С.Н. Козлова, Ю.А. Топорищев Академический медицинский центр «Семья и здоровое поколение» Уральской государственной медицинской академии, Екатеринбург Иммунофенотипирование лимфоцитов и уровень цитокинов сыворотки у беременных c вирусным гепатитом C
С.Н. Козлова, Ю.А. Топорищев Академический медицинский центр «Семья и здоровое поколение» Уральской государственной медицинской академии, Екатеринбург Иммунофенотипирование лимфоцитов и уровень цитокинов сыворотки у беременных c вирусным гепатитом C
Изучали количественный состав лимфоцитов периферической крови с маркерами CD3, CD4, CD19,CD16/56, CD11b, CD25, CD38, CD95, HLA-DR у 14 беременных женщин на сроке 28–36 недель с хроническим гепатитом C (ХГС), позитивных по РНК вируса гепатита С (HCV), у 51 пары в системе «мать — дитя» и у 7 здоровых беременных. Одновременно методом ПЦР проведено определение продукции цитокинов IL2, IL6, TNF, IFN IFN в группах с репликацией HCV и ее отсутствием. У беременных с активной формой вирусного гепатита С обнаружены признаки иммуносупрессии — снижение числа клеток с фенотипическими маркерами CD11b, маркерами активации CD38, HLA-DR. Выявлена прямая связь между содержанием клеток с маркера мимеж клеточной адгезии CD11b (Mac-1) и числом клеток с маркерами CD16/56 (NK). Индикация РНК вируса гепатита C во время беременности сопровождалась увеличением продукции провос-палительных цитокинов TNF и IL-6. Исследована продукция про воспалительных цитокинов у10 HCV-РНК-позитивных детей, рожденных матерями с ХГC. Развитие синдрома цитолиза при ПЦР-позитивном вирусном гепатите C у детей сопровождалось продукцией про воспалительных цитокинов IL-6, TNF? ?. В работе уточнены механизмы иммунного ответа у беременных и их потомства, представлены данные о критериях информативности и прогнозе риска хронизации HCV-инфекции. (Цитокины и воспаление. 2004. Т. 3, № 3. С. 10–16.)
По оценкам ВОЗ, в мире насчитывается более 500 млн человек, инфицированных вирусом гепатита С (HCV) и прогнозируется дальнейший рост распространения HCV инфекции в популяции населения. Особую значимость приобретает проблема изучения вирусного гепатита С в перинатологии и педиатрии. Аналитическая оценка европейских данных, опубликованных в конце 1990х гг. ,отражает противоречивость взглядов исследователей на риск вертикальной передачи инфекции от матери к ребенку, который варьирует в широком диапазоне от 0 [14] до 11,4 % [12], единичные работы информируют о более высоком риске трансмиссии НСV инфекции (28,6 %).В отечественных исследованиях частота перинатальной передачи от анти HCV позитивных матерей составляет 5–7 % [2]. По данным Консенсуса США (2002), при индикации РНК вирусного гепатита С показатель вертикальной передачи HCV возрастает до 10,5 %, а среди потребителей наркотиков—до 24 %.В последние годы получила приоритетное развитие гипотеза об участии в физиологическом течении беременности цитокинов (IL2, IFN?, TNF?),которые влияют на рост, жизнедеятельность плода и исход беременности [12]. В экспериментальных работах на мышах подтверждена их роль в снижении устойчивости к вирусным патогенам и значение материнской иммунной системы в усилении или ингибировании фетоплацентарной единицы [13].В литературе описаны физиологические изменения в иммунном статусе женщин в первом и третьем триместре беременности. Установлено ,что в III триместре снижается содержание CD4+Т лимфоцитов и натуральных киллеров в крови, что связывают с механизмом поддержания беременности. В исследованиях других авторов не установлено различий в количестве лейкоцитов у беременных и небеременных женщин. Существуют данные о том, что инфицирование матери вовремя беременности сопровождается увеличением продукции про и противо воспалительных цитокинов IL1, TNF?, TGF? макрофагами утеро плацентарной единицы [8]. Появились единичные публикации о взаимосвязи повышения содержания в амниотической жидкости IL6 с преждевременными родами у женщин [10].