцентов рекомбинантных белков человека позволяет использовать эти белки в клинической практике. При экспрессии гетерологичного белка можно столкнуться с неожиданным вовлечением этого белка в метаболизм клетки дрожжей. Это приводит к ситуации, при которой попытки создания сверхпродуцента будут вести к снижению жизнеспособности клетки или к потере плазмиды. При этом a priori невозможно сказать, будет ли чужеродный белок участвовать в метаболизме клетки хозяина.
Дрожжи-продуценты INF? человека — имеют сниженную скорость роста и приблизительно 27 % клеток теряют плазмиду после 24 ч культивирования в неселективной среде. INF? в клетках млекопитающих приводит к нарушению функции митохондрий. Продукция INF? человека в клетках дрожжей сопровождается снижением активности цитохром С-оксидазы. Влияние INF? на клетки млекопитающих осуществляется за счет взаимодействия белка с соответствующим трансмембранным рецептором и последующей передачи сигнала с помощью JAK — STAT пути. Рекомбинантный INF? находится внутри клетки дрожжей, в которой отсутствуют рецепторы для цитокинов, но, возможно, существуют белки дрожжей, способные взаимодействовать с гетерологичным белком. Экстраклеточные домены многих рецепторов млекопита- ютттих, в частности, рецепторов цитокинов, инсулина, факторов роста содержат фибронектиновые повторы, Fn-III. В базе данных Proteome у дрожжей Saccharomyces cerevisiae идентифицировано только три белка, содержащих Fn-III домены: YKL071Wp, YEL043Wp и Chs5p. Ген CHS5 кодирует структуру белка, необходимого для активности синтазы хитина III. Функции двух других генов неизвестны. Полученные результаты позволяют предположить, что INF? человека функционирует в клетках дрожжей и так же, как в клетках млекопитающих, нарушает функцию митохондрий, что является причиной его высокой токсичности для клеток продуцента. Применение секреторных продуцентов позволяет снижать отрицательное влияние гетерологичного белка на метаболизм клетки дрожжей. Наиболее перспективным для создания секреторных продуцентов INF? человека является использование другого вида дрожжей, например, Pichia pastoris. В данном сообщении обсуждается влияние гетерологичных белков: пресинаптического глу- таматного рецептора крысы и INF? человека на физиологическое состояние штаммов-продуцентов Saccharomyces cerevisiae и Pichia pastoris.