Отсутствует ясность в понимании механизмов регуляции иммунного ответа на HCV инфекцию у беременных. Диагностика вирусного гепатита С у детей первого года жизни затруднена циркуляцией в крови материнских антител. Не разработаны единые критерии верификации раннего инфицирования и прогноза исхода заболевания у ребенка, рожденного от матери с хроническим гепатитом С (ХГС). Данный аспект проблемы представляется значимым в связи с необходимостью внедрения новых технологий лечения и профилактики на ранних этапах формирования инфекционного процесса и снижения риска развития отдаленных последствий хронического гепатита и цирроза печени у детей. Общепринято, что ведущую роль в элиминации вируса из макро организма играет интенсивный цито токсичный, антиген специфический Т клеточный ответ. Сила и напряженность этого ответа регулируется цитокинами. В процессе эволюции вирусы приобрели механизмы ускользания от надзора иммунной системы человека, что создает предпосылки для персистенции инфекции. Принятая в настоящее время концепция механизмов иммунного ответа показывает, что секреция цитокинов IL2, IFN?, TNF? ведет к активации Th1 типа ответа, оказывающего противовирусный эффект, а секреция IL4, IL5, IL6, IL10 обеспечивает Th2 тип ответа и стимуляцию гуморального звена иммунитета [4]. Интерлейкины IL2,IL6, TNF? участвуют в реализации цитотоксических и воспалительных процессов в печени. Особый интерес представляют IL6 и TNF?, которые обладают плейотропным действием и играют важную роль в механизме противовирусной защиты. Повышение продукции IL6 индуцируетсинтез остро фазовых белков в печени, экспрессию молекул межклеточной адгезии (ICAM1), стимулирует гепатоциты, моноциты и гранулоциты, манифестируя тем самым переход воспалительного процесса в цирроз. Одновременно IL6 обладает определенным противовоспалительным действием, ограничивая выработку цитокинов Th1типа ответа [1, 4].Основными продуцентами TNF ? являются купферовские клетки печени, относящиеся к системе макрофагов. Высокий уровень TNF? связывают с индукцией апоптоза гепатоцитов и макрофагов; подобно IL6 он стимулирует экспрессию интегрина Mac1. Особую роль в усилении синтеза TNF? играет IFN?, который индуцирует продукцию провоспалительных цитокинов IL1, IL6,TNF?, экспрессию антигенов HLA класса I и II намембранах клеток и повышает эффективность презентации антигенов, усиливает экспрессию Fc рецепторов для IgG [6]. С высоким уровнем TNF? связывают появление основных клинических синдромов при вирусных гепатитах, таких как гепатомегалия, цитолиз и развитие холестаза. Реализация механизмов действия про воспалительных цитокинов отличается их с инергидным действием на клетку мишень [7], в связи с этим приобретает важность комплексная оценка стимулирующих и подавляющих эффектов основной цепочки про воспалительных цитокинов в развитии клиники инфекционного заболевания. В настоящее время отсутствуют работы, посвященные комплексной оценке иммунного профиля, продукции цитокинов с оценкой особенностей клиники в системе «мать—дитя» при вирусном гепатите С, что явилось основанием для проведения нашего исследования. Целью исследования являлось изучение субпопуляционного состава иммунокомпетентных клеток и продукции про воспалительных цитокинову беременных женщин с ХГС и разработка критериев информативности иммунодиагностики ипрогноза формирования гепатита С у потомства. Материалы и методы Под наблюдением в Академическом медицинском центре УГМА «Семья и здоровое поколение» находилось 86 беременных женщин со сроком гестации 28–36 нед. В первую группу(n = 14) включены женщины с репликативной формой вирусного гепатита С, подтвержденного методом ПЦР (РНК HCV+),вторую группу (n = 43) составили женщины с отсутствием репликации вируса гепатита С (РНК HCV1). Контрольная группа(n = 7) состояла из женщин с физиологическим течением беременности и отсутствием маркеров вирусных гепатитов. Сопоставление результатов проведено с контингентом беременных женщин (n = 29) с цитомегало вирусной (ЦМВ) инфекцией. Наблюдение за состоянием здоровья детей выполнено у 51 ребенка в системе «мать—дитя» на сроках 1, 3 и 6 мес.Все дети имели положительный результат в ИФА на суммарные антитела к HCV. Основная группа детей (n = 10) имела позитивные результаты полимеразной цепной реакции на HCV и синдром о комплекс врожденного вирусного гепатита С (синдром цитолиза, гепатоспленомегалия, холестаз). Во вторую группу включены дети, рожденные от матерей с хроническим гепатитом С, имеющие антитела к гепатиту С и отсутствие РНКHCV в сыворотке (n = 41). Контрольную группу составили здоровые дети (n = 18) с отсутствием в ИФА антител к HCV, негативные по РНК HCV в ПЦР и имеющие нормальные данные биохимического исследования крови (общий билирубин, конъюгированный и неконъюгированый билирубин, АСТ, АЛТ, ЩФ).Этиологическую расшифровку вирусного гепатита С проводили путем определения суммарных антител к HCV иммуноферментным методом с помощью тест систем третьего поколения ЗАО «Вектор Бест» (Новосибирск) и НПО «Диагности1ческие системы» (Нижний Новгород). Комплекс исследований у анти HCV позитивных детей дополнен изучением анти тел к структурным (core) и неструктурным (NS3, NS4, NS5) белкам HCV тест системами «РекомбиБест anti1HCV спектр» ЗАО «Вектор Бест» (Новосибирск). Индикация РНК HCV выполнена методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией наборами «Ампли Cенс HCV» (Москва). Определение уровня цитокинов в сыворотке крови IL2, IL6, TNF?,IFN?, IFN? изучено твердофазным иммуноферментным методом тест системами ООО «Протеиновый контур» (Санкт Петербург) согласно рекомендациям производителя с использованием ридера Stat Fax 303+. Иммунофенотипирование лимфоцитов проведено на проточном цитометре «Facscan» с использованием моноклональных антителфирмы Becton Dickinson. У беременных женщин на сроке 28–36 нед. изучены популяции клеток с фенотипическими маркерами CD3, CD4, CD19, CD16/56, CD11b,CD25, CD38, CD95, HLA1DR. Для статистической оценки различий между сравниваемыми величинами использовали t критерий Стъюдента и непараметрический U критерий Манна —Уитни с использованием программы Statistica 6.0. Обработка полученных результатов проводилась на компьютере Pentium II 500. Результаты и обсуждение При обследовании женщин выясняли анамнестические данные о заболеваниях, предшествующих настоящей беременности, и наличие сопутствующей патологии. Сведения, полученные в ходе клинического обследования, представлены в табл. 1. Среди беременных женщин с наличием суммарных антител к HCV в прошлом перенесли вирусный гепатит 52,6 %, причем у36,8 % из них до беременности был поставлен диагноз ХГС. У женщин с маркерами цито мегало вирусной инфекции не зарегистрированы эпизоды внутривенного употребления наркотиков, тогда как 26,4 % беременных с ХГС имели такие сведения в анамнезе. Синдром цитолиза с повышением уровня АЛТи АСТ в третьем триместре беременности зафиксирован лишь у8,7 % женщин. У беременных женщин с ЦМВ инфекцией в пять раз чаще встречался хронический аднексит, чем у женщин с ХГС. Статистически достоверных различий по заболеваниям органов пищеварения и почек между обеими группами не установлено.Исследование фенотипических маркеров лимфоцитов у РНКHCVпо
Таблица 1 Состояние здоровья беременных женщин с хроническим гепатитом С и цито мегало вирусной инфекцией(частота признаков, %)
Таблица 2 Содержание лейкоцитов и лимфоцитов разных типов в крови беременных женщин с репликативной формой гепатита C на сроке гестации 28–36 нед. (M ± m)
Примечание . p — достоверность различия показателей в сравниваемых группах
с физиологическим течением беременности и отсутствием маркеров вирусных гепатитов и TORCH инфекций. Изучение корреляционных взаимосвязей выявило прямую зависимость (r = 0,9, р < 0,001) между числом клеток с маркером межклеточной адгезии CD11b (Mac1) и числом клеток с маркерами CD16/56 натуральных киллеров (NK). Число активированных лимфоцитов СD3CD38+ коррелировало с уровнем CD8+ цитотоксических лимфоцитов (r = 0,81, р < 0,001). Получена корреляционная связь между числом активированных Т лимфоцитов с фенотипом CD3CD25+ и числомCD16/56+ NK клеток (r = 0,77, р < 0,01).Характер изменений суб популяционного состава лимфоцитов у HCVРНК позитивных беременных не позволяет однозначно трактовать их как специфичные для вирусного гепатита С. Вместе с тем снижение числа клеток с маркерами активации и межклеточной адгезии (CD38, CD11b,HLADR) у беременных с ХГС свидетельствует о более глубокой иммуносупрессии по сравнению с физиологическим течением беременности. Наиболее выраженные отличия отмечены по клеткам с фенотипом CD11b, участвующим в иммунном воспалении через механизм межклеточной адгезии,—их уровень снижен в четыре раза по сравнению с показателями при физиологическом течении беременности. Для выяснения характера продукции цитокинов при репликации HCV проведено определение уровня цитокинов в сыворотке беременных женщин. Полученные данные представлены в табл. 3 В группе беременных с репликацией вируса гепатита С уровень TNF? в крови достоверно превышает значение у беременных женщин с отсутствием репликативной активности вируса (р > 0,05), что подтверждает связь продукции TNF? с активностью HCV. Установлено также увеличение уровня IL6 у беременных женщин с репликацией вируса в три раза по сравнению сс физиологическим течением беременности и отсутствием маркеров вирусных гепатитов иTORCH инфекций. Изучение корреляционных взаимосвязей выявило прямую зависимость (r = 0,9, р < 0,001) между числом клеток с маркером межклеточной адгезии CD11b (Mac1) и числом клеток с маркерами CD16/56 натуральных киллеров (NK). Число активированных лимфоцитов СD3CD38+ коррелировало с уровнем CD8+ цитотоксических лимфоцитов (r = 0,81, р < 0,001). Получена корреляционная связь между числом активированных Т лимфоцитов с фенотипом CD3CD25+ и числом CD16/56+ NK клеток (r = 0,77, р < 0,01).Характер изменений суб популяционного состава лимфоцитов у HCVРНК позитивных беременных не позволяет однозначно трактовать их как специфичные для вирусного гепатита С. В месте с тем снижение числа клеток с маркерами активации и межклеточной адгезии (CD38, CD11b,HLADR) у беременных с ХГС свидетельствует о более глубокой иммуносупрессии по сравнению с физиологическим течением беременности. Наиболее выраженные отличия отмечены по клеткам с фенотипом CD11b, участвующим в иммунном воспалении через механизм межклеточной адгезии, их уровень снижен в четыре раза по сравнению с показателями при физиологическом течении беременности. Для выяснения характера продукции цитокинов при репликации HCV проведено определение уровня цитокинов в сыворотке беременных женщин. Полученные данные представлены в табл. 3.В группе беременных с репликацией вируса гепатита С уровень TNF? в крови достоверно превышает значение у беременных женщин с отсутствием репликативной активности вируса(р > 0,05), что подтверждает связь продукции TNF? с активностью HCV. Установлено также увеличение уровня IL6 у беременных женщин с репликацией вируса в три раза по сравнению с с физиологическим течением беременности и отсутствием маркеров вирусных гепатитов и TORCH инфекций. Изучение корреляционных взаимосвязей выявило прямую зависимость (r = 0,9, р < 0,001) между числом клеток с маркером межклеточной адгезии CD11b (Mac1) и числом клеток с маркерами CD16/56 натуральных киллеров (NK). Число активированных лимфоцитов СD3CD38+ коррелировало с уровнем CD8+ цитотоксических лимфоцитов (r = 0,81, р < 0,001). Получена корреляционная связь между числом активированных Т лимфоцитов с фенотипом CD3CD25+ и числом CD16/56+ NK клеток (r = 0,77, р < 0,01).Характер изменений субпопуляционного состава лимфоцитов у HCV РНК позитивных беременных не позволяет однозначно трактовать их как специфичные для вирусного гепатита С. Вместе с тем снижение числа клеток с маркерами активации и межклеточной адгезии (CD38, CD11b,HLADR) у беременных с ХГС свидетельствует о более глубокой иммуносупрессии по сравнению с физиологическим течением беременности. Наиболее выраженные отличия отмечены по клеткам с фенотипом CD11b, участвующим в иммунном воспалении через механизм межклеточной адгезии,—их уровень снижен в четыре раза по сравнению с показателями при физиологическом течении беременности. Для выяснения характера продукции цитокинов при репликации HCV проведено определение уровня цитокинов в сыворотке беременных женщин. Полученные данные представлены в табл. 3.В группе беременных с репликацией вируса гепатита С уровень TNF? в крови достоверно превышает значение у беременных женщин с отсутствием репликативной активности вируса (р > 0,05), что подтверждает связь продукции TNF? с активностью HCV. Установлено также увеличение уровня IL6 у беременных женщин срепликацией вируса в три раза по сравнению с
Таблица 3 Концентрация цитокинов в сыворотке крови беременных с репликацией HCV на сроке гестации 28–36 нед.(пг/мл, M ± m)
Таблица 4 Концентрация цитокинов в сыворотке крови детей в возрасте 2–4 мес.,рожденных от матерей с хроническим гепатитом С (пг/мл, M±m)
Примечание . р1, р2 — сопоставление показателей с контрольной группой (III); р3 — сопоставле1ние показателей между группами I и II.
моглобина при вирусном гепатите С у детей также имел связь с содержанием IFN? (r = 0,99,р < 0,05).Нами исследованы корреляционные связи между показателями биохимического анализакрови и уровнем цитокинов в сыворотке крови детей. Получена прямая зависимость между значением АЛТ и содержанием про воспалительных цитокинов IL2 (r = 0,9, р < 0,01) и IL6 (r = 0,88, р < 0,05); активность АСТ коррелировала с содержанием IL6 (r = 0,89, р < 0,01) в сыворотке крови. Содержание прямого билирубина имело высокую степень корреляции с IL2(r = 0,9, р < 0,01) и IL6 (r = 0,77, р < 0,05). Полученные данные косвенно свидетельствуют отом, что развитие синдрома цитолиза и нарушение обмена билирубина при активном вирусном гепатите С у детей связано с про воспалительными цитокинами IL2, IL6, продукция которых может служить дополнительным признаком активности вирусного процесса в печени с деструкцией гепатоцитов и развитиемвирусного гепатита. Нами проведено сопоставление сывороточного уровня цитокинов в системе «мать—дитя» при репликации вируса гепатита С (табл. 5).Получены более низкие значения продукции IFN? и IL2 у беременных женщин по сравнению с показателями у детей (р < 0,05). В то же время уровень TNF? HCV позитивных беременных (HCVРНК+) превышал показатели детей раннего возраста с подтвержденной репликацией вируса. Низкие показатели IFN? и IL2 у беременных могут быть обусловлены супрессией Th1 клеточного ответа во время беременностии установленным нами снижением числа лимфоцитов с фенотипом CD3CD38+, HLADR+. Известно, что Тh1 зависимый иммунный ответ при вирусном гепатите С мультиспецифичен, и в крови обнаруживаются Т клетки к различным эпитопам вируса HCV: E1/E2, геликазе вируса(N3), N4, N5a,N5b. В публикациях[3, 9] установлена зависимость между определением антител к неструктурным компонентам HCV (NS) и содержанием цитокинов у взрослых. С целью углубленной диагностики текущей вирусной инфекции и оценки информативности определения спектра антител в диагностике вирусного гепатита С нами проведено определение антител к структурным (core)и неструктурным (NS3, NS4, NS5) белкам HCV удетей с наличием и отсутствием репликации вируса HCV, подтвержденной методом ПЦР. Данные определения оптической плотности (ОП) антителк структурным и неструктурным белкам сыворотки представлены в табл. 6.Как следует из данных табл. 6, оптическая плотность сыворотки антител к вирусным эпитопам core и NS3 у детей с репликацией вируса (HCVРНК+) в полтора раза превышает показатели ОП HCV негативных детей (р1 < 0,05). У детей c подтвержденной репликацией HCV значительно чаще определяются антитела к неструктурным белкам NS3 HCV. Определение суммарных антител к HCV встречается с одинаковой частотой у детей с наличием и отсутствием репликации вируса. Для подтверждения диагноза вирусного гепатита С у детей раннего возраста наиболее информативным критерием, дополняющим ПЦР диагностику, является определение антителк вирусному белку N3: антитела этой специфичности встречаются у 64,2 % детей РНК позитивных детей против 23,5 % в группе сравнения с отсутствием репликации вируса.
Таблица 5 Концентрация цитокинов в сыворотке кровиу беременных и детей с репликацией HCV (РНК+)(пг/мл, M ± m)
Примечание . р — достоверность различия показателей в сравниваемых группах.
Таблица 6 Уровень и частота антител к структурным и неструктурным белкам в сыворотке кровидетей c вирусным гепатитом С и носителей антител к HCV (M ± m)
Примечание. ОП — оптическая плотность. Достоверность различий между сравниваемыми группа1ми: р1 — по величине ОП, р2 — по частоте (%) встречаемости антител.
При изучении корреляционных взаимосвязей выявлена высокая степень корреляции между индикацией в сыворотке антител к неструктурному белку NS3 (геликазе) HCV и наличием в сыворотке вирусной РНК (r = 0,97, р < 0,05), атакже и уровнем прямого билирубина (r = 0,89,р < 0,05). Обнаружена обратная зависимость активности щелочной фосфатазы от наличия антител к core (r = –0,96, р < 0,03) и антител к NS5вируса (r = –0,9, р < 0,03). В литературе опубликованы данные о связи между содержанием антител к NS3 и выявлением РНК вируса HCV вбиоптате у взрослых с ХГС [5]. Учитывая, чтоNS3 участок кодирует геликазу HCV, необходимую для его репликации, можно считать, что наличие антител к NS3 в высокой концентрации свидетельствует об активном вирусном процессе у детей .Влияние вирусной нагрузки на продукцию цитокинов Th1типа показано в работах зарубежных исследователей [11]. В нашем исследовании концентрация IFN? в сыворотке детей имела обратную зависимость от уровня антител к NS5 HCV (r = –0,96, р < 0,05). На основании полученных данных можно считать, что низкий уровень IFN? в сыворотке детей раннего возраста является одной из причин недостаточной активации клеток Th1 типа, что сопровождается поддержанием вирусной репликации и ведет к хронизации HCV инфекции. При мониторинге беременных женщин из «групп риска» по HCV инфекции и их потомства мы считаем целесообразным для ранней диагностики врожденного вирусного гепатита включение в программу обследования комплекса ПЦР диагностики и определения антител к неструктурным белкам HCV.
Выводы
1. У беременных женщин с ХГС формируется иммуносупрессия со снижением числа лимфоцитов с маркерами CD3, CD3CD38, CD11b, HLADR.
2. Снижение числа клеток с CD11b и маркером активации CD38 и угнетение продукции Th1 цитокинов IL2 и IFN? при активной репликации вируса могут поддерживать хронизацию инфекции и ее активацию у беременных женщинс наличием РНК HCV.
3. У беременных с ХГС повышена продукция провоспалительных цитокинов TNF? и IL6, что отражает активность инфекционного процесса и служит дополнительным маркером активации HCV инфекции у матерей и их потомства.
4. У детей раннего возраста с активной репликацией HCV продукция IL2 и IFN? повышена по сравнению с беременными, что сочетается с цитолитическим синдромом и нарушением билирубинового обмена.
5. Увеличение продукции IL6 и TNF? при ПЦР позитивном HCV является дополнительным иммунологическим маркером инфекционно воспалительного процесса в печени и ранним критерием формирования гепатита у детей раннего возраста.. При обследовании детей, рожденных от матерей с ХГС, для дифференциальной диагностики врожденного вирусного гепатита С от персистенции материнских суммарных антител кHCV необходимо внедрение комплекса исследований с определением РНК HCV и антител к его структурным и неструктурным белкам (NS3,NS4, NS5); у 64,2 % детей наблюдается раннее обнаружение антител к N3.7. Маркером риска хронизации HCV инфекции у детей, рожденных от матерей с ХГС, является низкая концентрация IFN? в сыворотке и выявление антител к N5 и РНК HCV в ПЦР.
ЛИТЕРАТУРА
1. Ботвиньева В.В. Роль субпопуляций Т лимфоцитов и лимфокинов в иммунном ответе // Педиатрия. — 1998. — № 4. — С. 106–108.
2. Ершова О.Н. Характеристика современных эпидемиологических особенностей НС вирусной инфекции и активность перинатальной передачи вируса гепатита С: Автореф. дис. ... канд. мед. наук / Научно исследовательский институт вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН. — М., 2000. — 29 с.
3. Курамшин Д.Х., Толоконская Н.П., Силков А.Н. и др. Содержание цитокиновТх1 и Тх2 типа в сыворотке крови больных гепатитом С // Журн. микробиол., эпидемиол. иммунобиол. — 2001. — № 1. — С. 57–61.
4. Маммаев С.Н., Лукина Е.А., Луговская С.А. и др. Продукция цитокинов у больных хроническим вирусным гепатитом С на фоне терапии интерфероном1?// Клин. лаб. диагностика. — 2001. — № 8. — С. 45–48.
5. Никитин И.Г., Сторожаков Г.И. . Хронический гепатит С: актуальные вопросы диагностики и лечения // Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии. — 2001. — № 3. — С. 7–11.
7. Соколов Д.И., Котов Ю.А., Симбирцев А.С., Фрейдлин И.С. Сравнение цитокинов по способности влиять на уровень секреции интерлейкина эндотелиальными клетками // Иммунология. — 2002. — № 1. — С. 32–37.
8. Ширшев С.В. Механизмы иммунного контроля процессов репродукции. —Екатеринбург, 1999. — 381 с.
9. Dolganiuc A., Kodys K., Kopasz K. et al. Hepatitis C virus core andnonstructural protein 3 proteins induce pro1 and anti1inflammatory cytokinesand inhibit dendritic cell differentiation // J. Immunol. — 2003. — Vol. 170,№ 11. — P. 5615–5624.
10. Ghidini A., C Jenkins B., Spong C.Y. et al. Elevated amniotic fluid interleukin16 levels during the early second trimester are associated with greater risk ofsubsequent preterm delivery // Am. J. Reprod. Immunol. — 1997. — Vol. 37,№ 3. — P. 227–331.
11.Lancaster T., Sanders E., Christie J.M. et al. Quantitative and functionaldifferences in CD8+ lymphocyte responses in resolved acute and chronichepatitis C virus infection // J. Viral Hepat. — 2002. — Vol. 1, № 1. —P. 18–28.
12. Tovo P.A., Palomba E., Ferraris G. et al. Increased risk of maternal1infant hepa1titis C virus transmission for women coinfected with HIV type 1. Italian studygroup for HCV infection in children // Clin. Infect. Dis. — 1997. — Vol. 25,№ 5. — P. 1121–1124.
13.Wegmann T.G., Lin H., Guilbert L., Mosmann T.R. Bidirectional cytokineinteractions in the maternal1fetal relationship: is successful pregnan1cy a TH2 phenomenon // Immunol. Today. — 1993. — Vol. 14, № 7. —P. 353–356.
14. Zanetti A.R., Tanzi E., Paccagnini S. et al. Mother1to1infant transmission ofhepatitis C virus // Lancet. — 1995. — Vol. 345. — P. 289–291.
Phenotypical markers of peripheral blood lymphocytes and serum levels of cytokinesin pregnant women with hepatitis CS.N. Kozlova, Yu.A. ToporischevThe Academic Medical Center «Family and Healthy Generation», Ural State Medical Academy, EkaterinburgThe content of peripheral blood lymphocytes with CD3, CD4, CD19, CD16/56, CD11b, CD25, CD38, CD95,HLA-DR markers was studied in 14 HCV-RNA positive pregnant women at 28-36 weeks of gestation withchronic hepatitis C, 51 mother and baby couples and 7 healthy pregnant women. At the same time, IL2,IL-6, TNF?, IFN? , IFN? production was evaluated by PCR in HCV-replication positive and HCV-replica-tion negative subjects. Signs of immunosuppression: decrease in amount of cells with CD11b phenotypemarkers, CD38 and HLA-DR activation markers, were found in pregnant women with active hepatitis. Thedirect relationship was found between the number of CD11b (Mac-1) and CD16/56 cells (NK). Presenceof HCV-RNA during pregnancy was accompanied by proinflammatory cytokines TNF? and IL6 productionincrease. Proinflammatory cytokines production was also investigated in 10 HCV-RNA-positive children,whose mothers had chronic hepatitis C. Cytolysis syndrome development in children with PCR-positivehepatitis was accompanied by proinflammatory cytokines IL-6 and TNF? ? ? ? ? production. Immune responsemechanisms in pregnant women and posterity and data concerning prediction of HCV-infection chroniccourse are discussed. (Cytokines and Inflammation. 2004. Vol. 3, No. 3. P. 10–16.)Key words: virus hepatitis C, pregnancy, cytokines.
